良性胆管狭窄568例的分类和外科治疗

良性胆管狭窄(benign biliary strictures,BBS)是胆道外科处理中的难点之一,也是影响胆道外科手术疗效的主要因素之一。BBS包括先天性、创伤性、放射性。

离体猪肝胆管腔内射频消融后的胆管和肝脏病理学改变

目的观察胆管腔内射频消融后胆管和肝脏病理学变化并探讨不同消融参数(裸露电极针长度、输出功率和消融时间)与凝固区大小的关系。方法按照不同消融参数将20个离体猪肝的48个肝叶胆管靶点平均分为4组。将裸露电极针置入胆管腔内进行射频消融。检测凝固区剖面大小并光镜下病理学观察。结果剖面观均为以胆管为长轴、胆管壁和肝组织为短轴的苍白色半椭圆形凝固区。光镜下凝固区内胆管黏膜和黏膜下层坏死,肝组织变性。在不同消融参数时,各组凝固区长轴直径和短轴半径不同。结论肝叶胆管腔内射频消融可形成凝固区。凝固区长轴直径与裸露电极针长度有关,凝固区短轴半径与输出功率和消融时间有关。

模拟失重大鼠肝组织中NF-κB的表达及意义

目的:研究模拟失重环境下大鼠肝脏组织中NF-κB的表达及意义.方法:成年♂Wistar大鼠84只,随机分为模拟失重组和对照组,每组又分别设1、2、3、4、5、6和7d共7个时相点,每时相点模拟失重和同步对照各6只大鼠.采用尾悬吊法建立模拟失重动物模型.各组大鼠肝组织中NF-κB表达分别应用Western blot和免疫组化PV-6001法进行检测.结果:在尾悬吊1-2d期间,大鼠焦躁不安,饮食量减少,精神较差,活动减弱,2-3d后有所适应,逐渐恢复稳定状态.模拟失重环境下大鼠肝脏NF-κB表达水平明显升高,1、2d悬尾组大鼠肝组织中NF-κB表达率明显高于对照组(F=271.36,P<0.01),其后,NF-κB表达水平呈明显下降趋势(F=60.68,P<0.05),5-7d悬尾组NF-κB表达水平接近对照组,差异无统计学意义.NF-κB阳性产物主要见于实验大鼠肝细胞内,亦见于炎细胞及Kupffer细胞内,可分为胞质型、核型、核浆型等三个类型,单独或混合存在.结论:模模拟失重使大鼠肝脏组织中NF-κB表达发生明显变化,提示在失重环境中肝脏NF-κB的早期高表达和逐渐恢复过程与失重应激反应及失重耐受有密切关系.

肝硬变大鼠肝部分切除术后残肝TGF-α、HGF、PCNA和IGFBP-1s mRNA的变化

目的:探讨肝硬变状态下肝部分切除术后肝细胞和KCTGF-α、HGF、PCNA和IGFBP-1s的mRNA表达,进一步阐明KC在肝细胞再生中的作用。方法:复制我们建立的大鼠肝硬变肝切除模型,分离肝细胞和KC,提取RNA,采用Northern杂交。结果:KC其HGF mRNA表达较肝细胞为早,在术后6h点达到高峰,但肝细胞TGF-α mRNA表达含量明显高于KC的表达。肝细胞IGFBP-1s mRNA的表达含量低,术后6h点相对较高,KC IGFBP-1s mRNA未见表达。肝细胞PCNA mRNA的表达在术后6h其含量达到最低点,明显受抑制。结论:HGF和TGF-α mRNA表达与肝硬变大鼠的肝细胞再生密切相关,而TGF-α是肝细胞再生中最重要的物质。IGFBP-1s mRNA表达降低反应了肝硬变大鼠术后肝细胞代谢明显受损,而PCNA mRNA表达可提示肝细胞增生能力。

大鼠肝部分切除术后肝窦内皮细胞对肝细胞增生的影响

目的:探讨大鼠肝部分切除术后肝窦血管内皮细胞(LSEC) 对再生肝细胞增生的影响. 方法:建立Wistar大鼠70%的肝切除模型和肝窦血管内皮细胞、肝细胞分离与培养方法,在术后不同的时相点分离残肝的肝细胞和肝窦血管内皮细胞,进行培养.实验分组: 肝部分切除组(PO)和假手术组(SO);肝细胞培养分两组:A组(肝细胞)、B组(肝细胞+LSEC上清液),利用放射免疫法测定肝细胞DNA合成率、免疫组化方法测定肝细胞PCNA表达指数的变化. 结果:在术后的6、24 h,B组的肝细胞的PCNA表达指数较A组显著升高(5.9±0.1 vs 8.9±0.1 P<0.05;38.6±2.6 vs 58.0±3.9 P<0.01).而且B组肝细胞的DNA合成量较A组显著升高(226±18 vs 8.9±0.1 P<0.05;38.6±2.6 vs 58.0±3.9 P<0.011. 结论:体外实验证实肝部分切除术后肝窦内皮细胞上清可以促进肝细胞的增生,促进肝细胞的DNA合成,增强再生肝细胞增生活性.

