芪丹通脉片对实验性急性心肌梗死大鼠心肌的保护作用及其分子机制

目的:探讨芪丹通脉片对实验性急性心肌梗死大鼠心肌的保护作用。方法:以健康SD大鼠作为研究对象,把动物随机分为空白对照组、模型组、低剂量组和高剂量组。采用冠状动脉接扎法复制急性心肌梗死动物模型,通过四氮唑蓝染色计算心肌梗死面积,免疫组化染色检测血管内皮生长因子表达。 结果:冠状动脉结扎30min后模型组心肌梗死面积明显高于两个用药组。随着结扎时间的延长,各组心肌梗死面积均增加,结所扎30,60min,1,2h时心肌梗死面积的差异均具有显著性意义(F=72.71,65.29,83.17,126.73;P<0.01)。实施冠状动脉结扎术30min,各组均检测到了血管内皮生长因子(VEGF),两个用药组VEGF阳性细胞数高于模型组;而在60min时,高剂量组VEGF阳性细胞数即达到平台,在随后的2h内含量波动不大;低剂量组在缺血60min后存在逐渐上升的趋势,模型组变化趋势与低剂量组类似。各个时间点VEGF阳性细胞数差异具有统计学意义(F=11.20,86.20,39.37,22.11;P<0.001)。 结论:芪丹通脉片能减轻急性缺血引起的心肌梗死(促进缺血心肌表达血管内皮生长因子),可能是重要的对抗机制。

芪丹通脉片对心肌缺血/再灌注大鼠白细胞介素-10的影响

目的观察益气活血复方芪丹通脉片对心肌缺血/再灌注大鼠血清白细胞介素-10(IL-10)含量的影响,探讨其心肌保护机制。方法采用结扎左冠状动脉前降支方法制备大鼠心肌缺血/再灌注模型。36只健康雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组、恬尔心组及芪丹通脉片高、中、低剂量组。缺血30 min,再灌注2 h,采全血,用ELISA法检测血清IL-10含量,用HE染色观察心肌病理形态学变化,并用透射电镜观察心肌组织超微结构变化。结果芪丹通脉片高、中、低剂量组均可增加血清IL-10含量,减少炎性细胞浸润,减轻心肌超微结构损伤,其中高剂量组明显优于低剂量组,且与恬尔心组无显著差异。结论益气活血复方芪丹通脉片可促进内源性IL-10大量释放,减少炎症反应,改善受损的心肌超微结构,发挥心肌保护作用。

生肌类中药的理论与实验研究

介绍近年来关于生肌中药的理论和实验研究现状。如直接及间接生肌、祛瘀生肌等理论及对偎脓长肉的新的解释,以及生肌中药的实验进展,重点讨论生肌中药对创面成纤维细胞,生长因子,Ⅰ,Ⅲ型胶原,纤维结合蛋白(FN)的作用;调节创面免疫功能,血液循环及其对创面微量元素、pH值的影响。

