双亲和柱分离纯化高纯度抗体Fab酶切片段

目的建立利用抗原亲和柱及蛋白G亲和柱纯化抗体木瓜蛋白酶酶切产物中高纯度Fab片段的方法。方法以抗体对应的抗原蛋白与NHS-activated Sepharose 4Fast Flow活化偶联填料偶联制备抗原免疫亲和层析柱,将抗体木瓜蛋白酶酶切产物分别通过蛋白G柱及抗原亲和柱制备抗体的Fab片段。通过SDS-PAGE电泳、ELISA测定及临床类风湿因子阳性血清的干扰实验鉴定其制备效果。结果抗体木瓜蛋白酶酶切产物分别通过蛋白G柱及抗原亲和柱后可以依次去除抗体Fc片段及未切开的抗体、木瓜蛋白酶及失活的Fab抗体片段,最终获得高纯度、高活性的Fab抗体片段。SDS-PAGE电泳、ELISA测定抗体Fc段被完全去除,双抗夹心ELISA检测能消除类风湿因子阳性血清导致的假阳性。结论成功建立了双亲和柱分离纯化抗体Fab片段的方法,该方法适用于快速、高质量、大规模制备Fab抗体片段。

抗血管生成化疗降低鼠肉瘤组织微血管密度及血清VEGF浓度

目的:研究环磷酰胺(CTX)抗血管生成化疗对昆明鼠皮下肉瘤组织微血管密度及血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)浓度的影响及机理。方法:将荷S180肉瘤(100mm3)鼠随机分成A组(CTX抗血管生成化疗组),B组(CTX标准化疗组)和生理盐水对照组(C组),按实验方案处理后,检测抑瘤率和肿瘤组织内微血管密度,检测不同时段血清VEGF浓度。结果:A组和B组抑瘤率分别为88.7%和90.6%,A、B及C组微血管密度分别为(7.6±5.2)个/mm2、(16.5±5.5)个/mm2及(17.9±4.7)个/mm2,A、B及C组d21时血清VEGF浓度分别为(21.23±7.57)pg/ml、(41.01±14.37)pg/ml及(35.24±13.87)pg/ml。结论:抗血管生成化疗持续降低外周血VEGF值,降低肿瘤组织内的微血管密度,直接降低VEGF浓度是抗血管生成化疗的一个重要机制。

抗组氨酸标签单克隆抗体的制备、鉴定及应用

目的制备特异性抗组氨酸标签(His-tag)的单克隆抗体(mAb)并进行鉴定。方法以合成的15个组氨酸的多肽耦联牛血清清蛋白(BSA)为抗原免疫Balb/c小鼠,按常规方法进行细胞融合。采用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)筛选阳性克隆及有限稀释法进行克隆化,用Protein G柱亲和纯化抗体及ELISA检测纯化抗体的效价、相对亲和力及抗体亚类,用ELISA及Western blotting对mAb的特异性进行鉴定,并与含His-tag的重组蛋白特异性抗体配对建立双抗夹心ELISA定量检测对应的重组蛋白。结果筛选出5株能稳定分泌抗His-tag的杂交瘤细胞株,抗体亚类均为IgG1(κ),其中1-G2亲和力最高(1.27×1010),并且1-G2在ELISA及Western blotting中能与不同类型的含His-tag的重组蛋白结合,能与降钙素原(PCT)抗体构建双抗夹心ELISA定量检测含His-tag的PCT重组蛋白,灵敏度达到4.6ng/mL。结论成功制备了特异性好、亲和力高、能稳定分泌抗His-tag的mAb,该抗体能应用于ELISA及Western blotting等多种His-tag的检测方法,为蛋白质研究检测、定位、相互作用等提供了工具。

外用复春散1号治疗烧伤后期残余创面疗效观察

目的观察外用复春散1号治疗烧伤后期残余创面的临床疗效。方法对128例烧伤后期残余创面的患者,随机分为试验组和对照组各64例,试验组用复春散1号单层纱布覆盖创面行半暴露疗法,对照组创面以单层碘伏纱布覆盖行半暴露疗法,1周为一疗程,比较两组的治疗情况。结果试验组和对照组创面治愈率、总有效率、细菌检出率分别为59.4%、87.5%、12.1%和28.1%、65.6%、33.6%,两组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论复春散1号治疗烧伤后期残余创面疗效明显,使用方便,是外用治疗创面较好的中药药物。

腹腔镜胆囊切除术手术配合护理体会

目的：探讨经腹腔镜胆囊切除术的手术配合。方法对我院2005年4月～2013年12月完成的100例经腹腔镜胆囊切除手术的护理配合进行总结。结果手术配合顺利，无护理事故发生，100例手术顺利完成。结论手术室护士熟悉手术步骤，掌握仪器设备使用方法，是手术配合成功的关键。

自制套筒在CO_2激光包皮环切术中的应用效果

目的探讨自制套筒在CO2激光包皮环切术中的应用效果。方法将660例行CO2激光包皮环切术的患者随机分为套筒组和对照组各330例。套筒组根据患者阴茎大小制作合适的套筒,将其套在阴茎上行CO2激光包皮环切术,对照组采用传统的激光包皮环切术。观察两组的手术时间、副损伤、切口愈合时间及术后并发症。结果两组手术时间、切口愈合时间、手术副损伤发生率、术后切口裂开发生率差异有统计学意义(P<0.05),术后出血发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CO2激光包皮环切术中使用自制套筒,操作方法安全,手术时间短,副损伤少,伤口愈合好,成本低廉,疗效满意。

1例乙状结肠癌伴肠膀胱瘘的CT表现

回顾性分析1例乙状结肠癌伴肠膀胱瘘(EVF)患者的临床资料,探讨EVF的病因、分类、CT表现。结果表明:EVF的症状可以同时开始于泌尿系和胃肠道,肿瘤引起的EVF预后不良,手术切除对EVF具有较好的临床效果。CT检查在EVF诊断中起重要作用,EVF常见的CT表现为膀胱内积气、局部膀胱壁增厚、膀胱外肿块。

感控干预前后普外科手术部位感染率变化

目的：探讨感控干预在降低普外科手术部位感染率中的作用。方法：收集2013 年1 月-2014 年12 月普外科所有手术患者资料。自2014 年1 月起对普外科的手术患者实行感控干预，感控干预前后1 年，对比普外科手术部位感染率的变化。结果：感控干预前后，普外科手术部位感染率分别为8.09%和4.88%，差异有统计学意义(χ2=8.66，P＜0.05)。结论：采取积极、有效的感控干预可以有效降低普外科手术部位感染率。

牙刷穿透胃壁致右髂窝脓肿CT表现1例

1病例报告 患者，男，41岁。因反复右下腹痛4年，右下肢疼痛3月，于2012年lO月23日人院。曾于2011年9月20在我科行阑尾切除术，术后患者仍诉腰部疼痛，予腹部CT（图1～图2）示：右中腹部肠管稍增厚，内见高密度异物影。追问病史．患者诉3年前吞入牙刷头1枚。患者术后切口拆线后出院，嘱患者1个月后复诊，患者未重视。患者因右下肢疼痛3个月于2012年10月23再次来院，行CT检查（图3-图7）示：腹腔异物（牙刷）继发性穿孔致右侧髂骨慢性化脓性骨髓炎，右侧髂窝脓肿可能。