转化糖注射液对住院患者血糖水平影响的双盲平行对照实验

目的:比较转化糖与葡萄糖静脉输注后对血糖水平的影响,评价其用于临床能量补充的有效性与安全性。方法:①选择2002-10/2002-12收治于解放军第三军医大学西南医院肝胆外科和呼吸科病房需静脉能量补充的住院患者44例。年龄18～65岁,且均已签署知情同意书。随机将患者分为2组:实验组(n=21)与对照组(n=23)。实验组:给予50g/L转化糖注射液静脉输注,500mL/次,1次/d,疗程为3d。对照组:给予50g/L葡萄糖注射液用法及疗程同转化糖。②于给药前、给药结束时、给药后2h测定血糖浓度,并同时于实验前和实验结束后检测肝、肾功能,观察用药不良事件。③计量和计数资料差异性比较分别采用t检验和χ2检验。结果:患者44例均进入结果分析。①给药前、给药后即刻、给药后2h两组血糖水平差异不明显(P>0.05)。两组治疗第1～3天给药后即刻均出现血糖明显一过性升高,高于给药前(t=5.74～7.84,P<0.01)。给药后2h实验组血糖水平均恢复到给药前水平,而对照组治疗第2天给药后2h明显高于给药前(t=2.62,P<0.05),表明对照组血糖水平恢复到给药前水平速度较实验组稍慢。②实验过程中两组患者均无不良反应发生,50g/L转化糖注射液对肝、肾功能、血尿酸等指标无影响。结论:输注50g/L转化糖注射液后血糖水平波动小于50g/L葡萄糖注射液,50g/L转化糖注射液用于临床患者机体能量补充安全有效。

缩胆囊素对胆管癌细胞凋亡的影响

缩胆囊素(Cholecystokinin,CCK)是具有代表性的消化道激素之一.现有的资料证实其具有生长因子特性,对某些消化道肿瘤细胞的生长有明显的刺激作用,进而参与消化道肿瘤的发生、发展.CCK 与胰腺癌的关系研究较多,它对致癌剂诱发胰腺癌有确切的促进作用,对多数培养的胰癌细胞系及其移植瘤的生长有促进作用.Okada et al

mtTFA、NRF-1对冷保存-再灌注肝移植大鼠线粒体DNA ATPase6基因表达的调节

目的:研究线粒体DNA上游调节基因mtTFA和NRF-1对冷保存肝移植大鼠肝细胞线粒体DNA ATPase6基因表达的影响,探讨mtTFA和NRF-1对冷保存肝移植大鼠肝细胞线粒体DNA调节作用及其机制.方法:Wistar大鼠186只,采用改良"二袖套法"制作大鼠肝移植模型,动物随机分为A组:冷保存30min;B组:冷保存6h;C组:冷保存12h;和D组(假手术对照组),分别于制模后于12h、24h、3d、5d、7d采集标本,保证每时相点存活大鼠6只.观察各组大鼠肝脏ATP含量.采用RT-PCR方法检测mtDNA ATPase6 mRNA、mtTFA和NRF-1 mRNA的表达变化.结果:冷保存再灌注后早期(12h),A、B、C三组mtTFA mRNA表达降低,与A、B组相比,C组最为显著(0.57±0.05vs0.87±0.11,0.69±0.10,P<0.05),NRF-1 mRNA表达变化与mtTFA mRNA相一致.24h后各组mtTFA及NRF-1 mRNA表达开始升高,ATPase6表达和肝组织ATP含量也升高,并且升高趋势与mtTFA及NRF-1 mRNA表达增高基本一致.结论:mtTFA和NRF-1可能通过基因转录调节ATPase6基因表达,改变线粒体呼吸链转运电子、合成ATP的能力.

