无创与有创正压通气对危重肺心病呼吸衰竭患者的疗效评价

目的 评价无创与有创正压通气在危重肺心病呼吸衰竭患者中的治疗效果。方法 2 0例危重肺心病呼吸衰竭患者随机分为A组和B组 ,每组 10例。A组进行有创通气和常规药物治疗 ,B组进行无创通气和常规药物治疗。结果 A组进行有创通气 2 4h后 ,10例患者均明显好转 ,呼吸频率、心率下降 ,PaO2 上升 ,PaCO2 下降 ,与治疗前比较均有显著差异 (P <0 .0 1)。人工机械通气天数平均为 (9± 4 )d ,住院天数平均为 (15± 5 )d。 10例患者 9例出院 ,1例因呼吸机依赖而死亡。B组无创通气 2 4h后仅 1例治疗有效 ,4例无明显变化 ,5例病情恶化。 9例患者均在 36h之内改为有创通气 ,其中 1例在气管插管时因心跳呼吸骤停死亡 ,2例在有创通气过程中死亡 ,余 6例患者均平稳撤机。人工机械通气天数平均为 (15± 6 )d ,住院天数平均为 (2 1± 6 )d ,与A组比较有显著差异性 (P <0 .0 5 )。结论 危重肺心病呼吸衰竭患者不宜选用无创正压通气 ,应尽早气管插管进行有创通气治疗。

气管插管并人工机械通气在危重肺心病呼吸衰竭患者救治中的作用和方法探讨

目的 探讨气管插管并人工机械通气在危重肺心病呼吸衰竭患者救治中的作用和方法。方法 2 86例危重肺心病呼吸衰竭患者均采用在纤支镜引导下经鼻、口的方式进行气管插管并行人工机械通气 ,多功能呼吸机先采用持续麻醉和辅助 /控制 (A/C)通气模式 ,待病情稳定后再改为间歇指令通气 (SIMV) +压力支持通气 (PSV) ,最后单用SIMV脱机。结果 成功救治 2 34例 ( 81 8% ) ,死亡 5 2例 ( 18 2 % ) ,并发症 72例 ( 2 6 9% )。

大鼠静注鞭毛蛋白后不同时相点肺急性炎症损伤的研究

目的研究经尾静脉注入鞭毛蛋白后,不同时相点大鼠肺水肿以及肺部炎症的发生情况。方法210只清洁级雄性Wistar大鼠,分三批,每批随机分为对照组和经尾静脉注入鞭毛蛋白致伤,2、4、6、12、24、48h时6个不同时相点检测组,共七组。正常对照组大鼠给予生理盐水,致伤组大鼠给予鞭毛蛋白50μg/kg,静注后分别于2、4、6、12、24、48h时,测定动脉血氧分压(PaO2);肺毛细血管通透性(Evans blue含量);肺组织湿干比值(W/D);肺泡灌洗液(BALF)细胞计数以及用ELISA法检测外周血、肺组织与BALF中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和IL-10细胞因子的含量。结果静注鞭毛蛋白后,随时间的增加,大鼠PaO2下降;毛细血管通透性增加;肺W/D增加;BALF的细胞计数增加;外周血、肺组织及BALF中,TNF-α、IL-1β含量增加,IL-10含量减少。在致伤组与对照组之间,以上各指标差异有统计学意义(P<0.05)。结论静注鞭毛蛋白后,致大鼠肺急性炎症损伤具有时间差异性。

肿瘤细胞内pH调节机制的研究进展

肿瘤细胞在有氧的条件下也优先进行糖酵解以提供能量，并生成大量乳酸；恶性肿瘤细胞胞膜葡萄糖转运载体和糖酵解酶的基因表达增强，这一改变是恶性肿瘤细胞有氧醇酵解（ａｒｅｏｂｉｃｇｌｙｃｏｌｙｓｉｓ）的关键性代谢标志［１］。一些正常组织（如运动时的骨骼肌）也...

