烧伤合并急性淋巴细胞白血病患儿一例

患儿女，4岁3个月，热液烫伤左下肢后6 h于2015年1月7日入院。体格检查示：创面分布于左下肢，基底潮红或红白相间。初步诊断为热液烫伤左下肢，烧伤总面积为6%TBSA，其中浅Ⅱ度2%TBSA、深Ⅱ度4%TBSA（图1A）。追问病史获悉，患儿于2013年9月13日于外院诊断为急性淋巴细胞白血病：骨髓检查示有核细胞增殖极度活跃，原始淋巴细胞＋幼稚淋巴细胞占92.6%，免疫分型示CD19＋、CD10＋、CD34＋、人白细胞抗原DR位点阳性、CD13＋，提示急性B淋巴细胞白血病，染色体核型59、XX、＋8、＋8、＋10、＋13、＋14、＋16、＋17、＋18、＋19、＋21、＋21[2]/46、XX[8]，提示部分细胞存在多倍体。诱导缓解采用长春新碱－柔红霉素－门冬酰胺酶－泼尼松化学治疗1个疗程，

Spl对肠三叶因子启动子基础转录活性的影响

目的寻找维持肠三叶因子（ITF）启动子基础转录活性的反应元件。方法以ITF启动子序列为模板，采用PCR方法获取不同长度及突变的ITF基因5’侧翼序列，插入pGL3-basle质粒，构建截短及突变荧光报告载体，进行以下实验。（1）按照随机数字表法（分组方法下同）将人胚胎肾293（HEK293）细胞分为pGL3-basic组、pGL3—300组、pGL3-280组、pGL3—260组、pGL3-240组、pGL3—220组、pGL3—200组，每组3孔，分别转染对应的质粒500ng及15ng海肾荧光素酶报告质粒pRL—TK，培养48h，单管型多功能检测仪检测细胞荧光素酶相对活性。（2）另取HEK293细胞，分为pGL3-basic组、pCL3—300组及突变体1、2、3、4组，每组3孔，分别转染pGL3-basic、pGL3—300及突变体1、2、3、4质粒500ng及15ngpRL—TK质粒。培养48h，同（1）检测荧光素酶相对活性。（3）另取HEK293细胞，分为空白对照组及10、50μmol／L光神霉素组，每组3孔，转染500ngpGL3—300质粒及15ngpRL·TK质粒后，空白对照组不加，后2组分别加10、50μmol／L光神霉素，培养24h，同（1）检测荧光素酶相对活性。（4）另取HEK293细胞，分为空白对照组及0．1、0．2、0．3μgpeDNA3．1-Spl组，每组3孔，转染500ngpGL3-300质粒及15ngpRL—TK质粒后，空白对照组不转染，后3组分别转染0．1、0．2、0．3μgpcDNA3．1-Spl质粒。培养48h，同（1）检测荧光素酶相对活性。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果（1）pGL3-basic组、pGL3-300组、pGL3．280组、pGL3—260组、pCL3-240组、pGL3—220组、pGL3—200组细胞荧光素酶相对活性分别为1．00、7．99±0．51、2．03±0．55、2．50±0．40、2．50±0．15、1．72±0．19、2．10±0．21，pGL3—280组、pGL3—260组、pGL3—240组、pGL3—220组、pGL3—200组细胞荧光素酶相对活性较pGL3—300组显著下降（P值均小于O．01）。（2）pGL3-basic组、pGL3．300组及突变体1、2、3、4组细胞荧光素酶相对活性分别为1．00、7．99±0．51、2．10±0．56、7．03±1．05、5．09±1．40、8．15±1．48，其中突变体1组细胞荧光素酶相对活性较pGL3—300组显著下降（P〈0．01），突变体2、3、4组细胞荧光素酶相对活性与pGL3—300组相近（P值均大于0．05）。（3）10、50Ixmol／L光神霉素组细胞荧光素酶相对活性分别为3．07±0．60、2．93±0．55，均显著低于空白对照组的8．05±0．83（P值均小于0．01）。（4）0．1、0．2、0．3IxgpeDNA3．1-Spl组细胞荧光素酶相对活性分别为12．74±1．12、14．52±1．25、15．66±1．82，均显著高于空白对照组的8．13±0．71（P值均小于0．05）。结论ITF启动子的-301～-293bp区域存在-个Spl反应元件，是维持ITF启动子基础转录活性的核心元件。