骨肉瘤肺转移大鼠模型的建立

目的:探讨大鼠骨肉瘤细胞系接种细胞的数量与肿瘤形成及肺转移发生的关系。方法:30只6周龄SD大鼠随机分为3组,大鼠骨肉瘤细胞系UMR-106分别以1×105,1×106,1×107个数量注射入大鼠股外侧皮下。接种后,每周观察肿瘤生长情况,测量肿瘤直径,绘制肿瘤生长曲线,连续5周。第6周取肿瘤及双侧肺,病理取材,苏木精-伊红(HE)染色,光镜下观察。结果:1×105及1×106组肿瘤生长情况不佳,未出现肺转移;1×107组肿瘤发生率达到100%,肺转移率达70%。结论:大鼠骨肉瘤细胞系UMR-106具有较强的致瘤性及较高的肺转移率,应用该细胞系建立的动物模型为骨肉瘤综合治疗奠定动物实验基础。

全反式维甲酸对人骨肉瘤细胞抑制增殖和诱导分化的实验

目的:探讨应用全反式维甲酸处理细胞增殖和分化对人骨肉瘤细胞的影响。方法:实验于2004-08/2005-01在第四军医大学唐都医院解放军骨科中心骨肿瘤研究所完成。以1×10-6mol/L的全反式维甲酸处理人骨肉瘤OS-9901细胞为试验组,对照组细胞不加全反式维甲酸处理。观察维甲酸对骨肉瘤细胞诱导分化向良性细胞发展的作用。①计算细胞增殖抑制率,通过四唑盐检测。②用药后细胞形态的变化,以显微镜观察。③骨肿瘤较为特异性的碱性磷酸酶表达变化,应用碱性磷酸酶染色观察。④用药对骨形成蛋白2表达的影响,表达增高促进骨肿瘤细胞的增殖,应用免疫组织化学染色观察。⑤细胞的变化应用透射电镜观察。⑥计算成瘤率,并对试验组与对照组肿瘤体积大小进行比较,采用裸鼠移植瘤试验。结果:①全反式维甲酸处理第2天对人骨肉瘤OS-9901细胞生长的平均抑制率为25.2%,第4天达到51.7%,第6天为68.4%。②显微镜下可见处理后的细胞生长及形态有明显改变,增殖缓慢,生长差,数量减少,分裂像少见。③碱性磷酸酶和骨形成蛋白2的表达减少。④透射电镜下出现处理后细胞膜绒毛减少,胞核光滑无切迹,核浆比例下降等良性分化改变。⑤各组肿瘤的成瘤率均为100%,成瘤期对照组约为7d,实验组约为10d,用药组瘤细胞核浆比例较对照组减小,出现大量的凋亡细胞和大片的坏死区,显示有明显抑制增值和向良性转变倾向。结论:全反式维甲酸有抑制骨肿瘤细胞增殖,并诱导其向良性分化作用。

转化生长因子β1基因突变对细胞生物学行为改变的可能意义(英文)

背景:通过测序进行序列分析是发现基因突变的直接手段,转化生长因子β1(TGF-β1)作为细胞最主要的生长调控因子,参与多项生理和病理过程。该基因的突变对于所在细胞的生物学行为改变可能具有重要意义。目的:分析人成骨肉瘤细胞系中TGF-β1成熟肽基因序列,探讨TGF-β1基因突变存在的可能性及其机制,为肿瘤及骨软骨损伤的基因治疗提供新思路。设计:非随机非对照实验研究。地点和对象:实验在第四军医大学唐都医院解放军骨科中心骨肿瘤研究所完成,对象为人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607(本室建立)。干预:提取人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中的总RNA,参照Genebank数据库中的已知序列设计合成引物,采用RT-PCR法扩增TGF-β1成熟肽基因,克隆入质粒pcDNA3.0进行序列测定和分析。主要观察指标:将多次测序所得的TGF-β1成熟肽基因序列与Genebank数据库中的已知序列进行比较,分析恒定差异。结果:发现人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中TGF-β1基因存在两处点突变,其中第1788位突变引起相应多肽的结构改变。结论:人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607中存在TGF-β1基因突变,其可能在病理机制中起重要作用,具有强功能活性突变子的获得对于骨软骨损伤的修复有重要意义。