鞭毛蛋白在脓毒症并发急性肺损伤中的研究进展

鞭毛蛋白是细菌鞭毛的主要成分,是脓毒症发病过程中强有力的前炎性致炎因子,能和TRL5结合并使之活化,激活NF-κB等转录因子,引起多种趋化因子和黏附分子分泌。在健康的志愿者中,血浆中鞭毛蛋白的浓度低于ELISA<0.1μg/mL的检测水平,而在脓毒症的患者中,血浆中鞭毛蛋白的浓度为(7.06±0.14)μg/mL,并且外周血鞭毛蛋白的水平和脓毒症持续的时间、肺损伤的程度、肺泡肺小动脉氧张力差值呈明显的正相关,和白细胞的减少程度也有相关的趋势。

人工机械通气在急性致死性肺水肿抢救中的作用

目的 探讨人工机械通气救治急性重症肺水肿的疗效。方法 对 38例急性重症肺水肿 (心源性和非心源性 )患者在传统常规治疗同时加用人工机械通气辅助呼吸 ,呼吸机经鼻、口插管或气管切开进行气道正压通气治疗 ,观察通气前后动脉血气中pH、PaO2 、PaCO2 、SaO2 的变化以及患者心率 (HR)、呼吸频率 (RR)、血压 (BP)和临床征象的变化。结果 通气治疗后 ,35例患者临床症状明显改善 ,pH、PaO2 、PaCO2 、SaO2 等参数与治疗前比较有显著性差异 (P <0 .0 1 ) ,顺利脱机。抢救成功率为 92 .1 % ,死亡 3例 ,死亡率 7.9%。结论 人工机械通气治疗急性重症肺水肿 ,能迅速改善患者症状和低氧血症 。

血管内皮黏附分子的功能和TNF-α及IL-1的致炎机制

目的通过观察肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1(IL-1)作用后大鼠肺微血管内皮细胞(PMVEC)中血小板内皮细胞黏附分子-1(PECAM-1)表达的改变,初步探讨血管内皮黏附分子的功能和TNF-α,IL-1的致炎机制。方法应用免疫组织化学法和流式细胞仪检测TNF-α和IL-1作用后大鼠PMVEC中PECAM-1表达的改变。结果流式细胞仪检测发现,TNF-α作用后大鼠PMVEC中PECAM-1较对照组显著减少,而IL-1作用后大鼠PMVEC中PECAM-1表达无显著改变;免疫组化检测发现,TNF-α和IL-1作用后大鼠PMVEC细胞间连接部的PECAM-1染色较对照组明显变淡。结论TNF-α,IL-1等炎性刺激物可能通过改变内皮细胞中黏附分子的表达和分布而发挥重要作用。

支气管镜介入在长期顽固性咯血患者治疗中的作用

目的探讨支气管镜介入在长期顽固性咯血患者治疗中的作用。方法选择经内科药物止血、血管介入栓塞无效,又不能耐受外科手术的106例长期顽固性咯血患者,经采用支气管镜介入定位局部联合应用冷生理盐水(4℃左右)、110 000肾上腺素、凝血酶及Olympus PSD电刀电凝术等方法进行止血治疗。结果106例患者治愈58例(54.7%),有效41例(38.7%),无效7例(6.6%),总有效率达93.4%。结论经支气管镜介入局部定位联合应用冷盐水、肾上腺素、凝血酶及电刀电凝术治疗长期顽固性咯血疗效快、操作简便、安全可靠,值得临床推广应用。

乌司他丁对重症急性胰腺炎肺损伤的防治作用

目的探讨乌司他丁对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)急性肺损伤(acute lung injury,ALI)的防治作用。方法84例SAP患者随机分为乌司他丁治疗组和对照组,每组42例,对照组给予常规治疗,治疗组则在常规治疗基础上加用乌司他丁治疗。分别于治疗后第0、3、7、10、14天分析患者动脉血气,以呼吸频率、血PaO2、氧合指数和肺部X线检查等为观测指标,观察乌司他丁治疗组与对照组之间肺损伤发生率差异以及对肺损伤的疗效。结果治疗组SAP肺损伤的发生率为39.6%,对照组为65.9%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);乌司他丁对各阶段ALI都有较好的治疗作用(P<0.01)。结论乌司他丁可以显著减少SAP引起的ALI的发生,并能促进SAP的好转,对SAP引起的ALI有预防和治疗作用。

