食管鳞癌VEGF-C的表达及其临床意义

目的:研究食管鳞癌组织中VEGF-C mRNA和蛋白的表达及其与食管癌临床病理特征的关系,探讨VEGF-C在食管癌淋巴转移中的作用. 方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测75例手术切除的食管鳞癌组织VEGF-C mRNA的表达,免疫组织化学法检测VEGF-C蛋白的表达,分析其与食管癌临床病理参数的关系. 结果:食管鳞癌组织VEGF-C mRNA的表达阳性率显著高于癌旁组织(44.80% vs 10.67%,P<0.05);VEGF-C蛋白位于肿瘤细胞胞质,呈棕黄色颗粒;VEGF-C mRNA表达与食管癌患者的年龄、肿瘤大小、分化程度无关,与肿瘤浸润深度和淋巴结转移显著相关. 结论:食管癌组织VEGF-C的表达与肿瘤浸润和淋巴结转移有关,VEGF-C是促进食管癌淋巴转移的重要因素之一.

人羊膜负载猪角朊细胞构建皮肤表皮替代物的实验研究(英文)

背景:人羊膜为半透明的薄膜,含有多种促进细胞增殖的营养成分,是一种较好的负载角朊细胞的生物材料。目的:将人羊膜负载培养猪角朊细胞构建皮肤表皮替代物,并观察猪角朊细胞在人羊膜上生长增殖的形态特点。设计:以细胞为研究对象,单一样本研究,重复测量观察。单位:解放军第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所。材料:实验于2001-01/11在创伤、烧伤和复合伤国家重点实验室,第三军医大学预防医学院全军复合伤研究所完成。猪角朊细胞取自3月龄贵州小香猪。方法:将贵州小香猪的角朊细胞原代培养,传代扩增后,将角朊细胞以1.63×105/cm2的密度接种于人羊膜基质面,逐日于倒置显微镜下观察角朊细胞的生长增殖变化情况,并于培养3d与15d进行光镜、电镜观察,检测角朊细胞在人羊膜上的生长情况。主要观察指标:角朊细胞在人羊膜上的生长情况。结果:倒置显微镜下观察接种后30min内明显见到角朊细胞在人羊膜上黏附,24h内大部分黏附生长,3d形成单层完全覆盖人羊膜。光镜下人羊膜负载角朊细胞3d,可见角朊细胞在人羊膜基质面黏附呈单层生长,细胞扁平紧密排列。扫描电镜下可见胞体呈多边形,多见胞膜突起。透射电镜下可见角朊细胞与人羊膜黏附良好,生长在人羊膜上的角朊细胞内有许多角质丝。生长至15d,在倒置显微镜和扫描电镜下均可见,细胞因过于拥挤而隆起,因老化而形成较多碎片,部分细胞有空洞形成。结论:人羊膜是角朊细胞在体外培养的良好载体,对角朊细胞有明显的促增殖作用。但人羊膜负载角朊细胞生长至15d,因老化部分细胞有空洞形成。

黏着斑激酶在结肠癌细胞株中的表达及其RNA干扰载体的构建

目的检测结肠癌细胞株中FAK的蛋白表达水平,并构建FAK靶向RNA干扰重组体。方法通过免疫细胞化学SP法和Western Blotting技术检测结肠癌细胞株SW480、HCT116、HT29、LOVO中FAK的表达水平;针对FAK序列设计并合成具有小发夹结构的两条DNA序列,经退火后再重组入pGenesil-1载体,并转化大肠杆菌DH5α,经酶切及测序鉴定后转染结肠癌HT29细胞株。结果FAK在SW480、HCT116、HT29、LOVO等细胞株中均有较高表达,其中HT29为最高。重组体经鉴定与设计序列一致,并稳定转染HT29细胞。结论FAK在4个细胞株中高表达可能对结肠癌及其进展有重要作用;FAK靶向RNA干扰重组体的成功构建和转染,为结直肠癌新的基因治疗方法提供可能的思路。

细胞黏附对结肠癌细胞凋亡及化疗敏感性的影响

目的:研究结肠癌细胞株与基质黏附对肿瘤细胞凋亡及药物敏感性的影响. 方法:应用MTT法研究细胞与基质成分纤维粘连蛋白(FN) 结合对药物敏感性的影响;采用TUNEL法检测细胞凋亡, 采用流式细胞术观察Bcl-2和Bax基因表达. 结果:HT29细胞与FN结合后,其耐药性明显增加(抑制率为12.2%,对照组为53.0%,P<0.01),甩抗β-1整合素抗体阻断其与FN结合,其对药物的敏感性又恢复至对照水平(抑制率为50.6%,与对照组比P<0.05);HT29细胞与FN 结合后,Bcl-2基因蛋白表达上升(62.1%),Bax表达降低(12.86%),凋亡率(8.75±1.08%)显著降低,对照组为(19.46±1.08%);阻断其与FN结合,Bcl-2表达明显下降(22.68%),而Bax表达上升(73.8%),凋亡率也升至(18.9±1.4%)(与对照组比P<0.05). 结论:肿瘤细胞与基质成分结合可上调Bax和下调Bcl-2基因表达,增强肿瘤细胞的抗凋亡能力,从而增加肿瘤耐药性.

