组织工程皮肤中人毛乳头细胞体外培养条件的优化

目的:优化人毛乳头细胞体外培养条件。方法:采用成人头皮标本,显微器械分离法及器械分离结合胶原酶消化二步法分离毛乳头,分别利用普通有血清的Dulbecco最低必需培养基(DMEM)、含生长因子的有血清DMEM培养基及角质细胞条件培养基,进行人毛乳头细胞的体外培养,比较细胞的生长特点、增殖活性、细胞周期等生物学特性。结果:二步法分离毛乳头的效率为显微器械分离法的100倍,利用含生长因子的有血清DMEM培养基和角质细胞条件培养基均可使毛乳头细胞长期维持较强的增殖潜能。结论:二步法分离毛乳头,利用含生长因子的有血清DMEM培养基或角质细胞条件培养基进行培养,可以快速、简便、高效地获得大量保持高增殖潜能的毛乳头细胞。

川芎嗪对肝创伤后早期大鼠残肝组织保护作用的评价

目的:研究川芎嗪干预对68%(2/3)肝切除大鼠术后残肝组织的保护作用,以及其对肝脏核因子κB(NF-κB)激活的影响.方法:60只SD大鼠随机分成3组(每组20只),均行68%(2/3)肝切除术.术后30 min分别给予以下处理:A组腹腔注射生理盐水,B组注射吡咯烷二硫代氨甲基甲酸盐(PDTC),C组注射川芎嗪.术后2 h、6 h、10 h和24 h观察各组大鼠术后一般情况和血清转氨酶变化.组织切片观察残肝组织病理状况,Western-blot方法检测NF-κB的激活.结果:C组大鼠残肝组织切片细胞水肿较A组轻:丙氨酸氨基转氨酶(ALT)在6 h(488.9 U/L±59.2 U/L)、10 h(670.0 U/L±73.4 U/L),较A组(651.6 U/L±65_3 U/L,930.0 U/L±62.9 U/L)低,P<0.05;天门冬氨酸氨基转移酶(AST)在6 h(11113.1 U/L±138.7 U/L)、10 h(1388.2 U/L±209.6 U/L),较A组(1315.0 U/L±111.0 U/L,1728.4 U/L±87_3 U/L)低,P<0.05:NF-κB的激活在术后2 h(0.78±0.04)和10 h(0.75±0.07)均低于A组(均为1),高于B组(0.68±0.09,0.66±0.04),P<0.05,6 h(0.71±0.07)低于A组(1),P<0.05,与B组(0.64±0.09)接近,P>0.05.结论:川芎嗪通过抑制NF-κB的激活,对创伤后肝组织产生保护作用,其保护作用接近于PDTC.

舌癌细胞系T-TFL的建立和生物学性状检测(英文)

背景:基因治疗已成为恶性肿瘤研究领域的热点和发展趋势,但舌癌基因治疗的研究报道极少。目的:构建含相关死亡结构域蛋白(FADD)及肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)基因功能结构域的融合基因TFL,稳定转染入人舌鳞状细胞癌细胞系(Tca-8113)中,检测建系细胞T-TFL的生物学性状,探讨一种更有利于舌癌患者治疗期及治疗后期内生活质量的治疗手段。设计:以诊断为依据,前瞻性研究。地点和对象:实验在第四军医大学口腔医学院口腔颌面外科完成,研究对象为人舌鳞状细胞癌细胞系(Tca-8113),上海第二医科大学口腔医学院建系。干预:反转录PCR获得人FADD及TNFR1基因cDNA,重组PCR法构建含二者功能结构域的融合基因TFL,通过阳离子脂质体法稳定转染TFL基因入Tca-8113细胞中。主要观察指标:Westernblot检测融合蛋白TNFR1/DED表达,通过形态学观察、生长曲线等检测T-TFL细胞的生物学性状。结果:获得了人FADD及TNFR1基因并构建成功融合基因TFL,转染入Tca-8113细胞后,能表达融合蛋白TNFR1/DED活性,且T-TFL细胞与亲本Tca-8113细胞的生物学性状无明显差异。结论:T-TFL细胞能表达融合蛋白TNFR1/DED活性,可以为进一步深入研究舌癌基因治疗提供实验基础。

前列腺癌体内实验模型的研究进展

前列腺癌是男性最为常见的恶性肿瘤之一。近年来有关前列腺癌的相关研究取得了较大突破,但由于缺少有效的体内实验模型,导致研究成果向临床应用的转化受到严重阻碍。人源性前列腺癌移植(patient derived prostate tumor xenograft,PDPTX)模型是将患者新鲜的肿瘤组织移植于免疫缺陷小鼠而建立的体内模型,该模型能较好地复制原发肿瘤的异质性,保持肿瘤在分子学、基因学和病理学的复杂性。特别是采用肾包膜移植建立PDPTX模型的方法较好地解决了传统皮下移植建模成功率低、低级别肿瘤成瘤难、无法实现移植瘤转移等缺点,为前列腺癌研究提供了更为理想的体内模型。尤其是在靶向治疗、新型药物筛选、个体化治疗等方面具有不可取代的优势。