含CpG寡脱氧核苷酸增强人肺癌细胞株A549放射敏感性的研究

目的探讨含CpG基序的寡脱氧核苷酸对人肺癌细胞株A549放射敏感性的影响。方法分别用不同浓度CpG ODN处理A549细胞,经β射线照射后,检测细胞增殖和集落形成情况,ELISA法检测细胞TNF-α、IL-12和INF-γ的分泌水平,G riess检测细胞NO的含量。结果 CpG ODN抑制A549细胞的增殖,并呈量效关系。CpG ODN(10μg/m l)联合β射线照射,抑制A549细胞的增殖作用最强,且增加了TNF-α、IL-12、INF-γ和NO的分泌。结论 CpG ODN对A549细胞有明显的放射增敏作用,其机制可能与CpG ODN抑制A549细胞增殖、增强TNF-α、IL-12、INF-γ和NO的分泌有关。

CpG ODN免疫活性及其抗肿瘤作用的研究进展

含有CpG基序的脱氧寡核苷酸（CpGoligodeoxynucleotide，CpGODN）广泛存在于细菌DNA中，能激活多种免疫细胞，产生多种细胞因子，具有强烈的免疫激活功能，已成为肿瘤免疫治疗研究领域的新热点。

地塞米松、FK-506和CX-659s对TARC产生的调控作用研究

目的研究地塞米松、他克莫司(FK-506)和CX-659s对胸腺活化调节趋化因子(TARC/CCL17)产生的调控作用。方法运用ELISA方法分别研究了3种药物对人角质形成细胞株——HaCaT细胞和人成纤维细胞株——NG1RGB细胞的TARC表达作用的影响。结果 3种药物对于HaCaT细胞中TARC的表达,10-9～10-5 mol/L地塞米松显示明显的抑制作用;对于IFN-γ刺激下HaCaT细胞产生TARC水平,10-12～10-6 mol/L地塞米松、10-12～10-6 mol/L的FK-506均表现为明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01);CX-659s显示明显抑制NG1RGB细胞中TARC水平,且具有浓度依赖性(P<0.01)。3种免疫抑制剂分别在不同条件下抑制皮肤角质形成细胞和/或成纤维细胞的TARC表达。结论这些药物明显抑制TARC在皮肤角质形成细胞和成纤维细胞的表达,因此认为角质形成细胞和成纤维细胞可能在病理状态下通过促进CCR4+T细胞向炎症部位的游走,参与免疫调控作用。

含CpG寡核苷酸抗血管生成作用的实验研究

目的观察CpG ODN对裸鼠肺癌皮下种植瘤血管生成的作用。方法建立裸鼠皮下种植瘤模型,随机分为4组:A组[CpG ODN1826(1μg/μl)+β射线(RT:8 Gy)]、B组[CpG ODN1826(1μg/μl)]、C组[生理盐水(100μl/只)+β射线(RT:8 Gy)]、D组[生理盐水(100μl/只)]。接种肺癌细胞7 d后,开始瘤内注射药物并照射5 d。RT-PCR法测定瘤组织中VEGF-C mRNA、NRP-1 mRNA的表达。结果 4组裸鼠肿瘤组织中VEGF-C mRNA相对表达水平分别为18.34±3.19、29.62±3.14、51.13±2.81、53.46±5.67;NRP-1 mRNA相对表达水平分别为23.57±5.73、34.72±5.13、59.95±4.76、62.49±6.34,A组较其他3组显著下降(P<0.01),B组较C组和D组也显著下降(P<0.01)。结论 CpG ODN1826可显著抑制血管生成,其作用机制可能与抑制VEGF-C和NRP-1的表达有关。

树突状细胞诱导抗胃癌效应的实验研究

目的探讨树突状细胞(DC)抗胃癌效应的作用。方法分离正常人外周血单个核细胞(PBMC),加入GMCSF和IL-4培养,于第5d加入TNF-α继续培养,诱导分离DC。将淋巴细胞与DC混合培养4d后,加入胃癌细胞MKN45、MKN28及SGC7901抗原培养至10d,诱导产生肿瘤特异性的CTL。ELISA检测IL-12和IFN-γ的水平,MTT法检测DC诱导的CTL对MKN45、MKN28、SGC7901和A549体外杀伤效应,流式细胞术检测CTL对肿瘤细胞周期、凋亡的影响。结果培养10d后,IL-12、IFN-γ的分泌量明显提高,DC对同种不同分化类型的胃癌细胞株MKN45、MNK28和SGC7901均有强烈的杀伤效应,杀伤活性显著高于A549(P<0.01)。与A549比较,MKN45、MKN28和SGC7901的细胞周期显著抑制、凋亡率增加(P<0.01)。结论 DC体外可诱导出高效而特异的抗胃癌效应,显著抑制胃癌细胞分裂增殖,促进其凋亡。

