生长因子受体反义基因逆转肝癌细胞的恶性表型

目的应用反义技术原理将生长因子受体反义基因,导入人肝癌SMMC-7721细胞,阻断肝癌细胞生长因子与其受体的相互作用,研究其对肝癌细胞恶性表型的逆转作用。方法构建人胰岛素样生长因子Ⅱ型受体(IGF-ⅡR)正、反义基因重组真核表达质粒,用磷酸钙-DNA共沉淀方法转染人肝癌细胞株SMMC-7721,经G418培养基筛选得到稳定的抗性细胞。采用Northern杂交检测反义基因转染细胞内源性IGF-ⅡR基因mRNA转录的抑制,同时观察转染细胞克隆形成率,细胞生长曲线和软琼脂生长能力的变化。结果 IGF-ⅡR反义基因转染后,肝癌细胞的内源性IGF-ⅡR基因mRNA转录受到有效抑制;各组转染细胞克隆形成率分别为:空载体组22.0±3.6,正义组13.3±2.1,反义组4.3±2.1,反义基因转染细胞克隆形成率明显降低;软琼脂培养基细胞集落形成数为:SMMC-7721组254.8±15.9,空载体组196.4±30.4。正义组99.4±23.0,反义组0.0±0.0,说明反义基因转染细胞失去在软琼脂上生长的能力;但细胞生长曲线无明显变化。结论应用反义策略干扰肝癌细胞生长因子受体基因的异常高表达状态,可以有效阻断配体与受体间作用的生长刺激信号环路,一定程度地抑制肝癌细胞的恶性表型。

微小RNA-133a在肝细胞癌组织的表达及其作用机制

目的观察微小RNA（miRNA，miR）-133a在肝细胞癌组织中的表达以及对肝癌细胞生物学行为的影响。 方法收集15例患者肝癌组织和癌旁组织，定量聚合酶链反应（PCR）检测miR-133a的表达。采用细胞增殖实验、细胞周期测定、划痕实验以及侵袭实验观察miR-133a过表达对肝癌细胞株Huh7的细胞生物学行为的影响。 结果与癌旁组织比较，miR-133a在肝癌组织中的表达水平显著下降，差异有统计学意义（0.40±0.17比1.10±0.32，P＝0.000）；与正常肝细胞株LO2比较，在肝癌细胞株HepG2和Huh7中miR-133a的表达显著下调，差异有统计学意义（1.00比0.20±0.11比0.28±0.09，P＝0.000）；进一步构建miR-133a过表达Huh7细胞株，细胞增殖实验结果表明，细胞培养36、48、72 h，过表达miR-133a的Huh7细胞增殖能力显著低于对照组，差异有统计学意义（0.40±0.03比0.55±0.03；0.44±0.02比0.66±0.02；0.64±0.04比1.14±0.03，P＝0.000）；细胞周期分析，过表达miR-133a的Huh7细胞分裂阻滞在G1期（41.69±1.22比54.23±4.35，P＝0.000）；划痕实验显示，过表达miR-133a的Huh7细胞较对照组细胞的迁移能力显著下调，48 h划痕距离百分比分别为（80±5）%和（50±12）%，差异有统计学意义（P＝0.016）。对照组细胞与过表达miR-133a的Huh7细胞侵袭能力差异无统计学意义（P＝0.404）。 结论miR-133a在肝癌肿瘤组织中低表达，且其表达与肿瘤细胞株增殖和迁移能力的改变有关，提示miR-133a参与调节肝癌细胞的生物学行为。

幽门螺杆菌感染的治疗

幽门螺杆菌感染的治疗陈洁平徐采朴解放军第三军医大学第一附属医院消化科四川省重庆市６３００３８ＳｕｂｊｅｃｔｈｅａｄｉｎｇｓＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｉｎｆｅｃｔｉｏｎｓ／ｔｈｅｒａｐｙＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｐｙｌｏｒｉ主题词螺杆菌感染／治疗螺杆...