PSME2和STAT3双重抑制通过合成致死效应诱导食管鳞癌细胞死亡

蛋白酶体激活物复合物亚基2(proteasome activator complex subunit 2,PSME2)表达异常与多种肿瘤发生发展密切相关,但在食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中功能及临床意义尚不明确。本研究分析了TCGA-ESCC和GSE53625数据库中ESCC转录物组数据,发现PSME2高表达组ESCC患者预后不良,且ESCC组织中PSME2蛋白表达水平高于癌旁组织。沉默KYSE30细胞和NE6-T细胞中PSME2表达,ESCC细胞的增殖、侵袭、迁移和克隆能力均显著下降,同时伴随着LC3-II/LC3-I蛋白表达明显升高、p62蛋白表达降低和自噬激活。GSEA富集分析表明,PSME2低表达组IL-6/STAT3信号通路激活,沉默KYSE30细胞和NE6-T细胞诱导了IL-6分泌和p-STAT3表达增加。上述PSME2沉默诱导的分子变化,能够被LMT28或WP1066逆转。PSME2沉默联合WP1066,使KYSE30与NE6-T细胞培养上清中LDH含量明显升高,Calcein/PI染色表明,死亡细胞率分别为36.69%和32.55%,显著高于PSME2沉默(6.78%和6.74%)或WP1066单独处理组(18.34%和9.70%)。本研究表明,PSME2促进ESCC恶性进展,PSME2沉默通过IL-6/STAT3信号通路代偿性激活ESCC自噬,联合PSME2沉默和STAT3抑制通过合成致死效应诱导食管鳞癌细胞死亡,表明PSME2是ESCC潜在分子治疗靶点,联合抑制PSME2和STAT3是ESCC治疗的新选择。

食管鳞癌多药耐药细胞建立及干性和上皮间质转化表型鉴定

目的建立人食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)多药耐药细胞株,探讨ESCC化疗耐药的分子机制。方法采用间歇性反复冲击法筛选建立对紫杉醇(paclitaxel,PTX)、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)和顺铂(cisplatin,CDDP)、阿霉素(doxorubicin,DOX)和长春新碱(vincristine,VCR)等药物具有抗性的多药耐药细胞株EC9706/PDFC,测定EC9706/PDFC耐药指数(resistance index,RI)、增殖和侵袭能力、细胞周期、干性、上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)等表型变化,分析ABCB1、ABCC1、ABCC2和ABCG2在EC9706/PDFC、EC9706/CDDP和EC9706/PTX中的mRNA表达。结果EC9706/PDFC对PTX、5-Fu、CDDP、DOX、VCR等药物的RI分别为25.8、16.85、15.2、16.85和7.27。与亲本细胞EC9706相比,EC9706/PDFC细胞呈多形性、排列松散,增殖减慢,S期细胞数明显减少,侵袭和干性成球能力增加,干性和EMT相关分子表达异常。ABCB1和ABCC1在3种不同的耐药细胞中表达升高,而ABCG2表达却降低,ABCC2升高不明显。结论ESCC多药耐药细胞获得了CSC和EMT表型,为ESCC多药耐药临床评估和耐药逆转提供了细胞模型和潜在靶向分子。

食管鳞癌中差异表达的N-连接糖蛋白鉴定

目的应用二维电泳和质谱技术鉴定食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)中差异表达的N-连接糖蛋白。方法采用串联植物凝集素亲合层析法分离纯化ESCC与癌旁食管黏膜组织中高甘露糖型和唾液酸型N-连接糖蛋白,二维电泳、串联质谱鉴定差异表达的蛋白质分子;Western blot验证候选蛋白质分子在ESCC中的差异表达。结果鉴定了22种高甘露糖型和23种唾液酸型差异表达的N-连接糖蛋白,Western blot证实在ESCC中补体C3(completment C3)高表达、触珠蛋白(haptoglobin,HP)和聚集素低表达。结论ESCC中存在N-连接糖蛋白变异,异常糖基化的HP、聚集素和补体C3及相应的糖链变异是ESCC潜在的生物标志物。

牙龈卟啉单胞菌促进模型鼠口腔鳞癌发展

目的探讨口腔牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)感染在4-硝基喹啉-1-氧化物(4-nitroquinoline 1-oxide,4-NQO)诱导C57BL/6鼠口腔鳞癌发生发展过程中的促进作用。方法24只C57BL/6鼠随机分为对照组、P.gingivalis牙周炎组、4-NQO组和4-NQO联合P.gingivalis牙周炎组,每组6只。通过饮水喂饲各组鼠抗生素2周后,4-NQO组和联合组鼠给予4-NQO(50μg·mL-1)处理8周,鼠口腔上颌第二磨牙丝线结扎,每周2次P.gingivalis口腔涂抹感染至实验结束。结果第30周,4-NQO组和4-NQO联合P.gingivalis组鼠舌黏膜异常,肉眼观为乳头状或菜花样增生;镜下为4-NQO组出现不典型增生,4-NQO联合P.gingivalis组出现癌变。与4-NQO单纯处理组比较,联合P.gingivalis感染组小鼠食舌黏膜病变程度较重。结论P.gingivalis能够促进4-NQO诱导C57BL/6鼠口腔鳞癌的发生发展。