黄芪丹参复方制剂对大鼠心肌线粒体氧自由基损伤的保护作用

目的:观察黄芪丹参复方制剂(芪丹通脉片)对盐酸异丙肾上腺素所致急性心肌缺血的防治作用。方法:①实验于2001-06在解放军第四军医大学病理生理实验室完成。选用32只SD大鼠,雌雄不拘。芪丹通脉片提取浸膏干粉(由黄芪、丹参、当归、桂枝、红花组成,1g干粉相当于生药2.86g),由西京医院提供。②随机将大鼠分为4组:正常对照组、模型组、芪丹通脉片组、硫氮卓酮组,每组8只。正常对照组:予生理盐水3mL/kg,每日灌服2次,连续14d。第15天,皮下三四点注射生理盐水,24h后相同方法、剂量注射生理盐水1次。模型组:用同样方法灌服生理盐水3mL/kg。第15天,皮下三四点注射盐酸异丙肾上腺素(5mg/kg),24h后相同方法、剂量注射盐酸异丙肾上腺素1次。芪丹通脉片组:灌服用蒸馏水配成3mL/kg的芪丹通脉片溶液2g/kg,用与模型组同样方法注射盐酸异丙肾上腺素。硫氮卓酮组:灌服用蒸馏水配成3mL/kg的硫氮卓酮(浙江亚太制药厂出品)5mg/kg,用与模型组同样方法,注射盐酸异丙肾上腺素。③用差速离心法提取心肌线粒体,考马斯亮蓝法测定蛋白含量。按南京建成生物工程研究所提供试剂盒说明测定线粒体中丙二醛含量,超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力。按上海复星-长征医学有限公司所提供肌酸磷酸激酶试剂盒和上海长征-康仁医学有限公司所提供乳酸脱氢酶活性试剂盒提供的方法测定肌酸磷酸激酶和乳酸脱氢酶活性。④苏木精-伊红染色,光镜下观察心肌病理变化,将病理损伤分为4级,0级:肌纤维排列整齐,横纹清晰,胞核明显,无细胞肿胀;Ⅰ级:心肌出现散在的坏死,主要为凝固性坏死,局限于心内膜下;Ⅱ级:心肌坏死灶呈片状分布,灶间无连接,病变累及心壁全层;Ⅲ级:心肌广泛性坏死,灶间相互连接,病变累及心壁全层;Ⅳ级:遍及整个心脏的融合性损伤,包括梗死样的广泛性坏死,偶有急性动脉瘤或附壁血栓。⑤实验数据采用方差分析,组间采用最小显著差数法进行两两比较。病理组织结果进行Ridit检验。结果:大鼠32只均进入结果分析。①在光镜下可以观察到,正常对照组心肌细胞形态正常,无炎细胞浸润;模型组心肌有片状坏死灶;芪丹通脉片组及硫氮卓酮组主要出现散在性点状坏死。②芪丹通脉片组和硫氮卓酮组心肌线粒体丙二醛含量明显低于模型组(P<0.01),超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力明显高于模型组(P<0.01)。模型组心肌线粒体丙二醛含量明显高于正常对照组(P<0.01),超氧化物歧化酶活力明显低于正常对照组(P<0.01)。③芪丹通脉片组和正常对照组心肌组织肌酸激酶、乳酸脱氢酶含量明显高于模型组(P<0.01),血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶水平明显低于模型组(P<0.01)。④芪丹通脉片组与硫氮卓酮组心肌细胞病理损伤级别差异不明显,两组与模型组差异明显(P<0.05)。结论:芪丹通脉片可能是通过降低心肌线粒体中丙二醛含量,增加超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力,减轻氧自由基损伤,以达到保护心肌细胞的目的。