CagA^+ Hp培养滤液对人胃上皮细胞的恶性转化作用

目的研究CagA Hp培养滤液对人胃粘膜上皮细胞(GES-1)的恶性转化用。方法制备Hp培养滤液,PCR鉴定CagA基因,采用倒置显微镜、电镜、细胞生长曲线、克隆形成实验及流式细胞仪等,观察Hp(CagA^+)培养滤液对GES-1细胞的作用。结果经Hp(CagA^+)培养滤液处理的GES-1细胞细胞核增大、畸形、核染色质变粗,核仁肥大,核分裂,生长曲线可见细胞增生活跃,存活率195％.克隆形成试验显示细胞克隆形成能力增强,存活率达到338％,流式细胞仪S期细胞比率显著高于对照组。结论 Hp(CagA)培养滤液可以导致GES-1细胞的生长特性改变,呈现肿瘤细胞的形态学及生长特征。

阿瑞吡坦在中国肺癌患者中预防高剂量顺铂引起恶心和呕吐的疗效(英文)

目的探讨在中国肺癌患者中应用阿瑞匹坦减轻高剂量顺铂为主的化疗方案引起的恶心和呕吐的效果。方法纳入预接受高剂量顺铂为主化疗方案的肺癌患者291例,随机分为两组。阿瑞吡坦组139例,化疗第1日予阿瑞吡坦125 mg;第2,3日,予阿瑞吡坦80 mg,口服。标准治疗组152例,予安慰剂口服。两组均接受静脉注射格拉司琼和口服地塞米松。评估两组总完全反应率及在化疗第1日（急性期）和第2~5日（延迟期）的完全反应率,比较两组接受高度或中度致吐化疗方案患者的完全反应率。结果阿瑞吡坦组总完全反应率为69.1%（96/139）,高于标准治疗组[57.2%（87/152）,P=0.035],延迟期亦高于标准治疗组[72.7%（101/139）vs.59.9%（91/152）,P=0.019],急性期组间无显著差异[79.9%（111/139）vs.80.9%（123/152）,P=0.914]。阿瑞吡坦组接受高度或中度致吐化疗方案患者中完全反应率为60%（3/5）,高于标准治疗组[33%（1/3）,P=0.034]。结论阿瑞吡坦治疗可以预防中国肺癌患者接受高剂量顺铂化疗引起的恶心和呕吐,特别是在延迟期效果优于标准治疗。

淋巴结转移阴性的胃癌患者临床病理特征及生存探讨

目的:探讨淋巴结转移阴性胃癌患者的临床病理特征以及预后影响因素。方法:收集2000年1月至2009年1月我院收治的胃癌患者325例,其中经病理检查显示淋巴结转移阴性的105例患者作为阴性组(LN-组),另229例阳性患者作为阳性组(LN+组),比较两组的临床病理特征及临床预后。结果:LN-组的肿瘤直径、浸润深度及术后化疗与LN+组比较差异显著(P<0.05);LN-组的5年生存率为76.2%,显著高于LN+组的43.2%(P<0.05)。未透浆膜的LN-患者3年、5年生存率显著高于浸透浆膜者,术后化疗的LN-患者5年生存率显著高于未化疗者(P<0.05),肿瘤直径<5 cm的LN-患者3、5年生存率显著高于≥5 cm者(P<0.05)。单因素分析显示浸润深度、肿瘤大小及术后化疗与LN-胃癌患者的预后具有密切关系(P<0.05)。COX多因素分析显示浸润深度是影响LN-胃癌患者临床预后的独立因素(P<0.05)。结论:淋巴结转移阴性胃癌患者的病灶多位于中下部,男性多于女性,发病年龄多在60岁以内,肿瘤直径多不超过5 cm,浸润深度多未浸透浆膜,临床预后优于淋巴结转移阳性胃癌患者,浸润深度是影响淋巴结转移阴性胃癌患者临床预后的独立因素。