颈髓损伤患者循环系统动态变化的临床研究

目的 探讨颈髓损伤 (ＣＳＣＩ)后循环系统的动态变化。方法 回顾性对比分析了 47例ＣＳＩ患者与 57例非ＣＳＣＩ患者血压、心率、心电图的动态变化以及ＣＳＣＩ平面、颈髓反射复前后对血压、心率、心电图的影响。结果 ＣＳＣＩ患者血压、心率明显降低 (Ｐ < 0 . 0 1 );颈4以上比颈 4以下损伤患者的血压、心率下降更为明显 (Ｐ < 0 . 0 5);心电图除出现窦性心动过缓改变外 ,同时还出现ＳＴ段下移、Ｔ波低平 ,Ｕ波、ＱＲＳ波、Ｑ -Ｔ间期时限延长等心电异常表现 (Ｐ < 0 . 0 1 )。颈髓反射恢复后血压、心率明显升高 (Ｐ <0 . 0 1 ),心电图恢复正常 (Ｐ< 0 . 0 1 )。结论 ＣＳＣＩ后循环系统功能有明显异常改变 ,主要发生在脊髓休克期 ,且损伤平面越高 。

GM-1PLGA微球的制备工艺优化研究

目的优化W/O/W型乳化溶剂挥发法制备GM-1PLGA微球的工艺。方法以载药量为检测指标,通过单因素分析和均匀设计法筛选影响微球制备工艺的10种因素,优化GM-1PLGA微球的制备工艺。结果在优化条件下制备的微球形态规则,粒径为(18.9±8.1)μm,载药量为4.91%,微球体外释药规律符合Higuchi方程:Q=0.153t1/2+0.03705,r=0.995。结论该制备工艺合理,为制备GM-1PLGA微球提供了理论依据。

组织工程学黄韧带干细胞的筛选与鉴定

目的：通过Fibronectin介导进行差别粘附法筛选出人黄韧带干细胞并进行鉴定,探讨其作为组织工程种子细胞的可行性。方法：从椎间孔镜或椎间盘镜微创手术中获取10例人黄韧带标本,机械-酶消化法联合获取原代细胞,扩增第二代后接种于Fibronectin包被过的培养瓶。流式细胞仪检测细胞表面特异性标志物。免疫组化方法测定干细胞表达相关特异性蛋白。使用干细胞诱导培养基（实验组）向成骨、成脂、成软骨多向诱导分化,使用常规生长培养基培养者作为阴性对照（对照组）,分别行茜素红染色、油红O染色、阿利辛兰染色鉴定。PT-PCR检测成骨、成脂肪、成软骨基因表达。取同一患者的髂骨骨髓提取骨髓间充质干细胞,统计学分析黄韧带干细胞与骨髓间充质干细胞的细胞周期、增殖能力和干性基因表达差异。结果：原代细胞形态呈三角形或多角形,经Fibronectin介导粘附培养后形态比较均一,呈长梭形克隆群。流式细胞仪检测筛选后的黄韧带干细胞CD90、CD73阳性率〉96.8%,CD105阳性率〉95.9%,而stro-1为阴性。实验组茜素红染色呈强阳性,油红O染色可见大小不等脂滴呈红色,阿利辛兰染色大量蛋白聚糖聚集呈蓝色,对照组均为阴性。PT-PCR测定实验组成骨基因（OC、ALP、RUNX-2）、成脂肪基因（LPL、APP、PPAR2）、成软骨基因（COLⅡ、AGG、SOX9）显著上调,其中RUNX-2在对照组有低水平表达。免疫组化显示黄韧带干细胞和骨髓间充质干细胞均表达a-SMA、Ⅰ型胶原、纤连蛋白,但均不表达Ⅱ型胶原。两种干细胞均超过80%的细胞比例处于G0/G1期提示都有很强自我更新能力（P〉0.05）。CCK-8检测不同时间点两种细胞的增殖能力,在第1~10天时OD值逐渐增加,第10~14天达稳定状态,二者有相似的增殖能力（P〉0.05）。两种干细胞均表达干性基因NONAG、OCT-4、SOX2,组间差异无显著性（P〉0.05）。结论：通过Fibronectin差别粘附筛选法可有效筛选纯化出黄韧带干细胞,其可向成骨、成脂、成软骨多向分化,为组织工程技术治疗退变椎间盘提供了新的种子细胞。