不同分离方法与培养条件下大鼠骨髓间充质干细胞生长增殖情况比较

目的:应用贴壁分离法和密度梯度离心法以不同培养条件观察纯化过程中对获得的骨髓间充质干细胞的影响,试图寻找获得高质量、高活性的骨髓间充质干细胞的培养条件。方法:实验于2005-09/2006-01在解放军第四军医大学实验动物中心实验部进行。①SPF级雄性Wistar大鼠18只,贴壁分离培养取12只,根据血清和培养基的不同分为4组:进口血清+DMEM组、进口血清+F12-DMEM组、国产血清+DMEM组、国产血清+F12-DMEM组,3只/组。密度梯度离心培养实验取剩余6只,以分离液的不同分为Ficoll分离液组、Percoll分离液组,3只/组。②骨髓取材:各组大鼠断颈处死后,无菌取双下肢,剔除股骨、胫骨周围肌肉组织,剪去骨干的两端,暴露骨髓腔,穿刺两侧骨端取出骨髓。③贴壁分离法:进口血清+DMEM组、进口血清+F12-DMEM组、国产血清+DMEM组、国产血清+F12-DMEM组大鼠分别采用相应的血清和培养基冲洗骨髓,制备单细胞悬液,接种于培养瓶中,5d后首次更换培养液,弃去未贴壁细胞,此后每3～4d换液1次。④密度梯度离心法:Ficoll分离液组选用的Ficoll分离液密度为1.077;Percoll分离液组将Percoll分离液与0.1mol/L磷酸盐缓冲液按9∶1比例混匀,密度为1.073。将两组大鼠骨髓置入离心管,离心弃上清,轻轻叠加到相同体积的各自对应分离液上,再次离心收集界面层白色混浊液,采用F12-DMEM培养液重悬细胞,按1×109L-1的密度接种于培养瓶中,培养条件与贴壁分离法相同。⑤指标检测:倒置显微镜下,每天观察贴壁分离、密度梯度离心不同培养条件下细胞的生长情况和活体形态特征。进行锥虫蓝排斥试验,蓝染细胞为死亡细胞,在3min内用计数板分别计数活细胞和死细胞,未被蓝染细胞所占细胞总数的百分比即为初步得到细胞活性的数据。两种分离方法均取生长良好的第3代细胞,以时间为横坐标,细胞数为纵坐标,绘制生长曲线。结果:18只大鼠均进入结果分析。①细胞形态观察结果:贴壁分离法:采用进口血清培养的两组细胞形态学上都表现为长梭形,细胞活性较高,且给予F12-DMEM培养基的细胞增殖较快,集落融合较早,传代所需时间短;采用国产血清培养的两组细胞中,给予F12-DMEM培养基可以获得梭形细胞,而给予DMEM培养基后则多为类圆形骨髓样细胞,仅见极少梭形细胞。密度梯度离心法:Ficoll分离液组和Percoll分离液组均可培养出梭形骨髓间充质干细胞,细胞活性均高,但集落融合、传代所需的时间均较贴壁分离法长。②细胞活性检测结果:贴壁分离法:进口血清+DMEM组、进口血清+F12-DMEM组、国产血清+DMEM组、国产血清+F12-DMEM组的活细胞率分别为98.3%,98.7%,97.1%,97.7%,组间比较差异无显著性意义(χ2=0.054～0.620,P均>0.05)。密度梯度离心法:Ficoll分离液组活细胞率与Percoll分离液组相似(96.9%,97.1%,t=1.066,P>0.05)。③第3代细胞生长曲线测定结果:不同培养条件下各组第3代细胞生长曲线基本相似,在培养1d时,细胞量稍有减少;4d后细胞数均迅速增长;8d进入平台期,细胞增殖减慢。结论:采用全骨髓贴壁分离法和密度梯度离心法,只要选择合适的培养条件均可获得骨髓间充质干细胞,但选用进口胎牛血清、F12-DMEM培养基效果较好。

芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠单个核细胞中细胞间黏附分子1及血管细胞黏附分子1mRNA表达的影响

目的:黏附分子的表达与动脉粥样硬化的发生发展有关。观察芪丹通脉片对实验性动脉粥样硬化大鼠外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1mRNA表达的影响。方法:模型构建、样品采集与分析分别于2003-03/06,2003-06/09在解放军第四军医大学实验动物中心、西京医院检验科分生实验中心完成。将健康雄性SD大鼠72只随机分为6组:模型组、空白对照组、阳性对照辛伐他汀组、芪丹通脉片低剂量组、芪丹通脉片中剂量组、芪丹通脉片高剂量组,每组12只。采用高脂饮食配合口服维生素D3建立大鼠动脉粥样硬化模型,各组动物灌胃给药。采用半定量反转录聚合酶链反应的方法检测各组动物外周血单个核细胞中细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1mRNA的表达,分析造模及各药物组细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1mRNA表达的变化。结果:72只大鼠均纳入实验结果分析。细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1基因的表达:模型组比空白对照组明显增加(1.37±0.08,1.40±0.06,P=0.000);辛伐他汀组及各中药组均明显低于模型组(P=0.000),且芪丹通脉片高剂量组的作用明显优于芪丹通脉片低剂量组(0.40±0.06,0.40±0.05;0.61±0.07,0.67±0.05,P=0.003,0.007)。结论:高脂饮食能使细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达明显增加,而芪丹通脉片各剂量组可以不同程度地下调血管壁内细胞间黏附分子1和血管细胞黏附分子1的表达。而且芪丹通脉片高剂量组的作用效果明显优于低剂量组。

芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠主动脉抗原CD40和胞间黏附分子1mRNA表达的影响

目的:探讨芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠主动脉抗原CD40、胞间黏附分子1的影响。方法:实验于2003-04/08在解放军第四军医大学实验动物中心、西京医院检验科分生实验中心完成。将72只SD雄性大鼠随机平均分为6个实验组:阴性对照组(n=12)给以普通饮食,模型组(n=12)给予高脂、高胆固醇饮食,其余4组在给予高脂、高胆固醇饮食建立动脉粥样硬化大鼠模型同时分为芪丹通脉片低剂量组[0.36g/(kg·d)]、中剂量组[1.08g/(kg·d)]、高剂量组[3.24g/(kg·d)]和阳性对照辛伐他汀组[4mg/(kg·d)]。14周后通过反转录多聚酶链反应,检测大鼠主动脉上CD40、胞间黏附分子1表达。结果:模型组表达CD40、胞间黏附分子1分别为1.730±0.022,1.55±0.17,均明显高于阴性对照组(0.390±0.012,0.43±0.09)(P<0.05);给予芪丹通脉片大鼠CD40、胞间黏附分子1表达显著降低,高浓度组(0.555±0.020,0.52±0.11)结果接近辛伐他汀组(0.400±0.016,0.46±0.12)。结论:动脉粥样硬化大鼠主动脉CD40、胞间黏附分子1表达增强,使用芪丹通脉片可降低CD40、胞间黏附分子1表达,且其低、中、高浓度组表达依次减少。

芪丹通脉片对大鼠血栓形成及血液粘度的影响

冠心病是临床上最常见的心脏病，也是危害人类健康和生命的主要心血管病之一，目前在我国的发病率、死亡率呈上升趋势，治疗费用是预防费用的数十倍到数百倍，极大地增加了个人和社会的经济负担。因此，研制防治冠心病的药物有着重要的临床意义和价值。实验研究已证实，纯中药制剂芪丹通脉片能改善心肌缺血，防治冠心病。为进一步研究芪丹通脉片的药理机制，本实验观察其对大鼠体外血栓形成、凝血时间和血液粘度的影响。

不同剂量腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠模型实验研究

目的探讨不同剂量腺嘌呤诱导肾阳虚不育大鼠模型的量效关系。方法将20只成年雄性SD大鼠随机分为4组:正常对照组,腺嘌呤低(每日100 mg/kg)、中(每日150 mg/kg)、高(每日200 mg/kg)剂量组,每组5只。用腺嘌呤给予大鼠灌胃30 d,诱导肾阳虚不育模型。观察大鼠体征、血清性激素水平、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、血清肌酐(serumcreatinine,SCr)及睾丸、肾脏的形态学变化。结果与正常对照组相比,腺嘌呤各剂量组睾酮(testosterone,T)、雌二醇(estradiol,E2)显著降低(P<0.05),卵泡刺激素(follicle sti mulating hormone,FSH)、促黄体激素(luteotrophic hormone,LH)水平无显著性变化(P>0.05),SCr、BUN水平显著升高(P<0.05)。腺嘌呤各剂量组大鼠睾丸均出现生精小管中生精细胞排列紊乱,细胞疏松,精曲小管之间的结缔组织增多,间质细胞数量明显减少,管腔内生殖上皮变薄,精子数目减少,大部分管腔中可见脱落的精子细胞;肾小管内有大量结晶物沉着,且有异物肉芽肿形成,占据整个管腔,肾小管上皮肿胀、坏死、脱落,肾小管显著扩张成囊状,皮质、髓质间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,可见纤维素样坏死。结论低剂量腺嘌呤可导致大鼠睾丸形态学改变,而且肾脏的损害程度较轻,可成功地诱导肾阳虚不育模型。

