地塞米松对骨骼肌细胞蛋白降解的调节及其机制研究

目的研究地塞米松对体外培养的骨骼肌肌管内长寿命蛋白降解的影响及其可能的作用机制。方法无菌分离(2日龄)W istar大鼠双下肢肌肉,组织块法培养、增殖、传代纯化成肌细胞,融合形成肌管,使用L〔3,53H〕酪氨酸标记肌管长寿命蛋白后,随机分成两组。A组:分别用不含地塞米松(对照组)或含地塞米松10 nm o l/L(A 1组)、100 nm o l/L(A 2组)、1 000 nm o l/L(A 3组)的培养液培养肌管,12、24、36和48 h后使用液体闪烁计数仪测定培养液和细胞内L〔3,53H〕酪氨酸的含量,计算肌管长寿命蛋白的降解率。B组:分别用含蛋白酶体抑制剂M G 132(50μm o l/L,B 1组)或含M G 132(50μm o l/L)和地塞米松100 nm o l/L(B 2组)的培养液培养肌管24 h,相同方法测定肌管长寿命蛋白降解率。结果A 1、A 2和A 3组长寿命蛋白降解率均较对照组显著增加,差异有显著性(P均<0.01)。A 2组和A 3组长寿命蛋白降解率均较A 1组显著增加,差异有显著性(P均<0.01)。A 2组和A 3组比较,长寿命蛋白降解率差异无显著性(P>0.05)。B 1组长寿命蛋白降解率较对照组(24 h)降低明显,B 2组长寿命蛋白降解率较A 2组(24 h)显著降低,差异均有显著性(P均<0.01)。结论泛素蛋白酶体途径是骨骼肌肌管长寿命蛋白的重要降解途径之一。地塞米松能通过激活肌管内泛素蛋白酶体途径而增强长寿命蛋白的降解,此效应在一定范围内呈量效依赖关系。

血必净注射液对脓毒症大鼠组织肿瘤坏死因子-α及凝血功能的影响

目的：探讨血必净注射液对脓毒症大鼠凝血功能及组织肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的影响。方法：采用盲肠结扎穿孔术（CLP）制备脓毒症动物模型。96只健康Wistar大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组、模型组和血必净治疗组，后两组分别于CLP后0．5、12、24、36、48和60h经大鼠阴茎背静脉注射生理盐水或血必净注射液4ml／kg，分别于CLP后2、8、24、48和72h5个时间点各处死8只动物。各组大鼠取腹主动脉血检测血浆凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血酶原时间（APTT）及纤维蛋白原（Fbg）含量；取肝、肺组织测定TNF-α蛋白水平。结果：CLP后2h模型组动物肝、肺组织TNF-α蛋白水平迅速升高（P均〈0．01），8h达到高峰，分别为正常对照组的2．57倍（P〈0．01）和4．77倍（P〈0．01）。血必净注射液治疗后可显著降低肝、肺组织TNF-α蛋白水平（P〈0．05或P〈0．01），于CLP后24h均恢复至伤前正常范围。模型组CLP后2～72h。PT、APTT有不同程度的缩短，血浆Fbg水平显著降低（P〈0．05或P〈0．01）；血必净治疗组CLP后2～24hPT、APTT均较模型组明显延长（P〈0．05或P〈0．01），血浆Fbg含量回升。结论：血必净注射液可显著降低脓毒痒大鼠组织TNF-α蛋白水平，防止凝血功能异常，从而有效防止脓毒症的发生发展。

不同时期切痂对烫伤大鼠骨骼肌和脂肪组织葡萄糖转运蛋白-4mRNA表达水平的影响

目的 探讨大面积烫伤后实施休克期切痂对大鼠骨骼肌、脂肪组织葡萄糖转运蛋白 4(GLUT4 )mRNA表达水平的影响。方法 采用 30 %Ⅲ度TBSA烫伤大鼠模型 ,分别于伤后 8、2 4、96h切痂 ,测定血清胰岛素、胰高血糖素、皮质醇及血糖水平 ,采用RT PCR法检测烫伤和切痂后大鼠骨骼肌、脂肪组织GLUT4mRNA表达水平。结果 休克期切痂使血糖、胰高血糖素、皮质醇水平下降 ;伤后骨骼肌、脂肪组织GLUT4mRNA表达水平下降 ,休克期切痂可促使其回升。结论 大面积烫伤后大鼠骨骼肌、脂肪组织GLUT4mRNA表达减少 ,休克期切痂可促使其恢复 ,有利于糖代谢的改善 ,减轻高代谢状态。

休克期切痂对烫伤大鼠全身和肠道局部免疫功能的影响

目的 观察休克期切痂对烫伤大鼠全身和肠道局部免疫功能的影响 ,探讨其可能的机制。 方法 选用 96只Wistar大鼠。取其中 2 4只大鼠的躯干部皮肤冻存于液氮中 ,另取 8只作正常对照组。余下 6 4只造成 30 %TBSAⅢ度烫伤后 ,随机分为A组 2 4只 ,伤后不作任何处理 ;B组 2 4只 ,伤后 2 4h腹腔注射等渗盐水 5 0ml/kg,一次性切痂后用上述冻存异体皮覆盖 ;C组 1 6只 ,伤后 72h进行处理 ,方法同B组。检测A、B组大鼠伤后 2、4、8d和C组伤后 4、8d及正常对照组大鼠的脾淋巴细胞增殖功能、血浆和肠组织白细胞介素 (IL)2水平、肠黏液分泌型免疫球蛋白A(sIgA)及肠组织中二胺氧化酶 (DAO)含量的变化。 结果 各时相点下A、B、C组大鼠脾淋巴细胞增殖功能、血浆IL 2水平、肠组织IL 2及肠黏液sIgA含量均较正常对照组减少。B组伤后 4、8d和C组伤后 8d的脾淋巴细胞增殖功能接近正常对照组 ,血浆和肠组织IL 2水平明显高于A组 (P <0.0 1)。伤后 4、8d,B组肠黏液sIgA含量分别为 (3.5 1± 2 .1 4 )、(3.0 3± 0 .95 )mg/g,C组分别为 (1 .4 0± 0 .6 4 )、(1 .5 2± 1 .2 6 )mg/g,B组较C组增加近 1倍 (P 0.0 1 )。A组伤后 4、8d肠组织DAO活性低于正常对照组和B组 (P 0.0 5)。