富含半胱氨酸蛋白61对人肾小管上皮细胞增殖与细胞周期的影响

目的观察富含半胱氨酸蛋白61（Cyr61）蛋白对人肾小管上皮细胞（HK-2）增殖与细胞周期的影响。方法细胞被分为空白对照、阴性对照和Cyr61转染组。克隆Cyr61cDNA，构建pEGFP-N2-Cyr61重组质粒，利用脂质体分别将重组质粒与pEGFP—N2空质粒瞬时转染HK-2。四唑盐比色实验（MTT）检测细胞增殖；流式细胞分析术检测转染效率和细胞凋亡率；Western印迹法检测Cyr61蛋白、磷酸化黏着斑激酶（p-FAK）、细胞周期蛋白依赖性激酶2（CDK2）的表达。结果pEGFP-N2-Cyr61重组质粒可高效转染HK-2细胞。与空白对照、阴性对照组相比，Cyr61转染组细胞和培养液中的Cyr61蛋白表达量显著提高，细胞增殖活力明显增强，细胞中G1时相的比例显著减少，s时相显著增加，细胞凋亡率下降（均P〈0．01）。Cyr61转染组细胞中P—FAK、CDK2表达量亦显著提高（P〈0．01）。结论高表达的Cyr61蛋白可通过FAK途径促进CDK2表达，从而促进HK-2细胞进入S期，促进细胞增殖，抑制细胞凋亡。