脾虚大鼠下丘脑垂体甲状腺轴功能的变化

目的 :研究脾虚状态时下丘脑 垂体 甲状腺轴调控功能的变化。方法 :成年SD大鼠 32只随机分为 4组 ,每组 8只 ,即正常组、脾虚组、治疗组、自复组。采用放射免疫分析法测定各组大鼠下丘脑、血清TRH ,垂体、血清TSH及血清T3、T4 、FT3、FT4 、γT3的含量。结果 :①脾虚组、自复组大鼠血清T3、T4 、FT3、FT4 以及下丘脑TRH、垂体TSH含量均较正常组、治疗组低 ,有极显著差异 (P <0 .0 1) ;血清TRH、TSH含量均较正常组、治疗组高 ,有极显著差异 (P <0 .0 1)。②治疗组大鼠上述指标与正常组无显著性差异。结论 :脾虚时下丘脑、垂体、甲状腺合成、分泌及调控功能低下 ,各级反馈不能使各层次激素水平恢复正常 ,部分反映了脾虚证的本质 ;健脾益气的四君子汤能修复下丘脑 垂体 甲状腺轴功能的损伤。

大鼠脾虚证与血清甲状腺激素及下丘脑、胸腺细胞核T_3受体关系

目的 :探讨脾虚证与血清甲状腺激素及下丘脑、胸腺细胞核T3受体的关系。方法 :成年SD大鼠 32只随机分为 4组 (每组 8只 ) :A组 (正常组 )、B组 (脾虚组 )、C组 (治疗组 )、D组 (自复组 )。采用放射配基分析法 ,测定各组大鼠血清T3、T4 、FT3、FT4 、γ T3及下丘脑、胸腺细胞核T3 受体的含量。结果 :B、D组大鼠血清T3、T4 、FT3、FT4 含量均较A、C组低 ,有显著差异 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ;各组间血清γ T3含量无显著性差异 ;B、D组下丘脑、胸腺细胞核T3 受体含量较A、C组低 ,有显著差异P <0 .0 1)。结论 :血清甲状腺激素及下丘脑、胸腺细胞核T3 受体的水平降低 ,可导致甲状腺激素生物效应低下 ,经由神经内分泌免疫调节环路 ,削弱免疫功能 。

脾虚证大鼠各脑区和血清亮氨酸-脑啡肽的变化

目的 :研究各脑区和血清亮氨酸 脑啡肽 (L EK)含量的变化。方法 :成年SD大鼠 32只随机分为 4组 ,每组 8只 ,即正常组、脾虚组、治疗组、自复组。采用放射免疫分析法 ,测定各组大鼠额叶皮质、下丘脑、垂体及血清L EK的含量。结果 :①脾虚组、自复组大鼠额叶皮质、下丘脑、垂体L EK含量均较正常组、治疗组高 ,有显著性差异 (P <0 .0 1) ;而血清L EK含量均较正常组、治疗组低 ,有显著性差异 (P <0 .0 1)。②大鼠额叶皮质L EK含量均较下丘脑、垂体L EK含量低 ,有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :L EK参与脾虚证的病理过程 ,四君子汤通过调节内源性阿片肽 ,发挥健脾益气作用。

降粘抗栓片Ⅰ号对犬血流动力学和血液流变学指标的影响

为研究复方中药制剂—降粘抗栓片Ⅰ号（ＪＮＫＳＴⅠ）对麻醉犬血流动力学和血液流变学指标的影响，结扎犬冠状动脉造成犬急性心肌缺血模型，经胃一次性灌胃给药，经犬心大静脉留取血样，测定不同实验时间点的血流动力学和血液流变学指标。结果发现，ＪＮＫＳＴⅠ可维持冠脉结扎后心功能趋势，能减少冠脉结扎后冠脉流量的下降程度（Ｐ＜０．０１）；能降低全血高切、低切粘度和血浆粘度，加快红细胞电泳（Ｐ＜０．０５０．０１）。结果提示。

