早期肠道营养减轻烧伤后肠黏膜损伤的机制研究

目的:探讨早期肠道营养在减轻烧伤后肠黏膜损伤中的作用机制.方法:通过建立大鼠肠淋巴瘘模型,随机将大鼠分为早期肠道营养组、烧伤对照组和单纯手术对照组,动态观察了烧伤前及伤后3,6,12,24 h大鼠肠淋巴液流量、肠淋巴液中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量、内毒素含量及肿瘤坏死因子(TNF)含量.结果:烧伤后肠淋巴液流量及SOD含量明显下降(P＜0.05),早期肠道营养组肠淋巴液流量及SOD含量显著高于烧伤对照组(P＜0.05);烧伤后肠淋巴液内毒素、MDA及TNF含量明显升高(P＜0.05),早期肠道营养组肠淋巴液内毒素、MDA及TNF含量显著低于烧伤对照组(P＜0.05);早期肠道营养组和烧伤对照组肠淋巴液MDA与内毒素含量呈显著正相关(rA组=0.95,rB组=0.93,P＜0.01);肠淋巴液内毒素与TNF含量也呈显著正相关(rA组=0.91,rB组=0.98,P＜0.01).结论:早期肠道营养可通过改善肠黏膜缺血缺氧,减轻氧自由基引起的肠黏膜损伤以及阻断内毒素-炎性递质-肠黏膜损伤这一恶性循环,从而保护了肠黏膜屏障,减少了肠源性感染的发生.

烧伤延迟复苏加重肠黏膜屏障功能损害的机制研究

目的:研究大鼠严重烧伤后延迟复苏对肠黏膜屏障功能的影响,探讨中性粒细胞浸润在肠黏膜屏障功能损害中的作用及可能机制. 方法:Wistar大鼠40%TBSAⅢ度烫伤,分立即复苏组和延迟复苏组,于伤后不同时相点检测血中D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)及肠黏膜组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;肠黏膜组织石蜡切片黏膜上皮细胞凋亡原位检测. 结果:延迟复苏组各时相点血中D-乳酸含量明显高于立即复苏组(P<0.05),肠黏膜组织局部MPO活性显著升高(与立即复苏组比较,P<0.01)伴SOD活性降低和MDA含量升高.两组血DAO含量以伤后6 h最高,延迟复苏组约为立即复苏组的两倍(1.40±0.20 vs 0.78±0.19,P<0.01),伤后24 h比较,二者仍具统计学差异.各时相点两组动物均能检测到TUNEL染色阳性肠黏膜上皮细胞,以伤后12 h 为凋亡高峰,延迟复苏组各时相点凋亡率均显著高于立即复苏组. 结论:烧伤延迟复苏加重肠黏膜屏障功能损害,黏膜上皮细胞坏死和凋亡共同构成早期屏障功能损害加重的病理学基础,而组织局部中性粒细胞浸润增强可能在其中起重要作用.

延迟快速复苏烧伤犬血浆二胺氧化酶的变化

目的 探讨烧伤后延迟复苏情况下,快速补液对伤后早期肠粘膜损伤的影响。 方法 利用犬40％ TBSA Ⅲ度烫伤模型,32只犬被随机分为烧伤对照组、血定安延迟均匀补液组、血定安延迟快速补液组和血浆延迟快速补液组进行补液,观察伤前、伤后2,6,8,12,24,36和48h血浆二胺氧化酶、乳酸的变化及小肠病理检查。 结果 烧伤后各组血浆二胺氧化酶、乳酸逐渐升高,至伤后2h～6hBp显著高于伤前并继续升高,但补液三组上升幅度明显低于烧伤对照组,其中快速补液组烧伤8h后(快速补液后)均显著低于均匀补液组。血浆快速组与血定安快速组相比二胺氧化酶、乳酸几乎无明显差别。 结论 在烧伤后延迟复苏情况下,快速补液可以减轻肠粘膜的损伤。

