基于UPLC-QE-HF-MS/MS技术分析红凉伞化学成分及入血成分

目的 分析红凉伞提取物化学成分及入血成分,初步阐明其可能的药效物质基础。方法 采用配对比较法将12只大鼠随机分为空白组和红凉伞给药组,每组6只。每天上、下午各给药1次,连续3 d;第4天再次给药后,取血后制备血清样品。采用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱技术对红凉伞提取物和血清样品中化学成分进行分析鉴定。使用Compound Discoverer 3.0软件进行保留时间矫正、峰识别、峰提取等工作,根据二级质谱信息,利用Thermo mzCloud在线数据库、Thermo mzVault本地数据库,并参照有关文献和对照品质谱信息,初步鉴定红凉伞化学成分及入血成分。结果 从红凉伞提取物中共鉴定出34个化合物,主要为香豆素类、黄酮类、有机酸类、氨基酸类等成分,包括岩白菜素、槲皮素、没食子酸、L-焦谷氨酸等化合物;从血清样本中共鉴定出5个入血成分,分别为L-焦谷氨酸、丁香酸、岩白菜素、朱砂根皂苷A、麦考酚酸。结论 本研究初步推测L-焦谷氨酸、丁香酸、岩白菜素、朱砂根皂苷A、麦考酚酸是红凉伞的药效物质基础。

基于网络毒理学和实验验证探讨山豆根致大鼠肾毒性机制

目的 基于网络毒理学和实验验证,探讨山豆根潜在肾毒性机制。方法 网络毒理学预测山豆根毒性成分作用靶点,定位肾毒相关靶基因,取两者交集靶点,导入STRING平台构建靶点互作图,MetaScape数据库进行GO、KEGG分析,BioGPS数据库筛选大鼠肾毒性关键靶基因,构建“成分-靶点-通路”网络。通过动物实验对山豆根肾毒性机制进行验证,荧光定量PCR法检测肾组织关键基因mRNA表达水平。结果 网络毒理学共筛选出山豆根苦参碱、槐定碱、高丽槐素等20种毒性成分,涉及HSP90AA1、SRC、MAPK1、MAPK3、AKT1等135个肾毒性靶点,KEGG富集得到169条相关信号通路,其毒性机制可能与癌症途径、PI3K-Akt信号通路、HIF-1信号通路、MAPK信号通路等密切相关。结合BioGPS数据库筛选出6个关键靶基因PPARA、RAF1、MAP2K1、SRC、AKT1、MAPK3;动物实验结果表明,山豆根高剂量组大鼠BUN、SCr含量显著升高(P<0.01),肾组织出现明显损伤,荧光定量PCR结果表明山豆根高剂量组均可上调PPARA、RAF1、MAP2K1、MAPK3基因mRNA表达量,下调AKT1基因mRNA表达量(P<0.05)。结论 山豆根致大鼠肾毒性机制是多成分-多靶点-多通路共同作用的结果,本研究也为后续山豆根毒理学探索提供理论基础。

基于网络药理学的山豆根调控白细胞跨内皮迁移通路改善急性咽炎的作用机制

目的基于网络药理学、动物实验及荧光定量PCR技术阐明山豆根改善急性咽炎的分子机制。方法利用中药系统药理学分析平台(Traditional Chinese Medicine systems pharmacology database and analysis platform,TCMSP)数据库收集山豆根的活性成分和作用靶点。通过GeneCards、OMIM、DrugBank和Disgenet数据库获取急性咽炎相关的靶点。筛选获得两者的共同靶标后,利用STRING数据库进行构建蛋白互作网络,采用Metascape平台进行通路分析。同时应用Cytoscape软件构建“中药-疾病-成分-靶点”网络和“中药-疾病-成分-靶点-通路”网络。建立大鼠急性咽炎模型,研究山豆根水提取物对大鼠急性咽炎的影响。利用荧光定量PCR技术研究山豆根对大鼠急性咽炎模型咽部组织关键通路上的关键基因靶点的影响。结果该实验获取山豆根活性成分21个的相关作用靶点509个,获取急性咽炎相关的靶点2167个,山豆根与急性咽炎的共同靶点194个。KEGG通路分析筛选了344条相关信号通路,其中显示IL-17信号通路、NF-kappa B信号通路和白细胞跨内皮迁移通路可能在山豆根改善急性咽炎的过程中起关键作用。动物实验表明,山豆根水提取物低剂量组对急性咽炎治疗效果较好。荧光定量PCR实验结果表明,山豆根低剂量组明显下调了白细胞跨内皮迁移通路ITGB2、PIK3CA、PIK3CD和PTPN11基因的表达水平(P<0.05)。结论山豆根改善急性咽炎具有多成分、多靶点、多通路协同作用的特点。

