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自身免疫性肝炎新型抗原分子高迁移率族蛋白B1的克隆表达鉴定及蛋白纯化
被引量:
2
1
作者
赵擎
辛绍杰
+2 位作者
胡燕
侯俊
貌盼勇
《实用预防医学》
CAS
2007年第1期53-56,共4页
目的获得高纯度的人高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),为制备单克隆抗体及研究其与自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)的关系打基础。方法应用PCR从乳腺文库中扩增得到HMGB1基因片段,并将其克隆到pET2...
目的获得高纯度的人高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),为制备单克隆抗体及研究其与自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)的关系打基础。方法应用PCR从乳腺文库中扩增得到HMGB1基因片段,并将其克隆到pET28a(+)载体上,对获得的pET28a(+)-HMGB1重组质粒扩增后进行PCR、酶切和测序鉴定。将鉴定完全正确的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析和Western blotting鉴定。最后进行大量诱导并纯化,得到带His标签的HMGB1蛋白。结果成功构建pET28a(+)-HMGB1重组质粒,并经诱导表达,得到了纯化的His-HMGB1蛋白。结论构建pET28a(+)-HMGB1重组质粒并得到其表达蛋白,为今后深入研究HMGB1在AIH中的作用机理提供有力的实验工具。
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关键词
高迁移率族蛋白B1
自身免疫性肝炎
克隆表达
蛋白纯化
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职称材料
题名
自身免疫性肝炎新型抗原分子高迁移率族蛋白B1的克隆表达鉴定及蛋白纯化
被引量:
2
1
作者
赵擎
辛绍杰
胡燕
侯俊
貌盼勇
机构
解放军
军医进修学院
解放军第三o二医院感染三科
解放军
第三
o
二
医院
传染病研究所病毒研究室
出处
《实用预防医学》
CAS
2007年第1期53-56,共4页
文摘
目的获得高纯度的人高迁移率族蛋白B1(high mobility group box-1 protein,HMGB1),为制备单克隆抗体及研究其与自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)的关系打基础。方法应用PCR从乳腺文库中扩增得到HMGB1基因片段,并将其克隆到pET28a(+)载体上,对获得的pET28a(+)-HMGB1重组质粒扩增后进行PCR、酶切和测序鉴定。将鉴定完全正确的质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导重组蛋白表达,表达产物经SDS-PAGE电泳分析和Western blotting鉴定。最后进行大量诱导并纯化,得到带His标签的HMGB1蛋白。结果成功构建pET28a(+)-HMGB1重组质粒,并经诱导表达,得到了纯化的His-HMGB1蛋白。结论构建pET28a(+)-HMGB1重组质粒并得到其表达蛋白,为今后深入研究HMGB1在AIH中的作用机理提供有力的实验工具。
关键词
高迁移率族蛋白B1
自身免疫性肝炎
克隆表达
蛋白纯化
Keywords
High mobility group box - 1 protein (HMGB1)
Autoimmune hepatitis(AIH)
Clone expression
Protein purification
分类号
R446 [医药卫生—诊断学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
自身免疫性肝炎新型抗原分子高迁移率族蛋白B1的克隆表达鉴定及蛋白纯化
赵擎
辛绍杰
胡燕
侯俊
貌盼勇
《实用预防医学》
CAS
2007
2
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