胰高血糖素样肽-2对严重烧伤大鼠肠黏膜屏障功能的影响

目的:研究外源性GLP-2对严重烧伤大鼠肠黏膜屏障功能的影响,探索保护烧伤后肠黏膜屏障功能的新措施。方法:以30％体表面积Ⅲ度烧伤大鼠为模型,随机分为GLP-2治疗组和单纯烧伤组,分别经腹腔注射GLP-2(每日200μg/kg)和PBS,于烧伤后0、1、3、5、7d进行肝、脾及门静脉血细菌培养,分别观察门静脉血浆内毒素含量、血清DAO活性及D-乳酸含量的变化。结果:GLP-2治疗组烧伤后3d时脏器细菌总检出率为0,明显低于单纯烧伤组的46.7％(P<0.05);5d时肝、脾和脏器细菌总检出率均为0,明显低于单纯烧伤组(分别为80％,100％和66.7％)。在烧伤后5d时,GLP-2治疗组门静脉血浆内毒素含量,血清DAO活性及D-乳酸含量分别为130.8±33.7EU/L,1779.3±824.2U/L,10.302±1.199μg/mL,均明显低于单纯烧伤组(分别为205.2±57.4EU /L,3336.7±1325.1U/L,13.369±2.199μg/mL)。在烧伤后7d时,GLP-2治疗组门静脉血浆内毒素含量,血清DAO活性及D-乳酸含量分别为127.5±39.0EU/L,1448.6±306.4U/L,9.624±0.799μg/mL,均明显低于单纯烧伤组(分别为157.1±43.2EU/L,2727.3±1002.6U/L,12.651±2.206μg/mL)。结论:应用外源性GLP-2能减轻严重烧伤后肠黏膜损伤,保护肠黏膜屏障功能,对严重烧伤后肠道细菌/内毒素移位有一定的防治作用。

手部烧伤的早期康复训练对患者功能恢复的影响

0 引言 手部烧伤后常因瘢痕挛缩,肌腱粘连,关节粘连,肌肉萎缩等原因影响关节活动,导致功能障碍,手烧伤治疗不应该以治愈创面为总体目标,而应把后续治疗延续下去,尽一切可能减轻或消除手烧伤后遗症,应用早期康复训练治疗手部烧伤即可达到恢复手功能的较好效果.

急性脑缺血应激性脑-心综合征临床研究

目的 :观察急性脑梗塞患者心电图 (ECG)、心脏自主神经活性变化 ,探讨脑 心综合征发生的中枢机制。方法 :利用标准 12导联动态心电图技术记录 86例急性脑梗塞患者和 4 3例正常对照的心电信号 ,分析比较不同部位半球梗塞患者心率变异性变化。结果 :1 急性脑梗塞患者出现快速心率失常、QT间期延长和S T段下移 ;2 脑梗塞组的相邻心搏间期差大于 10ms的间期数占RR间期总数的百分比、均方根值 (squarerootofthemeansquareddifferencesofsuccessiveNNintervals ,RMSSD)、总频、高频、混沌参数是降低的 ,而低频 /高频相对增高 ,与正常对照组比较差异有显著性 (P <0 0 1) ,以右侧岛叶较其他部位梗塞变化明显 (P <0 0 5 )。结论 :急性脑梗塞出现心电图异常、自主神经活性变化等脑 心综合征表现 ,故对脑梗塞患者必须加强ECG及心脏自主神经活性的监测 ,以防脑源性不良反应发生。