胆道疾病对左旋氧氟沙星的胆药浓度的影响

目的:观察左旋氧氟沙星(LVFX)在胆道手术后患者的胆药浓度及其影响因素。方法:13例施行胆道手术并行T-管引流的患者poLVFX200mg,q8h,连服5d,用HPLC法测定LVFX在血浆、胆汁中的药物浓度。结果:胆囊结石降低胆汁中药物浓度;胆道梗阻程度与胆汁药物浓度有密切相关性,梗阻程度愈高,药物浓度愈低。结论:胆道疾病(特别是结石性胆道疾病)所造成的胆道梗阻状态在很大程度上影响LVFX在胆道的浓度,梗阻状态下低胆汁药物浓度将不利于感染的治疗。

细胞因子与肝再生

肝脏实质细胞与非实质细胞的相互作用是肝脏对外界刺激的最基本的生理和病理应答,非实质细胞在肝部分切除术后肝再生的应答过程中起着重要的调节作用,调节着肝细胞的代谢和生长,而细胞与细胞之间相互作用的桥梁主要来自于细胞因子,细胞因子在肝再生过程中又起着非常重要的作用.目前研究较多的细胞因子主要有肝细胞生长因子(HGF)、肿瘤坏死因子(TNF-a)、转化生长因子α(TGF-a)、转化生长因子β(TGF-β)、表皮生长因子(EGF)、白介素(IL-1,IL-6)等.现将有关研究进展综述如下.

肝外胆管梗阻患者血清内毒素水平与生长激素及其结合蛋白的关系

肝外胆管梗阻(extrahepatic bile duct obstruction,EBDO)可导致机体复杂而严重的病理生理改变[1-3].而机体消化吸收障碍和高分解代谢引起的营养障碍是EBDO患者高并发症率和高死亡率的主要因素之一[1-4],但EBEO时引发营养障碍的分子机制尚未完全阐明[5].生长激素(growth hormone,GH)-胰岛素样生长因子-I(insulin-like growth factor-I,IGF-I)轴已确认在调节营养代谢中发挥重要作用[6,7],而肝脏是GH/IGF-I轴的中心器官[8].已知营养障碍可显著抑制GH的分泌,体内注射内毒素可明显下调生长激素受体(GH receptor,GHR)的表达,引起GH抵抗[9].但EBDO时是否存在GH分泌不足和GH抵抗及其临床意义尚未见报道.我们观察EBDO患者GH-IGF-I轴的变化及其与肝酶学、胆红素水平、蛋白质合成功能及内毒素水平的关系,以探讨GH-IGF-I轴在EBDO患者病理生理改变中的意义.

Th_1/Th_2细胞与移植免疫耐受

随着器官移植手术的开展,如何诱导宿主对移植器官的特异性免疫耐受引起人们越来越多的关注.近年来随着研究的深入,特别是对一些"免疫特惠器官”的研究,逐渐提出了如免疫偏离、克隆清除、克隆不应答、免疫抑制等诱导免疫耐受的途径[1,2].但人们发现诸如克隆不应答、克隆清除并不能完全解释自身免疫耐受及移植免疫耐受的机制.然而免疫抑制的理论得到了大多数学者的承认,并进行了广泛、深入的研究[3].现在免疫学的研究进展不仅证实了外周免疫抑制性T淋巴亚群的存在,而且研究的重点集中在CD4+的Th1/Th2亚群的转换与免疫耐受之间的关系.

p21基因过表达对人胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

1材料和方法1.1材料2.1kb 的 P21全长 cDNA 片段由 Wade HarPer 教授惠赠,真核表达载体 PCLneo 和 T_4DNA 连接酶(Promega),Xho Ⅰ、Stu Ⅰ等内切酶(北方同正生物工程公司),DMEM 培养基、阳离子脂质体 DOTAP(Roche),小牛血清(华美公司),P21,P53mAb(中山公司),所用引物均由上海生物工程公司合成,

复合膳食纤维对大鼠脂代谢的长期作用及其机制

目的:观察复合膳食纤维B(dietary fiber complex B,DFC-B)对大鼠脂代谢的长期作用及可能的作用机制。方法:健康SD大鼠84只,诱导成高脂血症模型后按体质量及血胆固醇均衡的原则分为7组,以基础及高脂饲料作为对照组,其余5组给不同水平的DFC配方B,实验期3个月,观察DFC对大鼠血脂、肝脂水平以及粪胆汁酸排泄的长期影响。 结果:与高脂组相比,大鼠血TC在不同水平的DFC组均显著降低,差异有显著性意义(P<0.05)。DFC可以长期有效地降低大鼠肝胆固醇的水平(mmol/L)(0.42±0.12～2.20±1.02和3.26±0.16,P<0.05)。不同水平DFC均能增加大鼠粪胆汁酸的排泄,并存在明显的量效关系,但长期食用较高剂量DFC会减少大鼠粪胆汁酸的排泄量。 结论:DFC确能长期有效地降低血浆胆固醇水平,减少肝胆固醇的沉 积,增加粪胆汁酸的排泄是DFC降低血胆固醇的机制之一。