老年多器官功能障碍综合征大鼠肿瘤坏死因子-α基因表达变化和意义

目的探讨组织中TNF-α含量及mRNA表达变化在老年MODS中的作用.方法老年组(20月龄)和青年组(3月龄)SD大鼠各40只,建立油酸/脂多糖(OA/LPS)二次致伤老年MODS和青年MODS模型.观察对照组及伤后2、6、24 h重要器官(肺、心、肝、肾)病理及功能的变化,ELISA法检测肺、心、肝和肾组织中TNF-α含量,RT-PCR法检测不同组织中TNF-αmRNA表达.结果 OA/LPS二次致伤MODS模型,肺脏是损害出现最早也是最重的器官,致伤后2 h青年组和老年组PaO2即显著下降至最低值(P＜0.01),伤后6 h,心、肝、肾生化指标达峰值(P＜0.05～0.01),在相同时相点老年鼠脏器损害重于青年鼠(P＜0.05～0.01).致伤2 h后肺、心、肝和肾组织中TNF-α mRNA表达及蛋白含量均显著升高(P＜0.05～0.01),且持续高于正常对照组(P＜0.05～0.01),以肺组织中升高幅度最大,老年组显著高于同时相点青年组(P＜0.05).结论 OA/LPS致伤早期老年鼠肺组织中TNF-α mRNA表达及蛋白含量迅速升高,可能是老年MODS肺损伤出现最早且重于青年MODS的机制之一.

雷公藤甲素对哮喘豚鼠嗜酸细胞凋亡与活性的影响

目的 :观察雷公藤甲素 (TP)对哮喘豚鼠支气管肺泡灌洗液 (BALF)中嗜酸细胞 (Eos)凋亡及活性的影响 ,探讨TP治疗哮喘的机制。方法 :以卵蛋白致敏激发制作豚鼠哮喘模型 ,随机分为哮喘组、TP组 ,密度梯度分离法分离BALF中的低密度Eos(HEos)及正常密度Eos(NEos) ,以TUNEL法检测细胞凋亡 ,免疫细胞化学的方法检测EosEG2 +。结果 :用TP 2 4h后细胞总数及不同密度Eos数量均明显低于哮喘组 (P <0 .0 1) ,以HEos下降为明显 (P <0 .0 5 ) ,BALF中Eos以NEos为主 ;TP组Eos凋亡明显高于哮喘组 (P <0 .0 1) ,不同密度Eos凋亡率无明显差异 ;EG2 +检测显示 ,哮喘组HEos明显高于NEos,表明哮喘时以HEos增加为主。TP组EosEG2 +明显低于哮喘组 ,HEos与NEosEG2 +无明显差异。结论 :TP可促进哮喘豚鼠肺内Eos凋亡 ,抑制Eos活性 ,这是其减少肺内Eos浸润。

过氧化物酶增殖体激活受体α mRNA在急性肺损伤大鼠肺组织表达的变化

目的观察内毒素(LPS)复制的急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织过氧化物酶增值体激活受体α(PPARα)mRNA表达的变化,探讨PPARα在ALI中可能的作用。方法将40只雄性Wistar大鼠随机分为对照组,LPS致伤1、2、4、8h组。用LPS(5mg/kg)静脉注射复制大鼠ALI模型,分别在LPS致伤后1、2、4、8h时处死大鼠,采用RT-PCR与ELISA法检测肺组织中PPARα和肿瘤坏死因子α(TNFα)mRNA的表达及肺组织匀浆中TNFα浓度。结果LPS致伤后2、4、8h肺组织病理积分较对照组明显升高(P均<0.01);LPS致伤后2、4hPPARαmRNA表达(IOD值)较对照组显著降低(P<0.05);LPS致伤后1、2、4、8hTNFαmRNA(IOD值)和蛋白水平表达均较对照组显著升高(P均<0.01)。结论PPARαmRNA在ALI大鼠肺组织表达降低;而肺组织TNFαmRNA和蛋白水平均升高。PPARα在ALI的发病机制中具有一定的作用。

