甘西鼠尾草总酚酸提取物对电离辐射血管内皮细胞损伤的保护作用及机制研究

目的研究甘西鼠尾草总酚酸提取物(SPE)对电离辐射血管内皮细胞损伤的保护作用,探讨其抗电离辐射作用机制。方法人脐静脉内皮细胞(HUVEC)分别给予10000、1000、500、250、125、62.5、30、15、5、1μg/ml SPE溶液处理24 h;HUVEC细胞暴露于10 Gy;Coγ射线照射后培养30 h,分别给予125、250、500μg/ml SPE溶液处理24h;HUVEC暴露于10 Gy;Coγ射线照射后培养1 h,加入100μl组织细胞淋巴瘤细胞(U937细胞)溶液,1 h后除去未黏附的细胞,分别给予125、250、500μg/ml SPE溶液处理3 h。采用MTS法检测以上溶液细胞活力变化。HUVEC暴露于10 Gy;Coγ射线照射后培养6 h,分别给予125、250、500μg/ml SPE溶液处理3 h后,测定活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)含量,继续培养6 h后,采用Western印迹检测Bcl-2、Bax、THBD、γH2AX、ICAM-1、VCAM-1等蛋白表达。结果HUVEC可耐受1000μg/ml以下的SPE溶液。对10000μg/ml SPE溶液,其细胞活力下降极显著(P<0.0001)。与辐射模型组相比,250和500μg/ml SPE剂量组的辐射HUVEC活力显著升高(P<0.01)、与U937细胞间黏附比例显著降低(P<0.01);SPE各组的ROS、MDA水平显著降低(P<0.01),SOD、GSH水平显著升高(P<0.01),且效应强度与剂量均呈正相关。SPE各组Bcl-2、THBD蛋白表达显著升高,Bax、γH2AX、ICAM-1及VCAM-1蛋白表达显著降低。结论SPE可通过调节凋亡及细胞周期相关蛋白,增强血管内皮细胞抗凋亡能力和细胞活力,通过抑制单核细胞黏附、降低脂质过氧化、减轻血管内皮细胞氧化应激及炎症损伤等机制,对电离辐射血管内皮细胞损伤具有保护作用。