环形精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽的核素标记及在健康动物体内的实验

目的:探讨99Tcm直接标记环形RGD-4CK九肽的可行性,观察99Tcm-RGD-4CK在健康动物体内的药代动力学、生物分布特点及显像表现。方法:实验于2004-10/2005-11在解放军第三军医大学西南医院核医学中心完成。①采用预锡化法99Tcm直接标记RGD-4CK,3MM色谱纸层析测定标记率,通过HPLC分析、SepPakC18柱层析、体外稳定性实验、半胱氨酸置换实验及血清蛋白结合实验,评价99Tcm-RGD-4CK的放射化学性质。②选取雄性日本大耳兔9只,每只静脉注射37MBq99Tcm-RGD-4CK,分别于1.5,3.0,5.0,10,30,60,90,120,180,240min采血、称重并测定血样品放射性计数,结果经参考源校正后以MBq/L表示,所得数据应用DAS软件处理,结合αvβ3受体在正常体内实际表达情况判断室模型。③选取小鼠40只,随机分为8组(n=5),每只静脉注射0.74MBq99Tcm-RGD-4CK,分别于1,5,20,60,90,120,180,240min处死小鼠,采集血液、心、肺、肝、肾、肠、肌肉、骨、脑,称重并测定放射性计数,结果经参考源校正后以每克组织百分注入剂量(%ID/g)表示。④选取雄性日本大耳兔3只,每只静脉注射37MBq99Tcm-RGD-4CK,应用SPECT进行显像,结合感兴趣时间-放射性曲线分析,观察家兔体内放射性的动态分布变化。结果:40只小鼠和12只兔全部进入结果分析。①99Tcm-RGD-4CK标记率为(97.8±0.4)%,比活度为(11.90±0.05)PBq/mol;HPLC保留时间与洗脱液放射峰值时间基本一致,室温放置6h的放射化学纯度仍>95%;SepPakC18柱层析游离99Tcm仅比纸层析高0.5%;与300mmol/L半胱氨酸37℃温育1h,游离99Tcm仅增加1.88%;99Tcm-RGD-4CK与血清蛋白无明显结合。②99Tcm-RGD-4CK在健康家兔体内的药代动力学符合权重数为1/C的二室模型,分布相半衰期为(4.18±2.17)min,消除相半衰期为(69.32±0.00)min。③小鼠血液放射性清除迅速,通过肾脏排泄且快,其余组织器官放射性均随时间逐渐降低,而脑始终呈最低放射水平。④家兔SPECT显像示:各组织器官T-A曲线均随时间逐渐下降,与肾、心、肝相比,肺、胃、肌肉曲线呈低水平;1min双肾即显影,5min心、肝影开始减弱,肺放射性分布均匀,强度低于肝脏,膀胱显影;5min后膀胱影持续增强,20min后软组织影逐渐减弱;胆囊未显影,腹部呈持续低放射分布,胃区始终呈放射性缺损,颈部未见明显核素浓聚。结论:99Tcm-RGD-4CK制备方法简便,标记率高(>95%),具有良好的放射化学性质,体内稳定性好,具有比较理想的体内动力学。

荷瘤裸鼠放射自显影受体辨别的实验研究(英文)

背景应用放射性核素标记小分子肽类配体进行肿瘤受体显像,针对肿瘤组织所表达的高密度αvβ3受体,发展放射性标记的含RGD序列的高选择性αvβ3受体拮抗剂,是目前肿瘤受体显像研究的热点。目的以实验动物为基础,探讨放射性核素标记小分子环形多肽RGD-4CY实现肿瘤αvβ3受体显像的可行性。设计完全随机的实验对照。地点和对象实验在解放军第三军医大学西南医院核医学中心完成研究对象为25只正常小鼠和15只荷人QBC939胆管癌裸鼠,由解放军第三军医大学实验动物中心提供,4～6周龄,体质量15～20g。干预采用Iodogen法标记、SEP-PAKC18柱分离纯化制备125I-RGD-4CY。取25只正常小鼠与15只荷人QBC939胆管癌裸鼠,经尾静脉注射125I-RGD-4CY0.1mL(370kBq),分别于注射后10,30,60,120和240min各取5只与3只处死,测定体内放射性的生物分布。取3只荷瘤裸鼠各注射0.1mL(3.7MBq)125I-RGD-4CY,1h后处死并行全身放射自显影。主要观察指标125I-RGD-4CY的放射化学纯度;125I-RGD-4CY的体内分布及动力学特点,肿瘤(T)与非肿瘤组织(NT)放射性比值;自显影图像中瘤体及正常组织的放射性分布。结果125I-RGD-4CY的放射化学纯度为99%。正常小鼠血液放射性清除和肝脏放射性下降迅速,肠道无明显增加,主要通过肾脏排泄。