COX-2抑制剂联合顺铂对胰腺癌细胞增生和凋亡的影响

目的:探讨环氧化酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)抑制剂Celecoxib和顺铂联合应用对胰腺癌细胞增生、凋亡的影响. 方法:用Celecoxib和顺铂处理胰腺癌BxPC-3细胞后,用噻唑蓝(MTT)检测细胞的相对存活率,RT-PCR检测COX-2 mRNA的表达,流式细胞术和Hoechst-33 258染色检测其对BxPC-3的凋亡诱导作用. 结果:Celecoxih作用于BxPC-3细胞后,细胞的存活率呈剂量和时间依赖性,其中24 h的IC50值为100 nM, Celecoxib可明显降低BxPC-3细胞COX-2 mRNA的表达; Celecoxib和顺铂联合应用对胰腺癌细胞增生的抑制和凋亡的诱导作用更加明显,Hoechst-33 258染色可呈现凋亡的形态学改变. 结论:COX-2抑制剂和顺铂联合应用对抑制胰腺癌细胞增生和诱导细胞凋亡的高效性,表明其在临床上具有潜在的应用价值.

肝移植患者的焦虑、抑郁状态评估

目的:对肝移植患者术前及术后不同时间的焦虑、抑郁状态进行评估。方法:选择2002-03/2004-12在解放军兰州军区乌鲁木齐总医院普外科和解放军第四军医大学西京医院肝胆外科接受肝移植、并有完整的临床资料和术后随访资料的7例患者做为观察对象。应用焦虑自评量表和抑郁自评量表对患者术前1周和术后15d、1,2,6及12个月不同时间段的焦虑、抑郁状态进行评估。焦虑自评量表用于评定焦虑患者的主观感受,该量表有20个项目,主要的评定依据为项目所定义症状的出现频度,均按4级评分。抑郁自评量表用于衡量抑郁状态的轻重程度及其在治疗中的变化。由20个陈述句和相应问题条目组成。每一条目相当于一个有关症状,按1～4级评分。患者均在住院期间和出院后定期复查时自愿完成量表测评。评估标准:焦虑或抑郁分值>71分为重度焦虑或抑郁;56～70分为中度焦虑或抑郁;41～55分为轻度焦虑或抑郁;≤40分为无焦虑或抑郁。对不同时间点的焦虑或抑郁的平均分数的比较采用One-WayANOVA过程。结果:7例患者均完成全部测评进入结果分析。随访时间1年,随访率100%。在术前1周和术后15d、1,2,6及12个月,焦虑平均分数分别为:(45.57±5.94),(55.14±9.01),(68.14±7.52),(69.29±7.25),(57.43±4.76),(43.29±5.15)分;抑郁平均分数分别为:(41.14±6.69),(57.43±6.55),(63.14±5.49),(60.43±7.76),(55.86±4.88),(48.57±4.99)分。肝移植术后焦虑和抑郁逐渐增加,其中焦虑评分在术后2个月达最高,明显高于术前1周,差异具有显著性(t=-6.723,P<0.01);抑郁评分在术后1个月达最高,明显高于术前1周,差异具有显著性(t=-4.977,P<0.01)。而后两者均逐渐下降,到术后12个月焦虑评分较术前1周有所下降,但差异无显著性意义(t=0.769,P>0.05);抑郁评分仍明显高于术前1周,差异有显著性意义(t=-2.353,P<0.05)。结论:肝移植患者在术后1,2个月内焦虑和抑郁症状最为明显,应加强此期间内的心理干预,促进患者的康复,提高患者的生活质量。