营养支持途径对严重烧伤早期肠黏膜修复的影响

目的:探讨营养支持途径对严重烧伤早期肠黏膜修复的影响.方法:将30%TBSAⅢ度烧伤大鼠行颈外静脉插管后,随机分为肠道喂养(EF)组及静脉营养(PN)组,分别采用灌喂和颈外静脉输入方法给予等氮、等热卡的营养液.动态观察空肠与回肠黏膜组织形态学的变化,用图像分析仪测量肠黏膜厚度、绒毛高度,并计算绒毛表面积.结果:烧伤后早期PN组与EF组的空肠与回肠黏膜组织结构均受到明显损害.EF组伤后6,12,24,48h空肠和回肠黏膜厚度分别为341±33μm、404±30μm、418±42μm、418±57μm及313±34μm、306±81μm、302±55μm、268±21μm,绒毛高度分别为253±33μm、287±23μm、285±42μm、260±40μm及175±30μm、210±57μm、190±31μm、163±17μm,绒毛表面积分别为0.045±0.011mm2、0.056±0.011mm2、0.071±0.007mm2、0.054±0.006mm2及0.030±0.006mm2、0.045±0.019mm2、0.036±0.011mm2、0.028±0.004mm2,均与PN组无明显差别(P>0.05).但至伤后72h,EF组空肠和回肠黏膜厚度、绒毛高度及绒毛表面积分别为397±34μm、253±41μm、0.051±0.009mm2及275±38μm、180±31μm、0.030±0.006mm2,而PN组空肠和回肠黏膜厚度、绒毛高度及绒毛表面积分别为227±25μm、146±14μm、0.024±0.0062mm2及206±15μm、125±16μm、0.017±0.0042mm2,EF组非常明显地高于PN组(P<0.01).结论:肠道喂养较静脉营养能更好地维护严重烧伤后早期肠黏膜组织结构,促进受损肠黏膜的修复.

天狼猩红偏振光法在病理性瘢痕纤维化研究中的应用

目的:探讨检测增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中胶原的方法。方法:应用天狼猩红偏振光法和图像分析技术对正常皮肤、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中胶原的类型、含量及分布特点进行研究。结果:正常皮肤组织中以Ⅲ型胶原为主;增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织中均以Ⅰ型胶原纤维为主,其含量随病程发展而增加。结论:天狼猩红偏振光法是检测增生性瘢痕和瘢痕疙瘩组织纤维化程度的理想方法,可以明确纤维化过程中Ⅰ、Ⅲ型胶原的变化规律。

基因治疗人类多发性硬化症的可能性研究:腺病毒转染CTLA-4Ig对动物实验性自身免疫性脑脊髓炎病理过程的抑制或阻断作用(英文)

背景:实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimentalautoimmuneen-cephalomyelitis,EAE)同人类的多发性硬化症(multiplesclerosis,MS)的病理机制相类似,因此认识和阻断EAE的病理过程是攻克MS的关键。目的:寻求一种可能抑制或阻断EAE病理过程,加速神经功能恢复进程的方法。设计:随机对照的实验研究。单位:解放军第三军医大学附属西南医院神经内科和烧伤研究所。材料:实验在解放军第三军医大学动物实验室完成。实验材料:豚鼠4只(雌雄不限,体质量300～400g),Wistar大鼠40只(雌雄不限,体质量180～200g)。方法:用所构建的CTLA-4Ig腺病毒通过侧脑室注射到Wistar大鼠EAE模型体内观察其疗效,用冷冻切片观察CTLA-4Ig在脑组织中的表达,观察发病情况、病理改变。主要观察指标:①两组大鼠致敏后的发病天数、发病只数及潜伏期及神经功能评分情况。②光镜下观察两组大鼠病理学改变情况。结果:发病情况:生理盐水对照组大鼠于致敏后第10天开始发病。于第16天全部发病,平均发病天数为12.2d,临床评分平均为3.1;腺病毒介导的CTLA-4Ig组于致敏后第14天开始发病,第18天共发病6只,平均发病天数为14.1d,临床评分平均为2.4。病理结果:侧脑室注射AdCTLA-4Ig后24,48,72h取脑组织做冷冻切片在荧光显微镜下观察侧脑室周围和脊髓有荧光。在?