丝裂霉素诱导的肝癌细胞凋亡致敏树突状细胞(英文)

目的:建立丝裂霉素诱导癌细胞凋亡致敏从人外周血诱导扩增的树突状细胞的方法。设计:以癌细胞凋亡致敏树突状细胞为观察对象的随机对照实验。单位:解放军第三军医大学大坪医院野战外科研究所,解放军军事医学科学院放射医学研究所。材料:实验于1998-04/1999-05在解放军军事医学科学院放射医学研究所完成。细胞株为QBC939胆管癌细胞株,药物为抗肿瘤药物丝裂霉素。方法:从正常人外周血分离获得单核细胞,加入50μg/L重组人粒细胞集落刺激因子,1000U/mL白细胞介素4,隔天一次,共4次,培养第3天,加入丝裂霉素诱导凋亡的胆管癌细胞,再继续体外培养4d后,用树突细胞富集柱收集树突状细胞。主要观察指标:①培养的树突状细胞的鉴定。②树突状细胞和坏死胆管癌细胞以及正常培养的胆管癌细胞共培养,观察其吞噬凋亡小体负载抗原。③检测不同密度的树突状细胞(1×103/孔,5×103/孔,1×104/孔)的免疫刺激活性及负载抗原后的免疫刺激活性,以单核细胞作对照组。结果:①培养、扩增得到的树突状细胞高表达共刺激分子B7和CDla,表面具有典型不规则突起。②丝裂霉素诱导癌细胞凋亡形成的凋亡小体被树突状细胞捕捉、吞噬。③负载抗原的树突状细胞其激发同种异体T淋巴细胞增殖的能力进一步增强。结论:丝裂霉素诱导癌细胞凋亡可以致敏重组人粒细胞集落刺激因子加重组人白细胞介素4从人外周血单核细胞诱导、扩增出的树突状细胞,树突状细胞可以有效提呈凋亡胆管癌细胞的抗原,可望成为有效的肿瘤抗原致敏树突状细胞的新途径。

脾静脉结扎诱导继发性脾功能亢进犬动物模型的评价

目的:介绍并评价脾静脉结扎诱导的继发性脾功能亢进犬动物模型。方法:18只健康成年杂种狗随机分为Ⅰ组(对照组n=4)、Ⅱ组(脾静脉结扎n=10)和Ⅲ组(脾静脉结扎+脾切除,n=4),通过结扎狗的脾静脉主干和脾静脉属支引起淤血性脾肿大;脾静脉结扎后第3周第Ⅲ组行脾切除术。定期观察动物外周血细胞变化以及影像学、组织病理学改变。结果:脾静脉结扎后1wk内外周血红细胞、血小板开始下降,第3周末二者下降明显(Ⅰ组红细胞和血小板计数分别为(6.8+1.2)×10^(12)/L、(398±58)×10~9/L,Ⅱ组为(5.1±0.7)×10^(12)/L、(230±86)×10~9/L,分别P<0.01和P<0.05);红细胞和血小板减少、脾脏肿大可持续9wk以上;但脾静脉结扎后白细胞水平无显著改变,脾切除术后2wk红细胞和血小板逐渐恢复正常。脾静脉结扎3wk后脾脏组织病理学改变逐渐符合慢性脾脏淤血改变。结论:脾静脉结扎方法简单,可以建立确切的继发性脾功能亢进,可以作为脾功能亢进外科或介入治疗的较理想模型。

低温联合还原型谷胱甘肽对肝细胞缺血-再灌注损伤中bcl-2及bax的影响作用

目的观察低温联合还原型谷胱甘肽对缺血-再灌注诱导的L02肝细胞凋亡的影响,并探索相关分子机制。方法MTT比色法检测低温联合还原型谷胱甘肽对细胞活力的影响;试剂盒检测低温联合还原型谷胱甘肽对细胞丙二醛(MDA)水平、乳酸脱氢酶(LDH)释放及超氧化物歧化酶(SOD)活力的影响;激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧簇(ROS)生成;Western blot法检测低温联合还原型谷胱甘肽对bcl-2及bax蛋白表达水平的影响。结果低温联合还原型谷胱甘肽能明显抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞活力降低(P<0.05);低温联合还原型谷胱甘肽处理细胞能明显抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞MDA生成增加、LDH水平增高及SOD活力降低(P<0.05);低温联合还原型谷胱甘肽处理细胞能明显抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞内bcl-2蛋白表达水平降低及bax蛋白表达水平增高(P<0.05)。结论低温联合还原型谷胱甘肽可能通过上调bcl-2的表达及下调bax的表达抑制缺血-再灌注诱导的L02肝细胞凋亡发生。