脾动脉阻断技术在射频消融治疗门脉高压性脾功能亢进症中的应用

目的探讨脾动脉阻断技术联合脾脏射频消融(RFA)治疗门静脉高压性脾功能亢进症(脾亢)的有效性和临床应用前景。方法对阻断或未阻断脾动脉主干的接受脾脏RFA治疗的肝硬化性门静脉高压合并重症脾亢患者,分析随访6个月的临床疗效;并评估脾动脉阻断对肝硬化合并脾动脉盗血综合征的治疗效果。结果阻断或未阻断脾动脉主干的接受脾脏RFA治疗的门脉高压性脾亢患者各15例,术后未发生严重并发症。阻断脾动脉后实施脾脏RFA组消融(56±35)%脾脏体积,较未阻断脾动脉组消融体积(38±21)%显著增加(P<0.01);且阻断脾动脉组治疗后血小板计数、Child-Pugh评分和分级改善明显优于未阻断脾动脉组。合并巨脾的脾动脉阻断组15例患者经影像学诊断都符合脾动脉盗血综合征诊断,经脾动脉栓塞(13例)和脾动脉结扎(2例)后肝动脉内径显著增粗,肝动脉供血明显改善。结论脾动脉阻断联合脾脏射频消融术是治疗门静脉高压性脾亢,可以显著提高脾亢治疗的安全性和有效性,同时纠正脾动脉盗血综合征和有效改善肝功能。

应用达芬奇机器人手术系统治疗94例肝胆胰疾病的经验总结

目的总结达芬奇机器人手术系统治疗肝胆胰疾病的临床经验。方法回顾性分析2009年1月至12月第二炮兵总医院应用达芬奇机器人手术系统治疗94例肝胆胰疾病患者的临床资料。结果90例患者由达芬奇机器人手术系统完成手术，4例中转开腹，中转率为4％（4／94）。肝脏手术16例，其中1例右肝后叶巨大血管瘤患者因血管瘤与下腔静脉关系密切，中转开腹；肝门部手术27例；胰腺手术19例，其中2例因胰头肿瘤巨大暴露不佳，1例因胆总管下段肿瘤太小，术中通过胆道镜探查＋活组织检查无法明确肿瘤性质而中转开腹；其他部位手术32例（包括胆肠吻合6例，胆总管探查取石11例等）。结论应用达芬奇机器人手术系统可以完成各类型肝胆胰外科手术，拓展了腹腔镜外科的手术适应证。

应用达芬奇机器人实施腹部外科疑难手术的护理

应用达芬奇S机器人系统完成腹部外科肝、胆、胰、胃肠疑难手术200例,191例顺利完成手术,9例中转开腹。提出该手术时间长、费用昂贵,护士应注重术前评估与访视,充分了解患者的生理、心理、社会状况以及经济支持;术后重视皮肤护理,预防压疮,并逐渐适应微创术后患者恢复快的特点,鼓励患者早期活动,促进早日康复。

机器人肝切除术:附17例报告

目的:总结机器人手术系统在肝脏切除术应用中的临床经验。方法:对于2009年1月至2010年7月实施的17例机器人外科手术系统所行肝切除术的资料进行回顾性分析。结果:17例机器人肝脏手术病人中男∶女=8:9,平均年龄(55±16)(27～85)岁。包括原发性肝细胞癌3例;胆管细胞癌3例(BismuthⅢb型肝门部胆管癌1例,肝内胆管囊腺癌2例);转移性肝癌3例;良性肝脏肿瘤4例(肝血管瘤3例,胆管囊腺瘤1例);左肝内胆管结石4例。手术方式:规则性左半肝切除术2例,左肝外叶切除术5例,肝局部或楔形切除7例,亚肝段(s5a)切除术1例,联合其他机器人术式12例。机器人肝切除的平均手术时间为280 min,术中出血量为150 mL。术中发生大出血3例,其中2例(11.8%)为巨大肝血管瘤中转开腹切除。采用Pringle法肝切除4例,采用肝实质缝扎和超声刀离断肝实质交替法实施左肝外叶切除4例。机器人肝切除病例的平均住院时间为7(5～16)d。术后发生严重并发症2例(11.8%):腹腔内出血1例,肺部感染1例,经保守治疗治愈,无胆漏等严重并发症和围手术期死亡。结论:机器人肝切除术安全、可行,疗效确切。探索适合机器人手术系统优势的肝切除止血方法等创新性技术将是今后机器人肝切除的重点之一。