皮肤组织工程中人表皮干细胞的体外培养及分化特性研究

目的:探索人表皮干细胞(keratinocytestemcell,KSC)的筛选方法、体外培养条件及生长分化特性。方法:由包皮消化获得表皮细胞,以低密度单克隆筛选法挑取KSC克隆,并以挑取克隆传代及子代细胞混合传代两种不同的方法持续传代培养,采用3种不同的滋养细胞。计算每代KSC子代细胞的克隆形成率(colonyformingefficiency,CFE)以及整合素β1及外皮蛋白的表达情况。结果:将KSC克隆的子代细胞混合消化传代培养,CFE会逐渐下降,从最初的95%以上降至第6代时的25%左右。每代均可见3种处于不同分化状态的克隆混合生长,即干细胞克隆(绝大部分细胞未分化,整合素β1阳性、外皮蛋白阴性)、短暂增殖克隆(部分细胞进入终末分化)、终末分化克隆(所有细胞均发生终末分化,外皮蛋白阳性、整合素β1阴性)。以挑取克隆传代法传代培养,其CFE仍能保持在95%以上并能持续传代。结论:以低密度单克隆筛选法可成功地筛选出KSC克隆并能持续传代培养,多种成纤维细胞可作为培养KSC的滋养细胞。KSC在体外会分裂增殖并逐渐分化,但干细胞的数量比例可以保持在较高水平。

严重烧伤后小鼠腹腔巨噬细胞肿瘤坏死因子的变化及免疫功能机制(英文)

背景:严重烫伤导致机体免疫系统各方面的功能紊乱,活化的巨噬细胞可分泌许多生物活性递质。烧伤后巨噬细胞功能紊乱与信号转导的关系目前尚不清楚。目的:观察严重烫伤后不同时相点及运用特异性NF-κB抑制剂吡咯啉烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidinedithiocarbamate,PDTC)后小鼠腹腔巨噬细胞内NF-κB活性、IκB-α的表达及肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化,从信号转导的角度探讨巨噬细胞功能紊乱的机制。设计:随机对照的实验研究。单位:创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室。材料:实验于1999-01/06在第三军医大学烧伤研究所实验室(国家级)完成。实验动物为健康清洁级近交系昆明小白鼠30只。干预:以小鼠常规烫伤模型造成体表面积15%Ⅲ度烫伤。实验按烫伤前及伤后不同时相随机分为6组,即0(正常对照组),2,6,12,24,48h组。收集腹腔巨噬细胞。采用放射免疫法检测TNF-α的含量,电泳迁移率改变分析法测NF-κB的活性,免疫印迹法测IκB-α的表达,反转录-PCR测TNF-αmRNA的表达。主要观察指标:①检测TNF-α的含量。②测定NF-κB的活性。③检测IκB-α的表达。④测TNF-αmRNA的表达。结果:烫伤后巨噬细胞分泌TNF-α亢进,于伤后12h达到高峰,为(1085.65±122.99)ng/L,较正常对照组明显增高(t=14.92,P<0.01)。NF-κB活性于伤后明?

严重烧伤早期切痂对可溶性脂多糖受体CD14表达和肝损害的影响

目的 研究休克期切痂对严重烧伤后可溶性脂多糖受体CD14 (sCD14 )和肝损害的影响 ,并探索其可能的内在机制。方法 收集休克期切痂组和非休克期切痂组的大面积烧伤病人血标本 ,检测内毒素 (LPS)、sCD14和肿瘤坏死因子 (TNF-α)含量 ,同时测定血清谷丙转氨酶 (ALT)和谷草转氨酶 (AST)的水平。结果 休克期切痂组的上述指标均明显低于非休克期切痂组 (P <0 .0 5 ) ,sCD14和各项指标呈正相关。结论 严重烧伤后LPS、sCD14和TNF -α途径是并发肝功能损害的一条重要途径 ,休克期切痂可能通过该途径在一定程度上控制早期主要炎症介质的释放 ,降低烧伤后肝损害的程度。

