膀胱逼尿肌细胞与Cajal间质细胞结构和功能联系的实验研究

背景:膀胱运动的效应细胞是逼尿肌细胞,而膀胱Cajal间质细胞如能在膀胱运动中作为起搏细胞而存在,必须能对逼尿肌细胞进行调控。因此,二者在结构和功能上的联系可以从一个方面证明Cajal间质细胞是否具有起搏细胞地位。目的:观察膀胱逼尿肌细胞与Cajal间质细胞结构和功能上的联系,分析膀胱Cajal细胞在逼尿肌细胞兴奋调控中的作用。设计、时间及地点:观察对比实验,于2007-04/10在解放军第三军医大学基础部中心实验室完成。材料:选用SD大鼠用于取膀胱逼尿肌新鲜组织块。方法:应用透射电镜观察Cajal间质细胞和逼尿肌细胞之间的超微结构联系;利用荧光漂白技术模拟信号从Cajal间质细胞传递到逼尿肌细胞的过程,观察Cajal间质细胞与逼尿肌细胞之间的信号交流情况。主要观察指标:Cajal间质细胞和逼尿肌细胞之间的超微结构联系及荧光强度变化。结果:①Cajal间质细胞和逼尿肌细胞之间有缝隙连接。②对单个Cajal间质细胞相邻的逼尿肌细胞进行荧光漂白后,发现逼尿肌细胞内的荧光强度明显恢复,同时Cajal间质细胞的荧光强度逐渐减弱。说明Cajal间质细胞与逼尿肌细胞之间有信号通讯通路。结论:逼尿肌细胞与Cajal间质细胞之间存在结构上的联系,Cajal间质细胞可以将兴奋信号传递给周围的逼尿肌细胞。

尿道狭窄的原因:损伤还是其他?(英文)

先天性尿道狭窄主要发生在青少年的前尿道。血尿是其最主要的症状。获得性尿道狭窄主要在以下几个方面:医源性:多发生于经尿道前列腺电切术、膀胱镜操作、长时间留置尿管、尿道下裂术后及前列腺切除术后等;感染性尿道狭窄包括医院手术后细菌尿引起的尿道狭窄和尖锐湿疣引起的病毒性尿道狭窄;炎症性尿道狭窄主要是硬化性结节病的慢性进展性炎症过程;前尿道的钝性损伤多是会阴部骑跨伤,后尿道损伤多伴有骨盆骨折,枪弹的穿透伤可全尿道损伤。儿童和女性的尿道损伤和狭窄罕见。文章主要对先天性和获得性尿道狭窄的原因进行探讨分析。

雄犬功能尿道重建预防前列腺癌根治术后尿失禁的研究

目的探索预防前列腺根治术后尿失禁的新方法及其尿动力学依据。方法20条雄犬随机分成两组,A组切除前列腺及远端2.0cm后尿道,B组切除前列腺及远端2 cm后尿道,用宽度为正常尿道周径,长度为1 cm膀胱前壁带蒂肌管代替功能尿道,术前及术后1月行尿动力学检查,并观察雄犬尿失禁情况。结果术后尿动力学指标及尿控率B组明显优于A组。结论膀胱前壁带蒂肌管功能尿道重建术是预防前列腺根治术后尿失禁可供选择的方法。

酶消化法获得成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞的体外原代培养及其特征鉴定

目的:建立成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞的原代培养方法,为进一步观察其电生理特性提供目标细胞。方法:实验于2005-04/08在第三军医大学第一附属医院中心实验室完成。①细胞提取:取1～2个月龄成年豚鼠2只,雌雄不限。麻醉状态下处死,下腹部10g/L碘伏消毒后,即刻由腹部正中切口、于膀胱颈处取出膀胱,于解剖显微镜下仔细剔除膀胱外膜,纵行剖开膀胱、去除膀胱黏膜,将膀胱肌层置入含双抗的磷酸盐缓冲溶液中浸泡10min。将上述处理的肌层组织剪成1mm小块,在含双抗的磷酸盐缓冲溶液中漂洗2次;换3入10g/L胶原酶P溶液,盖紧瓶盖,置入37℃培养箱中消化30min,完全消化溶解后,移入离心管中离心。②细胞培养:细胞沉淀中加入新鲜配制的达尔伯克()氏改良培养基溶液(含体积分数为0.1的胎牛血清),吹打后按每瓶(容积25mL)含(25～30)×10活细胞接种在培养瓶4内,37℃,积分数为0.05的CO2孵箱内静置培养;细胞接种第2天,可体见胞体为梭形并有两个细胞突起的细胞贴壁,平滑肌细胞尚未贴壁。将未贴壁的平滑肌细胞转移至另一培养瓶,孵箱内静置3d后,可见平滑肌细胞贴壁。③培养细胞的观察与鉴定:采用相差显微镜观察和免疫细胞化学方法鉴定。结果:①体外培养第2天可见胞体为梭形且胞体两极有两个细长突起的细胞贴壁,该类细胞酪氨酸蛋白激酶受体免疫细胞化学染色阳性,平滑肌肌动蛋白染色阴性,确认为豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞。②逼尿肌细胞3d后贴壁,呈成纤维形生长,平滑肌肌动蛋白免疫细胞化学染色阳性,酪氨酸蛋白激酶受体染色阴性。结论:用酶消化法可获得成年豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞样细胞,并在体外条件下生长,可用于卡哈尔间质细胞样细胞的电生理特性观察。

