雄犬功能尿道重建预防前列腺癌根治术后尿失禁的研究

目的探索预防前列腺根治术后尿失禁的新方法及其尿动力学依据。方法20条雄犬随机分成两组,A组切除前列腺及远端2.0cm后尿道,B组切除前列腺及远端2 cm后尿道,用宽度为正常尿道周径,长度为1 cm膀胱前壁带蒂肌管代替功能尿道,术前及术后1月行尿动力学检查,并观察雄犬尿失禁情况。结果术后尿动力学指标及尿控率B组明显优于A组。结论膀胱前壁带蒂肌管功能尿道重建术是预防前列腺根治术后尿失禁可供选择的方法。

酶消化法获得成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞的体外原代培养及其特征鉴定

目的:建立成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞的原代培养方法,为进一步观察其电生理特性提供目标细胞。方法:实验于2005-04/08在第三军医大学第一附属医院中心实验室完成。①细胞提取:取1～2个月龄成年豚鼠2只,雌雄不限。麻醉状态下处死,下腹部10g/L碘伏消毒后,即刻由腹部正中切口、于膀胱颈处取出膀胱,于解剖显微镜下仔细剔除膀胱外膜,纵行剖开膀胱、去除膀胱黏膜,将膀胱肌层置入含双抗的磷酸盐缓冲溶液中浸泡10min。将上述处理的肌层组织剪成1mm小块,在含双抗的磷酸盐缓冲溶液中漂洗2次;换3入10g/L胶原酶P溶液,盖紧瓶盖,置入37℃培养箱中消化30min,完全消化溶解后,移入离心管中离心。②细胞培养:细胞沉淀中加入新鲜配制的达尔伯克()氏改良培养基溶液(含体积分数为0.1的胎牛血清),吹打后按每瓶(容积25mL)含(25～30)×10活细胞接种在培养瓶4内,37℃,积分数为0.05的CO2孵箱内静置培养;细胞接种第2天,可体见胞体为梭形并有两个细胞突起的细胞贴壁,平滑肌细胞尚未贴壁。将未贴壁的平滑肌细胞转移至另一培养瓶,孵箱内静置3d后,可见平滑肌细胞贴壁。③培养细胞的观察与鉴定:采用相差显微镜观察和免疫细胞化学方法鉴定。结果:①体外培养第2天可见胞体为梭形且胞体两极有两个细长突起的细胞贴壁,该类细胞酪氨酸蛋白激酶受体免疫细胞化学染色阳性,平滑肌肌动蛋白染色阴性,确认为豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞。②逼尿肌细胞3d后贴壁,呈成纤维形生长,平滑肌肌动蛋白免疫细胞化学染色阳性,酪氨酸蛋白激酶受体染色阴性。结论:用酶消化法可获得成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞,并在体外条件下生长,可用于卡哈尔间质细胞样细胞的电生理特性观察。

衰老对大鼠阴茎组织中一氧化氮,cGMP,cAMP的影响及与勃起功能障碍的关系

目的:观察衰老对一氧化氮NO,cAMP,cGMP含量变化,探讨其与阴()茎勃起功能障碍的关系。方法:应用亚硝酸还原酶法及放免法对不同月龄,8,16,24个月)大(2鼠阴茎组织中NO及cGMP,cAMP含量分别进行检测。结果:随月龄增加,NO含量先增高,再降低,其中月龄最高,24月龄8最低,各月龄组间差异有非常显著性意义(P<0.001);cGMP,cAMP含量均随月龄增加而逐渐下降,各月龄组间差异也有非常显著性意义(P<0.001)。结论:衰老对NO及cGMP,cAMP有显著影响,提示临床应用增加NO,cGMP,cAMP的药物对勃起功能障碍的康复有重要价值。