传代培养骺板软骨细胞作为组织工程种子细胞的生物学研究

目的:定量观测体外培养骺板软骨细胞合成蛋白多糖聚集体的变化,评价其不同代次生物学功能活性。方法:酶消化分离原代骺板软骨细胞,传代培养至第6代。改进的二甲基亚甲蓝(DMB)比色法测定各代细胞胞外基质的硫酸糖胺多糖(Glycosaminoglycans,GAG)含量,细胞-玻片甲苯胺蓝染色光镜观察。结果:原代软骨细胞具有最高的硫酸GAG分泌活性,(70±8)μg/cm2,至第3代则出现了非常明显的下降,(53±10)μg/cm2,第4代以后很低下;甲苯胺蓝染色显示原代细胞对甲苯胺蓝呈明显的红色异染反应,第3代异染反应明显减弱,第4代以后异染反应微弱,其结果与硫酸GAG含量变化相一致。结论:骺板软骨细胞在体外培养过程中,随传代次数的增加而功能活性逐渐降低,第3代以后的细胞不适于作为骺板组织工程种子细胞和用于细胞生物学等方面研究。

手部深度烧伤的加压疗法探讨

对手部深度烧伤患者全程重视加压疗法,加强功能锻炼,保持功能体位,使深度烧伤手的致畸致残率大大降低,提高了患者愈后的生活质量。

人骨保护素重组腺病毒抑制去势骨质疏松大鼠骨吸收作用的研究

目的:观察携带人骨保护素基因的重组腺病毒(recombinantadenovirusvectorcarryinghumanosteoprotegeringene,Ad-hOPG)在大鼠体内表达及对去势骨质疏松大鼠的治疗作用。方法:首先将不同滴度的Ad-hOPG(1×1011～1×1013pfu/L)注入SD大鼠体内,观察其表达特点。然后选用10月龄雌性SD大鼠15只,随机分为假手术对照组、卵巢切除+生理盐水注射组、卵巢切除+Ad-hOPG治疗组,每组5只,分别在去势8周后开始给药,给药后在不同时像点测定人骨保护素(humanosteoprotegerin,hOPG)血清浓度;在给药后第48d时用双能X射线骨密度仪(dualenergyXrayabsorptiometry,DEXA)测定各组大鼠骨密度值,并取大鼠胫骨干骺端做组织切片。结果:1×107～1×109pfu的Ad-hOPG表达时限较短,1×1010pfu则表达了长达46d,选择1×1010pfu做进一步实验;假手术对照组、卵巢切除+生理盐水注射组没能检测到hOPG的血清浓度,而卵巢切除+Ad-hOPG治疗组hOPG的血清浓度第2天就达到25mg/L,6d达到高峰,46d时仍有0.0042mg/L;卵巢切除+Ad-hOPG治疗组的骨密度值明显高于卵巢切除+生理盐水注射组(P<0.01),甚至比假手术对照组还高;卵巢切除+Ad-hOPG治疗组大鼠骨形态学也较假手术对照组明显改善。结论:Ad-hOPG在大鼠体内成功的较长时间表达。

营养支持途径对严重烧伤后肠黏膜上皮细胞增生的影响

目的:探讨肠道喂养及静脉营养对严重烧伤早期肠黏膜上皮细胞增生功能的影响.方法:将30%TBSAⅢ度烧伤大鼠行颈外静脉插管后,随机分为肠道喂养组(EF组)及静脉营养组(PN组),伤后2h分别采用灌喂和颈外静脉输入方法给予等氮、等热卡的营养液.分别于伤前、伤后6,12,24,48和72h处死动物,检测肠黏膜蛋白质含量、胸腺嘧啶核苷激酶活性、增生指数及PCNA表达.结果:烧伤后两组大鼠肠黏膜蛋白质含量均降低,EF组在伤后24,48和72h分别为262±24mg/m,283±29mg/m,282±18mg/m,明显高于PN组的195±45mg/m,194±41mg/m,143±19mg/m.烧伤后肠黏膜胸腺嘧啶核苷激酶活性多较伤前降低,EF组在伤后72h明显高于PN组(分别为88±19nmol/m,35±7nmol/m).PN组肠黏膜细胞增生指数在伤后6,12h分别为78.4±3.4%,89.9±1.3%,明显高于EF组的60.4±10.1%,75.7±6.9%;而在伤后48,72h分别为25.9±12.7%,12.5±8.6%,显著低于EF组的78.9±1.6%,56.9±5.6%.EF组肠黏膜PCNA表达明显多于PN组.结论:早期肠道喂养较静脉营养更能促进严重烧伤后肠黏膜上皮细胞增生,利于受损肠黏膜的修复.