脊髓小胶质细胞活化状态与前列腺的炎性疼痛

目的:观察化学性刺激大鼠前列腺后相应脊髓节段小胶质细胞活化的状况。方法:实验于2004-05/2005-11在第三军医大学神经生物学教研室实验室完成。①分组:健康雄性SD大鼠24只,随机分为4组:对照组6只;完全弗氏佐剂刺激3d组6只;完全弗氏佐剂刺激10d组6只;完全弗氏佐剂刺激28d组6只。②模型制备:对照组:取下腹部正中直切口,于前列腺腹侧叶注入生理盐水0.1mL,可吸收线缝合伤口;完全弗氏佐剂刺激组:取下腹部正中直切口,于前列腺腹侧叶注入完全弗氏佐剂0.1mL,可吸收线缝合伤口。③用免疫组织化学技术对不同时间段大鼠相应脊髓节段(L6和S1)的小胶质细胞活化进行检测。结果:24只大鼠均进入结果分析。完全弗氏佐剂刺激大鼠前列腺后3,10,28d,L6～S1脊髓背角浅层和深层小胶质细胞的活化与对照组相比均显著增加,其中3d时已显著增强,10d时增强最显著,28d时较10d时活化有所减少,但仍显著高于对照组。结论:完全弗氏佐剂刺激大鼠前列腺引起前列腺炎性疼痛,导致了相应节段L6～S1脊髓背角小胶质细胞的激活,提示小胶质细胞活化在前列腺炎性疼痛的神经病理过程可能发挥了重要作用。

经皮肾镜取石术后留置肾造瘘管引流不畅原因分析及对策

随着微创手术在泌尿外科的广泛应用,微创经皮肾镜取石术（PCNL）逐渐成为结石的首选治疗方法。术后留置肾造瘘管成为了一种标准的手术步骤,肾造瘘管常规留置3d～5d[1]。PCNL术后留置肾造瘘管的主要目的为压迫皮质通道止血、充分引流肾脏、减少尿液外渗、预防或减少局部及全身感染的发生、为再次PCNL手术处理残留结石保留通道[2]。

衰老对大鼠阴茎组织中一氧化氮,cGMP,cAMP的影响及与勃起功能障碍的关系

目的:观察衰老对一氧化氮NO,cAMP,cGMP含量变化,探讨其与阴()茎勃起功能障碍的关系。方法:应用亚硝酸还原酶法及放免法对不同月龄,8,16,24个月)大(2鼠阴茎组织中NO及cGMP,cAMP含量分别进行检测。结果:随月龄增加,NO含量先增高,再降低,其中月龄最高,24月龄8最低,各月龄组间差异有非常显著性意义(P<0.001);cGMP,cAMP含量均随月龄增加而逐渐下降,各月龄组间差异也有非常显著性意义(P<0.001)。结论:衰老对NO及cGMP,cAMP有显著影响,提示临床应用增加NO,cGMP,cAMP的药物对勃起功能障碍的康复有重要价值。

PBOO对豚鼠膀胱卡哈尔间质细胞形态结构的影响

目的探讨豚鼠膀胱流出道梗阻(PBOO)对膀胱卡哈尔间质细胞(ICC)形态结构的影响。方法建立雌性豚鼠PBOO模型,并根据尿动力学检测结果将模型分为PBOO后逼尿肌不稳定(DO)组和PBOO后逼尿肌稳定(DS)组,以假手术组作为对照,饲养4周后取膀胱组织,制成全层组织铺片和冰冻组织切片,c-kit免疫荧光染色分别观察各组膀胱肌层和黏膜下ICC的形态和分布情况。结果PBOO4周后,DO组豚鼠膀胱出现排尿频率、排尿压力的增加(n=12,P<0.05),并且观察到明显的储尿期膀胱不稳定收缩。对照组、DS组和DO组豚鼠膀胱均观察到c-kit染色阳性且呈典型长梭形有突起的ICC,主要分布于平滑肌肌束间和黏膜下层;在DO组豚鼠的膀胱中c-kit染色阳性的ICC分支突起增加且互相连接呈网络状,而在对照组和DS组中ICC呈散在分布,细胞之间联系较松散。结论在PBOO所致DO豚鼠膀胱中ICC发生了形态和结构的变化,相互之间连接呈网络状,ICC的形态和结构的变化可能是逼尿肌不稳定的重要发病基础。

薄层CT增强扫描对膀胱癌术前分期的临床价值

目的通过对比膀胱癌薄层螺旋CT与病理诊断结果,评价薄层CT增强扫描对膀胱癌术前分期的临床价值。方法应用美国GE公司ProSpeedⅡ螺旋CT机,对58例膀胱癌患者进行盆腔平行扫瞄、动脉期静扫、静脉期增强薄层扫描。比较薄层螺旋CT分期与病理分期的准确度、敏感度和特异度。结果 58例患者螺旋临床CT分期:T1期9例,T2a期19例,T2b期14例,T3期8例,T4期8例,病理分期:pT1期12例,pT2a期17例,pTb期212例,T3期11例,pT4期6例。CT扫描准确度、敏感度及特异度均有明显优势。结论薄层CT增强扫描用于膀胱癌术前诊断分期,对临床制定治疗方案和预后评估有重要价值。