脾脏射频消融术治疗肝硬化性脾功能亢进症

大部分肝硬化患者合并有脾功能亢进症,表现为脾脏肿大、一种或几种血细胞(主要是血小板、白细胞)减少。传统治疗措施存在较大的局限性和/或并发症。作者在国际上率先开展的脾脏射频消融治疗脾亢的新型微创措施,本文从脾脏射频消融治疗脾亢的工作原理、治疗入路、安全性、临床疗效、提高安全性和疗效的联合脾脏射频消融的多手段治疗模式等多个角度,总结了作者近10年的实验和临床实践经验。本文可为其他单位开展该项新技术提供一定的参考价值。

胰腺癌中FXYD6蛋白的表达及临床意义

目的:探讨FXYD6蛋白在胰腺癌中的表达及临床意义.方法:应用免疫组化法检测FXYD6蛋白在胰腺癌中的表达,并分析其与临床病理因素的关系.结果:47例胰腺癌病例中,FXYD6蛋白阳性表达42例,阳性表达率为89.34%,而正常胰腺组织中不表达或低表达,两组相比有显著性差异(x^2=10.8631,P=0.0125).按FXYD6蛋白表达程度将47例胰腺癌病例分为高表达组和低表达组,两组年龄、性别、肿瘤大小及远处转移之间的差异无统计学意义,而肿瘤分化程度(x^2=11.562,P=0.0031)、淋巴转移(x^2= 4.1947,P=0.0406)、TNM分期(x^2=9.5995,P =0.0223)之间的差异有显著统计学意义,肿瘤分化程度低、出现淋巴转移、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期的胰腺癌组织中FXYD6蛋白表达明显增高.Spearman等级相关分析显示,FXYD6蛋白表达程度与肿瘤大小(r=0.2991)、分化程度(r=0.6980)、淋巴转移(r=0.4971)、远处转移相关(r=0.4967).结论:FXYD6蛋白在胰腺癌发病机制中发挥重要作用.

丙肝抗病毒治疗前脾切除纠正血小板减少症

目的应用脾脏切除术纠正血小板减少症,为慢性丙型肝炎抗病毒治疗提供条件。方法回顾性总结了我们收治的7例慢性丙型肝炎患者的临床资料。结果7例慢性丙型肝炎或肝硬化患者,肝功能均为ChildA级,行开腹病理性脾脏切除术,术中出血量为150～400ml左右,未输血,术后所有患者血小板均在1周内升至正常水平,无手术死亡或术后门静脉血栓形成。术后10至14天后均给予干扰素加利巴韦林抗病毒治疗24～48周。结论丙型肝炎肝硬化患者施行脾脏切除术是安全有效的,术后1周患者外周血血小板就显著上升,即可开始干扰素抗病毒治疗。该方法适用于慢性丙型肝炎准备行抗病毒治疗,因外周血白细胞、血小板减少而无法进行的患者。

带血管蒂组织瓣在医源性胆道损伤中的应用

目的探讨带血管蒂组织瓣在医源性胆道损伤中的手术方式及效果。方法对于11例腹腔镜胆囊切除术后胆道损伤的患者,分别使用脐静脉瓣、胃瓣、胆囊瓣、空肠瓣以及圆韧带瓣进行修复。结果胆道修复术采用脐静脉瓣1例、胃瓣1例、胆囊瓣1例、空肠瓣4例以及圆韧带瓣4例。有1例患者术后出现胆瘘。所有患者于出院后肝功能指标及胆道影像学表现均基本正常。结论医源性胆道损伤修复手术为围肝门操作的精细手术。带血管蒂组织瓣修复重建术在恢复胆道连续性以及降低术后并发症方面具有很好的效果。