糖皮质激素受体基因转染对肺泡巨噬细胞表达炎性因子的影响

目的:分析过量表达的外源性糖皮质激素受体在调控肺泡巨噬细胞表达炎性细胞因子中的作用。方法:实验于2005-10/2006-03在解放军南京军区南京总医院呼吸病实验室完成。①选用成年健康Wistar大鼠10只,雌雄不拘。采用大鼠糖皮质激素受体真核表达质粒pCMV-rGR转染体外培养肺泡巨噬细胞,将肺泡巨噬细胞分为转染组与非转染组,其中转染组细胞在质粒转染24h后用于实验,各组对以下时相点进行观察:正常对照(加等量生理盐水)、脂多糖+地塞米松作用4,8和12h,脂多糖与地塞米松作用浓度分别为100μg/L,1×10-5mol/L,于不同时相点收集细胞。②转染24h后WesternBlotting检测细胞总蛋白和核蛋白中糖皮质激素受体蛋白表达变化。同时收集细胞培养上清,采用酶联免疫吸附法浊定细胞培养上清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β水平。③多组间比较用方差分析,两两比较用SNK检验。结果:①质粒转染肺泡巨噬细胞后糖皮质激素受体表达变化:转染组细胞总蛋白中糖皮质激素受体表达明显高于非转染组(3.75±0.25,1.21±0.16,P<0.01),转染组细胞核蛋白中糖皮质激素受体表达量与非转染组相近(1.15±0.12,1.09±0.11,P>0.05)。②脂多糖和地塞米松作用后核蛋白中糖皮质激素受体表达变化:脂多糖和地塞米松作用后4,8,12h转染组细胞核蛋白中糖皮质激素受体表达量分别为4.02±0.09,2.13±0.08,1.22±0.15,非转染组细胞核蛋白中糖皮质激素受体表达量分别为4.08±0.13,2.09±0.11,1.19±0.17,两组细胞核蛋白中糖皮质激素受体表达变化趋势一致,均于4h达到峰值,8h显著降低,12h达到最低,两组同时相点比较,差异不明显(P>0.05)。③脂多糖和地塞米松作用后细胞培养上清中细胞因子表达变化:转染组脂多糖和地塞米松作用后4,8,12h肿瘤坏死因子α表达分别为(32.16±3.99),(56.82±8.43),(73.34±9.97)ng/L,非转染细胞分别为(34.28±4.25),(59.82±9.65),(71.41±8.35)ng/L;转染组脂多糖和地塞米松作用后4,8,12h细胞上清中白细胞介素1β质量浓度分别为(67.57±18.37),(83.17±8.55),(97.55±8.27)ng/L,非转染分别为(62.23±15.64),(85.72±9.37),(99.07±9.25)ng/L。两组细胞上清中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β表达随时间逐渐增加,均于12h均达到峰值,同时相点两组比较均无明显差异(P>0.05)。结论:①通过体外糖皮质激素受体基因转染可以有效地在肺泡巨噬细胞中过量表达外源性糖皮质激素受体,并且定位于胞质内。②地塞米松作用后,肺泡巨噬细胞核内糖皮质激素受体表达明显增加,但随后又出现表达下调现象。③体外基因转染后胞质中过量表达的外源性糖皮质激素受体不能发生核移位,所检测的均为内源性糖皮质激素受体。④通过基因转染而过量表达的外源性糖皮质激素受体,不能发挥正常的抑炎生物学活性。

应用腺病毒载体介导RNA干扰技术构建糖皮质激素受体基因阻断的人U937巨噬细胞模型

目的:利用腺病毒载体介导的RNA干扰技术,建立糖皮质激素受体基因阻断的人U937巨噬细胞模型。方法:实验于2004-06/2005-05在解放军第三军医大学新桥医院呼吸研究所实验室完成。将针对糖皮质激素受体发挥RNA干扰效应的合成寡核苷酸序列连入含有绿色荧光蛋白基因的腺病毒穿梭质粒pRNAT-H1.1/Adeno中,在含有pAdEasy-1病毒骨架的BJ5183大肠杆菌内进行同源重组;重组子通过脂质体介导转染293T细胞,并在293T细胞内包装为具有感染能力的病毒颗粒,通过反复感染扩增病毒以达到感染靶细胞的适当滴度,通过绿色荧光表达来监控腺病毒扩增;应用Westernblot法检测U937巨噬细胞感染后糖皮质激素受体蛋白的表达。结果:转染腺病毒载体的293T细胞表达绿色荧光,随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应,经过3轮扩增,病毒达到合适的滴度。受腺病毒感染的U937巨噬细胞内糖皮质激素受体蛋白表达明显降低。结论:可以成功构建针对糖皮质激素受体基因的RNA干扰腺病毒载体。