COX-2抑制剂联合survivin反义寡核苷酸抗胰腺癌BxPC-3细胞的效应

目的:探讨COX-2抑制剂和survivin反义寡核苷酸联合应用对胰腺癌BxPC-3细胞的抗肿瘤效应及其可能机制.方法:应用胰腺癌BxPC-3细胞进行研究,将BxPC-3细胞分为4组:A组(对照组),B组(Celecoxib 80μmol/L)组,C组(300 nmol/L survivin ASODN),D组(80μmol/L celecoxib+300 nmol/L survivin ASODN).采用MTT检测细胞增殖.流式细胞仪检测细胞凋亡率,caspase-3试剂盒检测caspase-3活性,并用RT-PCR检测Bcl-2、survivin和Mcl-1的mRNA国的变化.结果:将80μmol/L celecoxib和300 nmol/L survivin反义寡核苷酸单独或联合作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h和48h,D组细胞的存活率明显低于B,C组(24h:41.0%±0.4% vs 71.0%±2.2%,63.3%±4.5%;48h:34.2%±1.1% vs 61.6%±1.7%,55.0%±3%;P<0.01).作用24h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率显示,D组细胞的凋亡率明显高于B,C组(30.33%±3.49% vs 11.93%±1.17%,22.07%±0.93%;P<0.01).caspase-3活性在B,C,D组明显高于对照组(0.04867±0.0021,0.02967±0.0021,0.08767±0.0042 vs 0.007±0.0001;P<0.01),D组细胞的caspase-3活性明显高于B,C组(0.08767±0.0042 vs 0.04867±0.0021,0.02967±0.0021;P<0.01).用100μmol/L塞来昔布作用于胰腺癌BxPC-3细胞24h后,survivin/β-actin和Mcl-1/β-actin的mRNA的比值明显低于对照组(0.68±0.05 vs 1.05±0.06,P<0.01),而Bcl-2/β-actin的mRNA的比值无明显变化(0.99±0.02 vs 1.07±0.06,P>0.05).结论:联合应用COX-2抑制剂塞来昔布和survivin反义寡核苷酸可明显诱导胰腺癌细胞的凋亡,抑制细胞增殖,并能够明显提高caspase-3活性.COX-2抑制剂塞来昔布诱导细胞凋亡可能通过survivin和Mcl-1途径,而非Bcl-2途径.

COX-2在胰腺癌组织中的表达及其与p53的相关性研究

目的:探讨环氧化酶-2(COX-2)和p53在胰腺癌组织中的表达与生物学行为之间的关系并探讨二者的相关性及可能机制.方法:用免疫组织化学Envision法对51例胰腺导管癌和11例癌旁非肿瘤胰腺组织的COX-2和p53的表达进行检测.结果:51例胰腺导管癌中COX-2和p53蛋白的表达率分别为74.5%和60.8%;二者在11例癌旁非肿瘤胰腺组织中均未发现阳性表达.COX-2的表达与临床分期和淋巴结转移有关(P=0.022,0.036),而与组织学分级关系不大(P=0.152);p53的表达与淋巴结转移有关(P=0.035),而与组织学分级、临床分期关系不大(P=0.131,0.078);COX-2的表达与p53的表达密切相关(r=0.452,P=0.001).二者的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、部位均无关.结论:COX-2和p53的协同作用可能在胰腺癌的发生发展过程中起重要作用,可能为胰腺癌的治疗提供了新的靶点.

半乳糖基化壳聚糖肝靶向性基因转导的体内实验

目的:研究半乳糖基化壳聚糖(Galactosylated chitosan, GC)在狗体内的肝靶向性作用. 方法:GC与质粒pEGFP-N1混和制备成纳米微囊复合物,体外转染SMMC-7721细胞.杂种狗术前1 d静脉注射氯化钆(14 mg/kg)以清除Kupffer细胞.将含1 mg质粒的纳米微囊经肝动脉和门静脉注射入动物体内.48 h 后取主要脏器组织做冰冻切片,在荧光显微镜下观察绿荧光蛋白表达情况.以裸质粒作为对照. 结果:7721细胞中有绿荧光蛋白的表达,体内实验GC组肝组织中有绿荧光蛋白表达,其他脏器组织中仅有微量表达. 结论:半乳糖基化壳聚糖在体外有较高的转染率,在大动物体内有肝靶向性作用,肝动脉、门静脉联合给药是基因治疗的一种有效途径.

