烧伤延迟复苏加重肠黏膜屏障功能损害的机制研究

目的:研究大鼠严重烧伤后延迟复苏对肠黏膜屏障功能的影响,探讨中性粒细胞浸润在肠黏膜屏障功能损害中的作用及可能机制. 方法:Wistar大鼠40%TBSAⅢ度烫伤,分立即复苏组和延迟复苏组,于伤后不同时相点检测血中D-乳酸、二胺氧化酶(DAO)及肠黏膜组织髓过氧化物酶(MPO)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量;肠黏膜组织石蜡切片黏膜上皮细胞凋亡原位检测. 结果:延迟复苏组各时相点血中D-乳酸含量明显高于立即复苏组(P<0.05),肠黏膜组织局部MPO活性显著升高(与立即复苏组比较,P<0.01)伴SOD活性降低和MDA含量升高.两组血DAO含量以伤后6 h最高,延迟复苏组约为立即复苏组的两倍(1.40±0.20 vs 0.78±0.19,P<0.01),伤后24 h比较,二者仍具统计学差异.各时相点两组动物均能检测到TUNEL染色阳性肠黏膜上皮细胞,以伤后12 h 为凋亡高峰,延迟复苏组各时相点凋亡率均显著高于立即复苏组. 结论:烧伤延迟复苏加重肠黏膜屏障功能损害,黏膜上皮细胞坏死和凋亡共同构成早期屏障功能损害加重的病理学基础,而组织局部中性粒细胞浸润增强可能在其中起重要作用.

烧创伤后应激障碍的诊断与评估方式分析

创伤后应激障碍是指对亲身经历的或目击的导致或可能导致自己或他人死亡或严重躯体伤害的意外事件或严重创伤的强烈反应。创伤后应激反应会激发下丘脑-垂体-肾上腺轴功能紊乱;通过不同的途径激活中枢神经系统的交感神经系统、下丘脑-腺垂体系统和脑内的肾素-血管紧张素系统;引起5-羟色胺、儿茶酚胺类等神经递质与相关受体功能改变;海马等脑组织结构的改变以及造成免疫功能的紊乱等一系列神经生物学改变。创伤后应激障碍的诊断工具和诊断标准经过多次修订,现已逐步完善和确立。经历各类创伤事件后国内研究发生创伤后应激障碍的比率约为17%～86%,国外报道为15%～70%。烧伤是一种在平战时均较常见的创伤之一。不仅是生理的创伤,同时也是心理的创伤。烧伤患者创伤后应激障碍的发生率为23%～88%。创伤后应激障碍的主要影响因素包括生活背景、生理、心理等个人因素和环境因素。目前针对创伤后应激障碍的治疗主要使用抗抑郁等药以减轻症状,以及采用心理治疗的方法,其中心理治疗的方法是治疗创伤后应激障碍主要的方法。

心肌细胞牵张模型建立的实验研究

目的:机械信号的转导与感受成为生命科学研究的理论前沿,如何对细胞施加机械刺激是进行此领域研究的前提。建立体外培养的心肌细胞牵张模型是研究的目的。方法:实验于2003-11/2004-01在解放军第三军医大学创伤烧伤复合伤国家重点实验完成。采用胰酶消化法分离培养乳鼠心肌细胞,纯化后接种于硅酮膜上,依照10%的牵张强度对心肌细胞施加机械刺激,观察心肌细胞形态、培养液中乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)含量及碘化丙啶染色阳性细胞比例的变化。结果:10%牵张过程中,细胞沿受力方向排列。10%牵张后心肌细胞进一步铺展,伪足数目明显增加。牵张前后培养液中LDH含量犤培养12h(710.6±69.5)IU/L,牵张12h(769.8±66.7)IU/L犦及碘化丙啶染色阳性细胞比(牵张前0.53%,牵张12h后0.54%)无明显变化。结论:建立了较好模拟体内刺激强度的模型,并证实10%牵张对心肌细胞不是一种损伤因素,在某些方向还可能上调细胞功能。

真核表达载体p4CCL20-ZsGreen1-DR的构建与鉴定(英文)

背景:抗炎药物高通量筛选体系的建立,可为相关药物的研究提供一个理想的技术平台。目的:构建以核因子κB顺式作用元件4×CCL20基序为增强子,以SV40为启动子,以ZsGreen1-DR为报告基因的真核表达载体p4CCL20-ZsGreen1-DR。方法:以PGL2-control质粒为模板,PCR扩增目的片段SV40,两侧引入KpnⅠ/BamHⅠ酶切位点,克隆至pZsGreen1-DR质粒的Kpn Ⅰ/BamH Ⅰ酶切位点中,构建成pSV40-ZsGreen1-DR载体。将4×CCL20基序双链DNA克隆到pSV40-ZsGreen1-DR载体的BglⅡ和EcoRⅠ酶切位点之间,构建p4CCL20-ZsGreen1-DR重组质粒。结果与结论:经过DNA测序分析证实p4CCL20-ZsGreen1-DR重组质粒构建成功。该重组质粒可作为抗炎药物高通量筛选体系的基础。