原位移植体内连续筛选法建立人胃恶性淋巴瘤裸小鼠高转移模型系统

目的建立侵袭和转移潜能不同的人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型系统。方法将外科手术切除的人原发性胃恶性淋巴瘤原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织块分别植入裸小鼠胃壁黏膜下层内，通过鼠间连续原位传代技术筛选高转移和特异器官转移瘤株。观察原位移植的成瘤率、移植瘤的侵袭、转移特性，并进行形态学（光镜、电镜、免疫组织化学）、染色体核型和流式细胞分析。结果人胃恶性淋巴瘤原发灶和肝转移灶新鲜组织均移植成功，建立了两株转移生物学特性不同的人胃（肝转移灶）恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型（HGBL-0304）和人胃（原发灶）恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型（HGBL-0305）。移植瘤组织病理学为胃弥漫大B细胞淋巴瘤。两株模型分别传至45代，共移植裸鼠419只，其中肿瘤移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100％。在转移时间、器官转移率、肝转移程度和宿主生存期上两株模型差异有统计学意义。HGBL-0304和HGBL-0305模型肝转移率为100％和69．5％，脾转移率为94．3％和55．6％，淋巴结转移率为62．6％和45．7％，腹腔种植转移率为43．5％和30．5％；肝、脾、淋巴结和腹腔种植转移出现时间分别为移植后2周和5周，3周和6周，2周和3周，3周和6周。HGBL-304和HGBL-0305模型肝转移分别以弥漫累及肝左右叶为主和肝右叶累及为主。HGBL-0304和HGBL-0305模型荷瘤鼠平均生存期分别为54．3d和106．9d。结论外科原位移植体内筛选法是一种建立人恶性淋巴瘤裸鼠高转移模型和特异器官转移模型的有效方法。HGBL-0304和HGBL-0305模型是首次成功建立的来自同一瘤源的两株侵袭和转移潜能不同的人胃恶性淋巴瘤裸鼠原位移植肝转移模型和高转移模型。

人原发性小肠恶性黑色素瘤裸鼠原位移植高转移模型的建立

目的建立人原发性小肠恶性黑色素瘤裸小鼠原位移植高转移模型。方法将手术切除的人原发性小肠恶性黑色素瘤原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织块分别植入裸鼠小肠黏膜层内，观察原位移植的成瘤率、移植瘤的侵袭性和转移率，并进行形态学、流式细胞分析和染色体核型分析。结果人小肠恶性黑色素瘤原发灶和肝转移灶新鲜组织均移植成功，建成人原发性小肠（原发灶）恶性黑色素瘤裸鼠原位移植高转移模型（HSIM-0602）和人原发性小肠（肝转移灶）恶性黑色素瘤裸鼠原位移植肝转移模型（HSIM-0603）。HSIM-0602和HSIM-0603模型分别传至21代和23代，共移植裸鼠227只，其肿瘤移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100％。HSIM-0602模型肝转移率为65．7％，肺转移率为84．8％，淋巴结转移率为63.8％。HSIM-0603模型肝转移率为100％，肺转移率为46．7％，淋巴结转移率为71．3％。移植瘤组织病理学为小肠高度恶性黑色素瘤。免疫组织化学显示，S-100蛋白和HMB-45均为阳性表达。电镜下，瘤细胞浆内可见大量的黑色素小体，也可见黑色素复合体。HSIM-0602模型移植瘤细胞DNA指数为1．59±0．07，HSIM-0603模型移植瘤细胞DNA指数为1．71±0．12，均为异倍体。染色体核型分析显示，HSIM-0602模型移植瘤细胞染色体数为55～57条，HSIM-0603模型移植瘤细胞染色体数为57～59条。结论HSIM-0602和HSIM-0603模型是成功的人原发性小肠恶性黑色素瘤裸鼠原位移植自发性高转移模型，完整地模拟了人原发性小肠恶性黑色素瘤患者的自然临床病理过程，为研究原发性小肠恶性黑色素瘤转移生物学和抗转移治疗提供了理想的动物模型。

人小肠原发性恶性淋巴瘤裸小鼠原位和皮下移植高转移模型的建立

目的为探讨小肠恶性淋巴瘤的发病机制和实验治疗提供理想的动物模型。方法将人小肠恶性淋巴瘤术中原发灶新鲜组织块和肝转移灶瘤组织分别移植于裸小鼠的小肠黏膜层内和肩胛间皮下,观察原位移植和皮下移植的成瘤率、移植瘤的侵袭和转移率;进行形态学、染色体核型和流式细胞分析。结果5例人小肠恶性淋巴瘤标本3例移植成功。从中筛选出1株同一人体瘤源人小肠原发性(非霍奇金B细胞性)恶性淋巴瘤裸鼠原位移植高转移模型(HSIL-0101)和皮下移植高转移模型(HSIL-0102)。移植瘤病理组织学为非霍奇金(大B细胞性)高度恶性淋巴瘤;免疫组织化学示CD19、CD20、CD22、CD45阳性,CD3、CD7阴性。染色体众数范围55～59条;流式细胞分析示DI值1.47～1.61,均为异倍体。HSIL-0101和HSIL-0102分别传至32和38代;共移植裸鼠357只;肿瘤的移植生长率和液氮冻存复苏成活率均为100%。HSIL-0101肝和淋巴结转移率为100%;HSIL-0102肝转移率为63.5%,淋巴结转移率为62.7%。移植瘤在裸鼠的小肠内和皮下侵袭性生长,发生血液(肝、脾)转移、淋巴转移和腹腔内种植性转移。结论HSIL-0101和HSIL-0102是首次建立成功的人小肠恶性淋巴瘤裸鼠原位移植和皮下移植均出现自发性高转移模型,可用于小肠恶性淋巴瘤的发病机制、侵袭和转移及实验治疗的研究。

人原发性小肠恶性黑色素瘤裸小鼠原位移植肝转移模型的建立

目的为探讨小肠恶性黑色素瘤的发病机制和实验治疗提供理想的动物模型。方法将原发性小肠恶性黑色素瘤患者术中原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织块分别植入裸小鼠的小肠黏膜层，观察原位移植成瘤率，移植瘤的侵袭和肝转移率。进行形态学[光镜、电镜和免疫组织化学（免疫组化）]染色体核型和流式细胞分析。结果人小肠恶性黑色素瘤原发灶和肝转移灶新鲜瘤组织均获移植成功。建成一株人原发性小肠（原发灶）恶性黑色素瘤裸鼠原位移植模型（HSIM-0501）和一株人原发性小肠（肝转移灶）恶性黑色素瘤裸鼠原位移植肝转移模型（HSIM-0502）。移植瘤组织病理学为高度恶性黑色素瘤；免疫组化显示S-100蛋白；黑色素瘤单克隆抗体45阳性；电镜下瘤细胞质内可见大量黑色素颗粒及黑色素复合体。染色体众数55～59条；流式细胞DNA指数值1．49-1．61；均为异倍体。HSIM-0501和HSIM-0502分别传至25代和27代；共移植裸鼠317只；肿瘤移植成瘤率和液氮冻存复苏成活率均为100％。HSIM-0501肝转移率为46．2％，淋巴结转移率为36．7％；HSIM-0502肝转移率和淋巴结转移率均为100％。移植瘤在裸鼠小肠内自主侵袭生长，发生血液转移、淋巴结转移和腹腔内种植性转移。结论HSIM-0501和HSIM-0502是首次成功建立的人原发性小肠恶性黑色素裸鼠原位移植肝转移模型，可用于小肠恶性黑色素瘤的发病机制、侵袭和转移及抗转移实验治疗的研究。