创伤应激与肝细胞凋亡

创伤会使机体产生应激,在多种因素作用下,可能促使细胞凋亡导致病理损伤,创伤应激致细胞凋亡的机制复杂,仍有很多存在争议的问题,尤其是对那些非神经系统器官而言.临床上很多肝脏疾病均受应激因素的影响,导致肝细胞凋亡而产生肝损伤.目前应激损害研究主要集中在应激对心理造成的损害,而对肝、脑、肺、肾等实质脏器的损害研究不多,机制尚不明确.肝脏是人体新陈代谢的总枢纽,是严重应激损伤的核心靶器官,受创伤应激后的应激性高血糖、钙超载、氧化应激、缺血再灌注、炎性损伤和免疫抑制等因素影响,可发生肝细胞凋亡等病理性损害,故研究创伤应激与肝细胞凋亡的内在联系具有重要意义.

肝细胞肝癌UPAR和VEGF表达与浸润转移的关系

目的:探讨尿型纤溶酶受体(UPAR)和血管内皮生长因子(VEGF)在肝细胞肝癌(HCC)的表达与其病理学特性和肿瘤浸润转移的关系。 方法:采用抗受体抗体SABC免疫组织化学染色检测79例肝细胞肝癌标本中UPAR表达,以常规SABC免疫组化方法检测VEGF的表达。 结果:在79例HCC中,UPAR的表达阳性率为51.9％(41/79),VEGF的表达阳性率为46.8％(37/79),二者表达与肝癌大小、分化程度无关,但与肿瘤的转移显著相关。 结论:UPAR和VEGF的表达可作为HCC的侵袭表型,可作为估计预后的指标,肝细胞肝癌中VEGF的表达与UPAR表达具有较高的相关性。

小分子干扰RNA介导的RhoA沉默优化胎肝干细胞培养

背景:细胞移植治疗是目前的研究热点之一,寻找良好的细胞来源并有效扩增,是大量临床应用的基础。目的:通过沉默RhoA基因优化胎肝干细胞培养方法。方法:体外培养胎肝干细胞,经小分子干扰RNA转染以沉默RhoA基因表达,分为3组:A组为干细胞组,B组为经随机打乱顺序的小分子干扰RNA转染干细胞组,C组为经小分子干扰RNA转染的干细胞组。应用反转录-聚合酶链反应、Western blot法检测胎肝干细胞在转染前后RhoA基因和蛋白的表达;四甲基偶氮唑蓝比色法观察细胞生长的优化作用;流式细胞术测定细胞周期分布的变化。结果与结论:转染小分子干扰RNA后C组与A、B组相比,RhoA基因和蛋白表达量明显降低(P<0.05),细胞的生长速度明显增快,细胞周期G0/G1期减少,S期细胞数增多,各组间差异有显著性意义(P<0.05)。提示通过沉默RhoA基因的方法可以促进胎肝干细胞增殖,对其培养有优化作用。

MUC1基因免疫抑制H22肝癌生长的实验研究

目的:观察MUC1基因免疫对H22肝癌生长的特异性抑制作用。方法:采用股四头肌肌肉注射法将构建的MUCl基因疫苗pcDNA3.1-MUC1免疫 Balb/c小鼠,每次 100μg,3 wk/次,共3次,最后一次基因免疫后 3wk,接种表达MUC1的H22肝癌细胞。2 wk后观察、记录肿瘤的生长情况。于肿瘤细胞接种后43 d,处死全部动物,称肿瘤的质量。荷瘤小鼠的瘤组织常规HE染色。结果:肿瘤细胞接种后43d,MUC1预防组,质粒pcDNA3.1对照组及生理盐水阴性对照组H22肝癌大小分别为547±59mm^3,1185±84mm^3和1220±95 mm^3(P<0.01);平均瘤质量分别为 1.87 ± 0.96 g,4.19 ±1.34 g和4.23±1.32 g(P<0.01);pcDNA3.1对照组和生理盐水阴性对照组100％可见瘤体形成,肿瘤生长,而MUC1基因疫苗预防组仅见50％(5/10)的小鼠有瘤体形成,与对照组相比,MUC1预防组H22肝癌生长受到明显抑制(P<0.01);MUC1预防组小鼠免疫保护有显著差异(P<0.05).病理学检查结果显示,与pcDNA3.1对照组相比,MUC1 DNA疫苗预防组鼠H22肝癌组织大量坏死。结论:MUC1基因免疫显著抑制H22肝癌生长。