构建消除糖皮质激素抵抗新靶点的BAG-1质粒表达载体

目的:利用RNA干扰技术,建立脂多糖和地塞米松作用大鼠肺泡巨噬细胞BAG-1基因阻断模型,并阐明BAG-1表达对糖皮质激素受体抗炎活性的影响。方法:本实验于2006-02/09在南京军区南京总医院呼吸病实验室进行。选用健康SPF级Wistar大鼠10只,鼠龄四五周,雌雄不拘。采用支气管肺泡灌洗获取大鼠肺泡巨噬细胞,将分离培养得到的大鼠肺泡巨噬细胞随机分为4组:正常对照组、阴性对照组、SiBAG-1α转染组及SiBAG-1β转染组。通过在线寻找针对BAG-1基因的RNA干扰靶序列并设计对应的寡核苷酸序列,将退火的合成寡核苷酸序列插入pSilencer3.1H1-hygro质粒载体,构建RNA干扰质粒SiBAG-1α和SiBAG-1β,经测序确认后,转染大鼠肺泡巨噬细胞,阴性对照组是试剂盒提供的阴性对照质粒pSilencer3.1H1-negetive。运用细胞免疫组织化学法检测各组细胞核中BAG-1表达变化,以胞核中积分吸光度平均值表示BAG-1表达的相对强度;运用电泳迁移率改变分析法检测各组糖皮质激素受体活性变化,以扫描条带的灰度值与滞后带面积之积表示糖皮质激素受体的活性。结果:①合成的寡核苷酸片段正确连入pSilencer3.1H1-hygro质粒载体,成功构建针对BAG-1基因的RNA干扰重组质粒SiBAG-1α和SiBAG-1β(上海博亚公司测序号分别为1524-036和1524-037)。②质粒SiBAG-1α转染组胞核内BAG-1蛋白表达较正常对照组明显降低(3.46±0.75,13.58±0.47,P<0.05),而质粒SiBAG-1β转染组胞核内BAG-1蛋白表达与正常对照组比较差异无显著性意义(15.27±0.89,13.58±0.47,P>0.05)。③质粒SiBAG-1α转染组细胞糖皮质激素受体活性与正常对照组明显增强(9.62±0.47,2.65±0.22,P<0.05),质粒SiBAG-1β转染组细胞糖皮质激素受体活性与正常对照组比较差异无显著性意义(2.79±0.57,2.65±0.22,P>0.05)。结论:成功地构建并筛选出一个特异而高效地阻断BAG-1表达的质粒表达载体SiBAG-1α,抑制BAG-1表达可恢复糖皮质激素受体抗炎活性,逆转糖皮质激素受体活性下降所致的糖皮质激素抵抗。BAG-1是消除糖皮质激素抵抗的新靶点。

TNF-α、IL-1β 、LPS对人多核白细胞、脐静脉内皮细胞血小板内皮细胞粘附分子-1表达的影响

目的：初探炎性刺激对人多核白细胞（ＰＭＮ）和脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）的血小板内皮细胞粘附分子－１（ＰＥＣＡＭ－１）表达的影响和ＰＥＣＡＭ－１的可能作用。方法：使用流式细胞仪和免疫组化法，观察脂多糖（ＬＰＳ）、白介素（ＩＬ）－１β和肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）－ａ对ＰＭＮ和ＨＵＶＥＣ ＰＥＣＡＭ－１表达的变化。结果：ＬＰＳ、１Ｌ－１β和ＴＮＦ－ａ可引起ＰＭＮ表达ＰＥＣＡＭ－１蛋白减少，而对ＨＵＶＥＣ ＰＥＣＡＭ－１的表达无显著影响，但组化显著在ＨＵ－ＶＥＣ连接部的ＰＥＣＡＭ－１染色变淡。结论：上述炎性刺激物不仅可引起ＰＭＮ表达ＰＥＣＡＭ－１减少、激活ＰＭＮ，而且可改变内皮细胞ＰＥＣＡＭ－１的分布，因此ＰＥＣＡＭ－１在炎症中可能起重要作用。