四君子汤可促进脾虚大鼠甲状腺激素对胸腺的作用

目的:探讨脾虚时胸腺-神经内分泌网络的改变,进一步明确四君子汤的作用机制。方法:成年SD大鼠32只随机分为4组:正常组(A组)、脾虚组(B组)、治疗组(C组)、自复组(D组),每组8只。测定各组大鼠血清甲状腺激素水平、胸腺细胞核T3受体(T3R)的含量、胸腺质量/体质量比值、血清胸腺因子浓度及其胸腺细胞白细胞介素-2(IL-2)的活性。结果:①B、D组大鼠血清甲状腺激素水平、胸腺细胞核T3R含量、胸腺质量/体质量比值、血清胸腺因子浓度及其胸腺细胞IL-2的活性均较A、C组为低,差异有显著性(P<0.05或P<0.01);②C组大鼠的上述指标与A组无显著性差异。结论:四君子汤可增加脾虚大鼠血清甲状腺激素水平,又可增加脾虚大鼠胸腺细胞上T3R的结合容量,从而增强甲状腺激素对胸腺的促进作用,促使胸腺上皮细胞合成和分泌血清胸腺因子、IL-2,加强机体的免疫功能,对脾虚大鼠起双重调节作用。

化瘀补肾汤对再生障碍性贫血小鼠CFU-F及血清IL-2、IFNγ的影响

目的 :探讨化瘀补肾汤对再生障碍性贫血 (简称“再障”)小鼠骨髓微环境及血清造血负调控因子白细胞介素 2 (IL 2 )、γ干扰素 (IFNγ)的影响。方法 :复制免疫介导的再障小鼠模型 ,胃饲中药复方。第 1 1d ,观察骨髓切片组织形态学变化 ,测定骨髓基质细胞体外培养计数及IL 2、IFNγ水平。结果 :再障模型组骨髓增生极度低下 ,骨髓微环境明显受损 ,血清IL 2、IFNγ水平明显增高。而中药组骨髓增生好转 ,骨髓微环境损伤减轻 ,血清IL 2、IFNγ水平较再障组减低。结论 :化瘀补肾汤能促进再障小鼠骨髓微环境的修复 ,减少造血负调控因子的释放 ,从而促进造血功能恢复。

川芎嗪、黄芪合用对脑缺血再灌注后脑组织c-jun蛋白表达影响

目的 :探讨局灶性脑缺血再灌注后脑组织c jun蛋白的表达及川芎嗪、黄芪对其表达的影响。方法 :成年雄性SD大鼠 2 4只随机分成 4组。A组 :模型组 ,即脑缺血再灌注组 (n =6) ;B组 :川芎嗪治疗组 (n =6) ;C组 :黄芪治疗组 (n =6) ;D组 :川芎嗪、黄芪合用组 (n =6)。采用免疫组化与医学图像分析系统相结合的方法 ,测定 4组大鼠大脑皮层c jun蛋白阳性细胞平均灰度值。结果 :4组大鼠脑组织缺血侧c jun蛋白阳性细胞平均灰度均低于对侧 ,即非缺血侧 (P <0 .0 1) ;在缺血侧脑组织 ,B、C、D 3组分别与A组比较 ,c jun蛋白阳性细胞平均灰度均明显升高 (P<0 .0 1) ,D组与B、C组比较 ,c jun蛋白阳性细胞平均灰度明显升高 (P <0 .0 1)。结论 :局灶性脑缺血再灌注后脑组织c jun蛋白表达显著升高 ;川芎嗪、黄芪以及两药合用均可部分抑制c jun蛋白表达 ;两药合用比单用川芎嗪或黄芪降低c jun蛋白表达的作用更显著 ,这可能是临床使用益气活血法治疗缺血性脑卒中的机制之一。