人外周血内皮祖细胞的培养与鉴定

目的:探讨人外周血内皮祖细胞体外诱导分化及鉴定的方法,为自体外周血内皮祖细胞移植的临床应用打基础。方法:实验于2004-09/2005-05在解放军第四军医大学西京医院肝胆外科实验室完成。采集献血员抗凝外周血,经Ficoll密度梯度离心法获取单个核细胞,在含有体积分数为0.1胎牛血清、20μg/L的血管内皮细胞生长因子和4μg/L的碱性成纤维细胞生长因子的M199培养液中培养和扩增,分别在培养的第6和14天,流式细胞仪检测其KDR,CD133,CD34和vWF阳性率,并通过检测其对异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素的吸附和内吞DiI-acLDL来进行细胞功能学的鉴定。结果:①人外周血单个核细胞经体外诱导分化,培养第6天的贴壁细胞表达KDR,CD133,CD34和vWF,流式细胞仪检测其阳性率分别为(46.4±9.3)%、(33.8±11.7)%、(73.5±6.3)%和(38.9±8.2)%,能特异性吸附异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素并内吞DiI-acLDL。②培养第14天的贴壁细胞表达KDR,CD34和vWF,不表达CD133,流式细胞仪检测其阳性率分别为(81.5±7.6)%、(88.9±5.4)%和(78.3±13.6)%,能特异性吸附异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素并内吞DiI-acLDL。结论:外周血来源的单个核细胞在一定的培养条件下可以分化为内皮祖细胞,为自体外周血内皮祖细胞移植的临床应用打下基础。

罗丹明123分离肝癌细胞系HepG2异质性亚群的鉴定

目的:建立分离肝癌细胞系HepG2中对罗丹明123(Rho123)染料具有不同排斥能力细胞亚群的方法,并探讨其在肝癌异质性研究中的意义.方法:利用流式细胞分选术(FCM)并结合不同浓度的Rho123染料,分析和分选肝癌细胞系HepG2细胞中具有不同染料排斥能力的肝癌细胞亚群,再通过细胞生长的测定、软琼脂克隆形成以及免疫组织化学检测和裸鼠成瘤实验等方法,以比较不同肝癌细胞亚群的差异.结果:根据不同染料排斥能力可以将肝癌细胞系HeDG2细胞分为Rho^(low)和Rho^(high)2个亚群,2个亚群在倍增时间(16.9 h vs 24.7 h)、最大增生倍数(15.2 vs 12.3)、克隆形成率(50% vs 20%)以及甲胎蛋白(AFP)的表达(31/32 vs 20/26)以及裸鼠成瘤实验(7/10 vs 1/10)上具有显著性差异(均P<0.01),Rho^(low)亚群是具有干细胞特性的.结论:Rho123结合FCM可以富集具有干细胞特性的Rho^(low)亚群,同时进一步证实肝癌的异质性.