急性创伤后2周软骨下骨未发生明显力学变化

背景:既往研究主要集中于退行性软骨损伤及软骨下骨的修复机制,而对于急性创伤后软骨下骨的组织、形态研究比较少。目的:观察软骨急性损伤后软骨下骨的早期组织形态学、分子生物、生物力学的变化。方法:健康成年新西兰兔24只,建立股骨头软骨缺损模型,分别收集模后即刻、造模后4,7,14d兔股骨头软骨及软骨下骨标本,大体观察造模后兔股骨头软骨及软骨形态变化,番红-固绿染色观察软骨及软骨下骨形态变化、免疫组织化学法测定骨转换标志物骨保护素/核因子κB受体活化因子配体的表达、Micro-CT扫描分析软骨下骨超微结构改变、力学检测法评估软骨下骨机械强度变化。结果与结论:大体粗测可见股骨头缺损模型于造模后7d出现软骨缺损面积扩大,深度增加及退变表现,利用染色法观测进一步证实了造模后7d其软骨厚度降低,软骨下骨骨小梁吸收。免疫组织化学及免疫荧光检测发现,造模后7-14d软骨下骨中骨保护素表达明显减少,核因子κB受体活化因子配体表达量显著增加,骨保护素/核因子κB受体活化因子配体比值降低,提示骨转化减弱甚至逆转。采用Micro-CT分析发现造模后7-14d软骨下骨的骨小梁数量增加,骨小梁数目及间距减小,通透性降低。抗压力学试验分析抗压强度和弹性模量未见统计学差异。结果提示,软骨损伤后软骨下骨可在早期造模后7d后即发生显著组织形态变化和骨转换能力的下调,从而导致软骨进一步破坏;造模后2周内未见软骨下骨从在明显力学改变,基于此的修复手段可为软骨损伤修复提供治疗靶点。

黄韧带骨化致单纯神经根症状1例

病人，男，67岁。8个月前开始出现严重的背部疼痛并放射到右腹部，坐或站立时症状加重，仰卧位时症状可稍缓解。既往有糖尿病史5年，一直通过药物控制血糖，无外伤史。专科查体：右侧腹部T9-10水平浅感觉减退。肌电图检查下肢无异常。腱反射正常。

兔韧带-骨界面移行结构的组织工程学构建

目的 探讨在脱细胞兔跟腱内构建一种具有连续异质性结构的组织工程学肌腱的方法.方法 体外培养家兔上皮组织成纤维细胞CRL-2087,并制备胶原水凝胶.实验分为单纯支架组、成纤维细胞＋软骨细胞组（Fb＋ CC组）、成纤维细胞＋成骨细胞组（Fb＋OB组）、成纤维细胞＋软骨细胞＋成骨细胞组（Fb＋ CC＋ OB组）.将异质性细胞群：成纤维细胞、软骨细胞、成骨细胞依次连续种植于支架内预先设定的3个功能区域（成纤维区、成软骨区及成骨区）,构建一种具有纤维形成、软骨形成及骨形成3个功能区域的“移行结构化”组织工程学肌腱,并对脱细胞支架行形态学、显微结构及细胞兼容性进行检测.采用组织学及免疫荧光分析3个功能区域内特定组织的梯度形成情况.结果 脱细胞跟腱的形态学、显微结构及细胞兼容性检测结果显示,经脱细胞处理后,腱细胞消失,胶原纤维排列疏松,腱束间可见较多孔隙存在,兔成纤维细胞在单纯支架表面或胶原水凝胶复合支架内培养时呈平稳增加.细胞支架复合共培养后,组织形态学及免疫荧光检测结果显示,软骨标志物糖胺聚糖、小鼠抗兔Ⅱ型胶原2A1只在软骨段内生成,而骨标志物钙结节、山羊抗兔骨钙素只在成骨段内生成,纤维生成段新生的胶原纤维相互连接,有效地修复了支架的结构.在连续种植成纤维细胞、软骨细胞、成骨细胞的脱细胞跟腱内,表现为纤维-纤维软骨-骨的结构渐变现象,而对照组无此现象.结论 脱细胞兔跟腱内层次性种植异质性细胞后,体外成功复制了一种拟生理的纤维-纤维软骨-骨的过渡界面结构,其具有细胞间相互作用可控性及基质不均匀性的多组织过渡特征.

1例地震后自闭症残疾孤儿的心理疏导

对1例地震后自闭症残疾孤儿的心理疏导。主要措施包括:确立首问负责制、建立安全、信任感、正视截肢现实、引导情感宣泄。经积极治疗和心理疏导,患者康复出院。

单侧腰椎间盘突出致对侧症状的诊疗创新思路

目的探讨特殊类型的腰椎间盘突出症,即单侧椎间盘突出导致对侧下肢出现症状和体征的原因及诊治新方法、新思路。方法回顾性分析通过椎间孔镜摘除突出的椎间盘组织治疗的32例中央旁型、旁侧型椎间盘突出,而症状出现在对侧下肢的腰椎间盘突出症患者的情况。结果术前腰痛VAS评分为(4.8±2.3)分,术后3个月为(2.2±2.2)分,末次随访为(2.3±1.9)分,差异有显著统计学意义(P<0.01),腿痛VAS评分术前为(8.8±2.2)分,术后3个月为(3.1±1.7)分,末次随访为(2.4±1.6)分。患者术前ODI为(65.5±24.3)%,术后3个月为(18.6±14.2)%,末次随访为(13.9±5.8)%,差异有显著统计学意义(P<0.01)。根据Nakai分级优良率为94.5%。结论对于单侧腰椎间盘突出致对侧症状的患者大多数情况下均是症状侧椎间盘组织破口,引起神经根周围的炎症从而引起症状。通过椎间孔镜从症状侧减压,手术入路可根据阅片决定从侧路或后路,术中用大量的生理盐水冲洗,突出侧可明显缩小而且术后神经根性疼痛立即消失,为一种有效的手术方式。