芪丹通脉片对急性心肌缺血犬血清NO和血浆ET水平的影响

目的 :观察芪丹通脉片对急性心肌缺血犬血清一氧化氮 (NO)和血浆内皮素 (ET)水平的影响。方法 :结扎冠状动脉左前降支复制犬急性心肌缺血模型 ,经十二指肠灌入实验药物 ,经颈外静脉插管至冠状静脉窦 ,测定结扎冠状动脉用药前及用药后不同实验时间点的血清NO和血浆ET水平 ,实验结束后取缺血区心肌组织测定心肌组织NO和ET的含量。结果 :与对照组比较 ,芪丹通脉片能升高血清和心肌NO水平 ,降低血浆和心肌ET水平 ,在芪丹通脉片高剂量组用药 30min以后效果尤为明显 (P <0 .0 5 )。结论 :促进NO产生和抑制ET合成 ,是芪丹通脉片抗心肌缺血性损伤的机制之一。

黄芪对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的:探讨补气益血中药黄芪对脑缺血再灌注损伤后神经细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响。方法:实验于2004-06/11在第四军医大学西京医院中医科实验室进行。取36只SD大鼠随机分为3组,每组12只。①模型组:以生理盐水10mL/(kg·d)灌胃,1次/d,7d后线栓法制备大鼠局灶性脑缺血2h再灌注模型,6只在再灌注6h麻醉状态下处死取脑,免疫组织化学法与医学图像分析结合的方法检测Bcl-2蛋白的表达;剩余6只在再灌注24h麻醉状态下处死取脑,TUNEL法检测大鼠脑组织神经细胞凋亡。②黄芪组:以黄芪煎剂6g/(kg·d)灌胃7d,其余处理同模型组。③假手术组:不阻塞大脑中动脉,其余处理同模型组。结果:36只大鼠全部进入结果分析。①TUNEL阳性神经细胞数目:模型组高于假手术组[(49.9±9.8),(1.6±0.6)个/视野,t=12.05,P<0.01],黄芪组低于模型组[(30.2±2.1)个/视野,t=4.81,P<0.01]。②Bcl-2阳性细胞数目:模型组显著高于假手术组([12.5±1.2),(1.7±0.6)个/视野,t=19.71,P<0.01],黄芪组显著高于模型组([16.4±2.2)个/视野,t=3.17,P<0.01]。③Bcl-2蛋白平均灰度:模型组明显低于假手术组(182.8±13.6,205.9±11.5,t=3.18,P<0.01),黄芪组显著低于模型组(160.8±10.2,t=3.82,P<0.01)。结论:黄芪通过上调Bcl-2蛋白的表达可抑制缺血再灌注脑组织神经细胞凋亡,对脑缺血再灌注损伤有明显的神经保护作用。

芪丹通脉片对犬慢性心肌缺血预防作用及其机制

目的观察芪丹通脉片对犬慢性心肌缺血的预防作用,探讨其作用机制。方法将20只犬随机分为正常对照组,模型组,芪丹通脉片低、高剂量组,以注射异丙肾上腺素诱导心肌缺血模型;观察并比较各组犬心电图ST段变化(ΔST),及心肌血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、碱性成纤维生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)的表达水平。结果正常对照组未见ST段抬高及VEGF和bFGF表达;模型组可见ST段抬高及VEGF和bFGF表达;与模型组比较,芪丹通脉片低、高剂量组ΔST值显著降低(P<0.05),VEGF、bFGF表达水平显著升高(P<0.05);与芪丹通脉片低剂量组比较,芪丹通脉片高剂量组ΔST值有下降趋势,及VEGF、bFGF表达水平有升高趋势,但差异无显著性(P>0.05)。结论芪丹通脉片能够预防慢性心肌缺血,促进心肌VEGF、bFGF表达可能是其作用机制。