抑制gankyrin的表达对肝癌细胞系HepG2增殖的影响

目的:探索通过RNA干涉技术抑制gankyrin的表达对肝癌细胞系HepG2增殖及细胞周期的影响.方法:建立稳定表达靶向gankyrin的shRNA的HepG2细胞系.通过Westernblotting验证基因表达的抑制效果.采用细胞计数及MTT法检测细胞的增殖能力.流式细胞仪分析细胞周期.结果:抑制gankyrin基因的表达显著抑制了HepG2细胞的生长,与转染阴性对照shRNA质粒细胞相比,细胞计数示细胞数目明显减低(d6:24.4×103±5.2×103vs123.3×103±2.8×103,P<0.05),MTT分析显示细胞增殖率明显下降(144h:7.53±0.50vs16.30±0.38,P<0.05),流式细胞分析示细胞周期阻滞在G1期(G1:71.63±3.60%vs52.57±2.82%,P<0.05).结论:在HepG2细胞中抑制gankyrin的表达可有效抑制细胞生长并导致细胞周期的阻滞.利用RNA干涉技术抑制gankyrin的表达可能会成为一种有效的肝癌基因治疗手段.

端粒酶逆转录酶基因hTERT在肝细胞癌中的表达及端粒酶反义基因对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡的影响

目的:研究肝细胞癌(HCC)中端粒酶逆转录酶基因hTERT表达,探讨其在HCC发生、发展及预后复发中的意义.探讨抗端粒酶在肝细胞癌治疗中的意义.方法:采用免疫组化法检测42例HCC组织中hTERT的表达,并对hTERT与临床病理特征的关系进行分析.将反义hTR真核表达载体经脂质体介导转染人肝癌细胞系HepG2,体外培养及接种裸鼠观察其基因转染细胞的细胞周期、超微结构变化及致瘤性.结果:HCC中hTERT基因阳性率分别为71.4%(30/42);hTERT与在正常肝脏组织中阳性表达率0%相比,有显著性差异(P<0.01).hTERT在Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ级HCC中的表达率分别为40.0%(4/10),70.0%(14/20),100%(12/12).Ⅰ与Ⅲ级、Ⅱ与Ⅲ级比较差异显著(P<0.05).hTERT阳性表达率与患者复发有显著相关性(P<0.05).形态学观察,转染后HepG2细胞出现典型的凋亡现象.FCM检测发现G1期前出现凋亡峰.在裸鼠皮下的致瘤性明显降低.荷瘤鼠存活时间延长.结论:hTERT表达异常可能与肝脏肿瘤的发生、发展有关.检测hTERT表达可作为预测肝脏肿瘤预后复发的潜在指标.提示HCC是由多基因参与的疾病.转染端粒酶反义RNA能抑制肝癌HepG2细胞的恶性表型,促进其凋亡.

塞莱西布体外对人类肝胃癌细胞生长的抑制作用

目的:研究塞莱西布在体外对人类肝癌7721细胞以及胃癌7901细胞的生长抑制作用. 方法:两种肿瘤细胞用含不同浓度(0,20,40,80,160 和320 μmol/L)的塞莱西布的培养液培养.应用MTT测定法来测定生长抑制率,电镜技术来观察细胞凋亡情况,免疫组化技术来检测细胞内Cox-2蛋白含量. 结果:塞莱西布对两种肿瘤细胞均具有生长抑制作用(塞莱西布320μmol/L时两种肿瘤细胞抑制率分别为49.1%和42.9%), 并呈现量-效关系.电镜下可观察到凋亡细胞.免疫组化发现细胞内环氧化酶的含量在处理前后有明显变化. 结论:在体外,塞莱西布抑制人类肝癌及胃癌细胞生长, 诱导他们产生凋亡,并且该作用与细胞内环氧化酶含量有密切关系.