单孔腹腔镜手术20例报告

目的:总结单孔腹腔镜手术的手术经验。方法:回顾分析2011年11月至2011年12月施行的经脐单孔腹腔镜手术的临床资料,其中10例行阑尾切除术,6例行胆囊切除术,胆囊造瘘术、肝囊肿开窗术、肝癌射频消融术、腹壁疝修补术各1例。结果:20例手术均获成功,无一例中转开腹及术后并发症发生。经脐单孔腹腔镜肝癌射频消融术手术时间3 h;首例经脐单孔腹腔镜阑尾切除术手术时间121 min,其后的阑尾切除术手术时间平均55 min;经脐单孔腹腔镜胆囊切除术手术时间平均65 min;巨大肝囊肿单孔腹腔镜开窗术手术时间60 min;腹壁疝修补术90 min。术后平均住院3.5 d,4例胆囊手术患者术后1天出院。结论:单孔腹腔镜手术可实现真正腹壁无疤痕的效果,相对传统腹腔镜手术,其手术时间稍长,存在体内器械相互碰撞、手术空间缺乏、单孔Tri-port密封口漏气等缺点,但随着技术水平的不断提高及手术器械的研发完善,单孔腹腔镜手术会逐渐发展并得到广泛推广。

应用SELDI-TOF-MS技术分析胆管恶性肿瘤患者外周血清蛋白的差异表达

目的应用蛋白质组学技术分析胆管恶性肿瘤患者外周血清中差异表达的蛋白质,初步探讨其对胆管恶性肿瘤早期诊断的意义。方法应用表面加强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术,对58例胆管恶性肿瘤患者及58例对照者(38例健康体检者及20例胆囊结石患者)外周血清蛋白质进行检测,应用Ci-phergen蛋白质芯片软件对蛋白质谱进行分析。结果与对照组外周血清蛋白质谱相比,胆管恶性肿瘤患者外周血清中相对分子质量为5.900×103、9.080×103及11.863×103的3个蛋白质点呈明显高表达(P<10-5);相对分子质量为6.959×103、14.000×103、14.129×103、14.302×103、17.557×103、17.690×103及28.552×103的7个蛋白质点呈明显低表达(P<10-5),其中相对分子质量为11.863×103的蛋白质点在胆管恶性肿瘤组外周血的平均峰值约为对照组的8倍。有黄疸与无黄疸的胆管癌患者的外周血清中上述10个蛋白质点未见差异表达,但检测出另外3个差异表达的蛋白质点,其相对分子质量分别为7.255×103、12.364×103和15.873×103,并均在伴黄疸患者外周血清中呈高表达(P<10-5)。相对分子质量为5.900×103的蛋白质点在Ⅱ期胆管癌患者的表达明显高于Ⅲ、Ⅳ期患者(P<10-5),另9个蛋白质点在胆管癌不同临床分期中的表达差异均无统计学意义。结论胆管恶性肿瘤患者外周血清蛋白质表达与对照组相比有明显变化,相对分子质量为11.863×103的蛋白质点具有作为胆管恶性肿瘤早期诊断的生物学标志物潜力。

脾动脉盗血综合征—被忽视的概念

脾动脉盗血综合征（splenic arterial steal syndrome,SASS）的概念并不新奇,20多年来在肝移植文献中已有零星个案报道[1-7]。肝移植后SASS最先由德国Langer于1990年提出,国内则由刘全达于2003年最先报道[5-8]。SASS可导致胆道不可逆缺血性损害和移植物失功能等严重后果。

射频消融治疗顽固性免疫性血小板减少症

目的探讨脾脏射频消融术治疗顽固性免疫性血小板减少症（ITP）的安全性和有效性。方法回顾分析我院开展的国际首例脾脏射频消融治疗ITP的疗效。结果 1例43岁女性食管癌患者,经反复外周血计数、血涂片和骨髓穿刺等检查证实合并原发性重症ITP,其血小板计数小于（5~10）×109/L,经规范抗幽门螺旋杆菌治疗、静滴人免疫球蛋白、甲基强的松龙、长春新碱和输注血小板等治疗无效。患者接受腹腔镜下脾脏射频消融术治疗,术后第22天血小板计数恢复正常,无围手术期并发症;随访超过8个月,患者呈完全应答。结论脾脏射频消融术治疗顽固性ITP安全、有效,值得扩大临床试验进一步验证其疗效。