一种草药氯仿萃取水相提取物止血作用的实验研究

目的:观察一种促凝血草药氯仿萃取水相提取物HB的止血作用。方法:实验于2003-12/2004-12在解放军第三军医大学西南医院全军烧伤研究所国家重点实验室完成。健康家兔18只,体质量2.5～3.0kg;健康雄性Wistar大鼠70只,体质量(250±10)g;雄性昆明种小鼠78只,体质量(25±5)g。制备HB氯仿萃取-水相提取物后给动物腹腔注射。①将70只大鼠随机分为空白对照组(n=10,30mg/kg腹腔注射生理盐水)、阳性对照组(n=10,云南白药按2mg/(kg·d)灌胃)、HB高剂量给药组(n=30,分别选取10只动物按5,10,20mg/kg剂量腹腔注射)、HB低剂量给药组(n=20,分别选取10只动物按0.5,1mg/kg剂量腹腔注射)。观察给药10d后实验动物的血生化指标(凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、纤维蛋白原含量、凝血酶时间)及血小板计数;②将39只小鼠随机分为空白对照组、云南白药对照组(云南白药0.5mg/(kg·d)灌胃)和用药组(HB0.5mg/kg),每组13只。观察给药10d后小鼠的出血时间、同样的分组和干预方法观察小鼠的凝血时间。③将待试药设氯仿萃取水相提取物用药组、云南白药阳性对照组、生理盐水阴性对照组。18只家兔各取6只分别用于观察体表、肝脏及股动脉创面的止血实验,观察局部创面(皮肤、肝脏、股动脉)止血时间。结果:纳入健康家兔18只、健康雄性Wistar大鼠70只、雄性昆明种小鼠78只,均进入结果分析。①氯仿萃取水相提取物对大鼠血凝四项及血小板计数的影响:与空白对照组相比,HB氯仿萃取水相提取物腹腔注射可显著提高大鼠的血小板计数;HB高剂量给药组大鼠的凝血酶原时间明显缩短。②对小鼠出血时间及凝血时间的影响:与云南白药对照组及空白对照组相比,HB氯仿萃取水相提取物可显著缩短小鼠的出血时间[(250.2±53.3),(234.5±61.3),(100.2±27.9)s,P<0.01]及凝血时间[(202.5±50.2),(255.5±27.8),(141.8±37.6)s,P<0.01]。③对家兔局部创面的止血作用:家兔创面止血时间显著短于生理盐水阴性对照组及云南白药阳性对照组[皮肤:(41.20±6.21),(84.10±5.32),(74.80±4.73)s;肝脏:(50.20±3.39),(87.60±6.24),(74.50±5.19)s;股动脉:(62.60±4.50),(103.60±4.35),(98.20±6.07)s;P<0.01)。结论:HB氯仿萃取水相提取物具有良好的体内、外促凝血及创面止血作用。

纤维蛋白黏合剂的止血作用对烧伤修复植皮的影响

目的:观察纤维蛋白胶应用于烧伤深二度植皮手术中的削痂创面和供皮区创面渗血的止血效果。方法:随机选择2003-01/05第三军医大学西南医院烧伤研究所烧伤后需行植皮手术患者24例,术中选取相邻部位或对称部位的供皮区及削痂创面,进行自身同体对照,实验组创面使用纤维蛋白胶;对照组使用生理盐水,观察并记录创面出血量及止血时间。结果:实验组24例平均出血量为1.04g,出血时间为5.71s,对照组24例平均出血量3.46g,出血时间为86.58s。试验组的止血效果显著优于对照组(P<0.01)。结论:纤维蛋白胶运用于烧伤植皮手术削痂创面及供皮区时,有确切的止血效果。