创伤性胆道出血17例

1 材料和方法 1.1 材料 我院曾收治创伤性胆道出血患者17例,男14例,女3例,年龄18岁～65岁,平均42.3岁。胆道出血的原因有:外伤性肝破裂8例,经皮肝穿刺造影(PTC)及(或)经皮肝穿刺插管引流(PTCD)5例,胆总管探查T管引流术后3例,诊断性肝穿刺活检1例。临床主要表现有黑便15例,呕血6例,胆绞痛11例,黄疸8例,所有患者根据病史、体征、内镜、选择性腹腔动脉造影、B超、CT或T管逆行胆道造影检查证实。 1.2 方法 根据胆道出血的原因、临床表现及患者全身状况等选择治疗方法,8例经T管或PTCD引流管反复交替注射凝血酶和去甲肾上腺素,7例行经皮选择性肝动脉栓塞治疗,3例行肝叶切除术,1例行肝动脉结扎术。

腹腔镜辅助毕Ⅱ式与Roux-en-Y消化道重建的临床疗效分析

目的：探究腹腔镜辅助毕Ⅱ式对比Roux-en-Y远端胃癌根治术后消化道重建临床疗效。方法 ：纳入2014年1月—2015年6月确诊为远端胃癌的186例患者,随机分为RY组、毕Ⅱ组各93例。对两组患者临床指标、并发症进行比较,并绘制生存曲线图比较两种术式消化道重建后患者的总生存期。结果：腹腔镜辅助下毕II式消化道重建术在手术时间（t=4.711,P=0.001）、术中出血量（t=8.18,P〈0.001）方面优于RY组,但在淋巴结清除数目（t=0.428,P=0.674）,术后排气时间（t=1.874,P=0.079）,住院时间（t=1.538,P=0.144）及免疫学指标方面两者差异无统计学意义（P〉0.05）。通过对术后并发症的分析发现,毕Ⅱ式较Roux-en-Y式可明显降低患者的肺部感染率（χ~2=2.581,P=0.01）,但术后切口感染（χ~2=0.58,P=0.56）方面两者差异无统计学意义。术后随访1年,在肠梗阻（χ~2=1.55,P=0.12）、吻合口瘘（χ~2=1.356,P=0.175）及胃无力（χ~2=0.384,P=0.701）等的发生率方面,两组患者差异无统计学意义（P〉0.05）。绘制生存曲线图进行比较,两组患者的总生存期差异无统计学意义（χ~2=0.320,P=0.572）。结论：腹腔镜辅助下毕Ⅱ式消化道重建术与Roux-en-Y相比,具有手术时间短、术中出血量少、术后肺部感染率低等优点,但不能明显降低患者远期并发症、改善患者的免疫功能及总生存期。还需进一步多中心、大样本的随机对照试验验证。

胰腺癌与癌基因及抑癌基因

癌临床起病隐匿,恶性程度高,早期诊断困难,出现临床症状时多属晚期.近年来尽管手术方法及辅助治疗得到改进和提高,但预后仍较差.随着现代分子生物学技术的发展,对胰腺癌的发生、侵袭和转移机制的研究已进入基因水平胰腺癌的发生和其他恶性肿瘤一样是由多基因异常改变的结果,尤其是癌基因的激活和抑癌基因的失活,现就近年来与胰腺癌发生、发展密切相关的癌基因和抑癌基因做一回顾.

建立猪血管内皮细胞对人血清适应的模型及其评估

目的:观察人免疫球蛋白G、免疫球蛋白M和正常人AB型血清诱导猪血管内皮细胞适应状态的效果。方法:实验于2002-05/2003-02在解放军第四军医大学分子生物学实验室完成。①正常人AB型血清和猪血清制备:取健康AB血型成年人血,每次50mL,置于干燥管内,垂直静置6h,3000r/min离心10min,取上清。操作4℃条件下进行,以保证补体的活性。获得血清于-20℃保存备用,用前0.22μm滤膜过滤除菌。猪血清制备同上。②猪血管内皮细胞培养、纯化及鉴定:取体质量3kg实验用乳猪,自左侧髂总动脉向心侧插入大隐静脉导管20cm,注射肝素500U后持续滴注含肝素抗生素盐水(肝素1×105U/L,青霉素4×107U/L),取腹主动脉和胸主动脉,以4℃含肝素抗生素盐水冲洗管腔和外膜后注入37℃预热的10g/LⅠ型胶原酶,消化5min后收集消化液,以1000r/min离心5min,收集细胞放于CO2孵箱内培养并传代,第3代以后不再使用抗生素。在光学显微镜下观察细胞生长形态,进行培养细胞类型的鉴定。③正常人血清对猪血管内皮细胞溶解试验:将猪血管内皮细胞制成浓度5×106L-1的细胞悬液,接种于96孔培养板,每孔200μL,培养至第4天细胞基本铺满培养板底部后加入含正常人AB型血清的培养液,终浓度分别为5%、10%、25%、40%,以相应浓度猪血清为对照,每组各取3孔。放入37℃孵箱内孵育2h后以四唑盐比色试验测各孔的吸光度值。④猪血管内皮细胞对人血清适应模型的建立及评估:培养猪血管内皮细胞,分别以免疫球蛋白G、免疫球蛋白M和低浓度正常人AB型血清诱导猪血管内皮细胞6d,以四唑盐比色法检测细胞存活率,并以免疫组化方法检测其血红素氧合酶1表达的情况。结果:①接种细胞形态呈圆形、三角形或短梭形,胞体丰满、胞浆均匀、核仁清晰。部分细胞呈团块样,大部分细胞为单细胞分布,其间混杂有少许血细胞,说明培养细胞为血管内皮细胞,无明显杂细胞污染。②在25%的正常人AB型血清作用下,猪血管内皮细胞的存活率为(71±22)%。与对照组相比较,100mg/L免疫球蛋白M和5%、10%正常人AB型血清诱导猪血管内皮细胞存活率分别为(81±31)%,(93±25)%,(90±42)%。③诱导后猪血管内皮细胞胞浆内血红素氧合酶1的表达明显增加。结论:100mg/L免疫球蛋白M和正常人AB型血清能够诱导猪血管内皮细胞的适应,后者效果更为明显。

微粒子酶免法检测全血普乐可复浓度及其临床应用

目的 评价微粒子酶免 (MEIA)法检测全血普乐可复浓度的准确性及其在器官移植术后抗排异治疗中的应用。方法 以MEIA法检测 6例心脏移植、2例肝脏移植、2例小肠移植和 7例肾脏移植患者不同时期全血中普乐可复的谷浓度 ,并结合临床情况调整普乐可复的用药剂量。以MEIA法测定高、中、低 3种标准普乐可复全血样品 ,求算MEIA方法学的回收率 ,分析MEIA的准确性及其对临床普乐可复用药的指导作用。结果 在临床 6 83个血样的 472次检测中 ,质控血样检测结果均在控制范围内 ,质控的平均RSD为 (7.7± 2 .0 ) % ,方法回收率为 (96 .4± 7.4) % ,分析过程可在 1h内完成。结论 MEIA法具有快速、简便、专一性强和灵敏度高的特点 ,是一种较理想的普乐可复血药浓度常规检测方法 。

乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒的制备及体外释药性

背景:医用纳米粒作为药物传递的新型载体,目前已经成为医药领域研究的重点。目的:构建以生物可降解材料乳酸-羟基乙酸共聚物为载体,负载抗肿瘤药物5-氟尿嘧啶的载药纳米粒。方法:利用复乳-溶剂挥发法制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒。场发射扫描电子显微镜观察纳米粒表面形态;激光粒度分析仪测定粒径分布并计算成球率;紫外分光光度计测定5-氟尿嘧啶载药量、包封率,并对体外释药进行评估。结果与结论:纳米粒呈球性,平均粒径为(186±14)nm,成球率、载药量和包封率分别为70.8%、6.6%、28.1%,体外释药有突释现象,24h内5-氟尿嘧啶累积释药量达36.2%,10d达83.6%。提示成功制备乳酸-羟基乙酸共聚物载药纳米粒,其具有缓释效应。