朱砂根、山豆根及其药对的HPLC指纹图谱建立及5种化学成分的含量测定

目的建立朱砂根、山豆根及其药对的指纹图谱,同时测定其中5种成分的含量。方法以水为溶剂,结合冷冻干燥技术制备朱砂根、山豆根单煎冻干粉和朱砂根-山豆根药对合煎冻干粉样品;采用高效液相色谱(HPLC)法建立3种冻干粉样品的指纹图谱,并同法测定没食子酸等5种成分的含量。结果朱砂根、山豆根单煎冻干粉样品和朱砂根-山豆根药对合煎冻干粉样品分别有5、10、14个共有峰;与对照图谱的相似度均大于0.90;朱砂根-山豆根药对合煎冻干粉样品中,指认3号峰为没食子酸、4号峰为苦参碱、6号峰为氧化苦参碱、8号峰为岩白菜素、14号峰为三叶豆紫檀苷。朱砂根单煎冻干粉样品中,没食子酸、岩白菜素的平均含量分别为0.4993、4.9626mg/g;山豆根单煎冻干粉样品中,苦参碱、氧化苦参碱、三叶豆紫檀苷的平均含量分别为3.0460、2.3366、0.2786 mg/g;朱砂根-山豆根药对合煎冻干粉样品中,没食子酸、苦参碱、氧化苦参碱、岩白菜素、三叶豆紫檀苷的平均含量分别为0.5606、2.5487、1.3822、5.9607、0.2791 mg/g,转移率为8.87%~513.19%。结论所建立指纹图谱及含量测定方法稳定、可行,可用于朱砂根、山豆根及朱砂根-山豆根药对的质量控制;朱砂根-山豆根药对合煎冻干粉样品中苦参碱、氧化苦参碱的平均含量降低。

开喉剑喷雾剂治疗急性咽炎的用法用量研究

目的:探讨开喉剑喷雾剂治疗急性咽炎的最佳用法用量,为临床应用提供依据。方法:选取10%氨水咽部喷雾及乙型溶血性链球菌菌液感染2种方法造成大鼠急性咽炎模型,设置4～10喷/次,6～10次/d,共12个给药组,评价开喉剑喷雾剂的最佳用法用量。结果:开喉剑喷雾剂各给药组均可不同程度减轻大鼠咽部肉眼病变及镜下组织病变,药效稳定剂量范围为6～10喷/次、8～10次/d。结论:开喉剑喷雾剂治疗大鼠急性咽炎模型的最佳剂量范围为6～10喷/次、8～10次/d。

一测多评法同时测定开喉剑喷雾剂(儿童型)中4种成分

目的 建立一测多评法同时测定开喉剑喷雾剂(儿童型)(八爪金龙、山豆根、蝉蜕等)中4种成分的含量。方法 该药物的分析采用Platisil-ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸(三乙胺调节pH至5.0);体积流量0.8 mL/min;柱温35℃;检测波长220、275、300 nm。以岩白菜素为内标,计算其他3种成分的相对校正因子,测定其含量。结果 苦参碱、岩白菜素、三叶豆紫檀苷、马卡因分别在56.73~496.37、64.19~561.68、8.29~72.52、1.96~17.19μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999 6),平均加样回收率分别为99.89%、96.77%、92.12%、97.29%,RSD分别为1.57%、1.98%、0.96%、1.36%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论 该方法简便可行,准确可靠,可用于开喉剑喷雾剂(儿童型)的质量控制。

医药制造企业资金管理存在的常见问题及对策

基于对医药制造企业资金管理中常见问题与对策的探讨研究,首先要明确医药制造企业资金管理中的主要问题,然后与其中内容相结合,对增强医药制造企业资金管理效率的策略进行分析,得出企业需结合发展战略深化资金管理、确保资金调配的合理性、保证资金管理水平的有效提升以及加大资金风险管理力度的对策,希望能够为有关人士提供帮助。

制药企业财务管理探究

财务管理在制药企业发展中具有明显的推动作用,本文主要针对影响我国制药企业财务管理的因素、制药企业财务管理存在的问题以及相应的解决对策做了具体介绍,以供参考。

开喉剑喷雾剂(儿童型)治疗小儿急性咽炎和急性扁桃体炎的用法用量探讨

目的:明确开喉剑喷雾剂(儿童型)治疗动物急性咽炎和急性扁桃体炎的有效剂量范围,为指导临床用法用量提供依据。方法:取幼龄SD大鼠160只,白兔96只,ICR小鼠160只按体质量等级随机分为16组,分别为正常组、模型组、阿莫西林组或利巴韦林、复方一枝黄花组及开喉剑喷雾剂(儿童型)不同给药剂量组;开喉剑喷雾剂(儿童型)不同给药剂量组,分别设置2喷/次,4次/日; 4喷/次,4次/日; 6喷/次,4次/日; 8喷/次,4次/日; 2喷/次,6次/日; 4喷/次,6次/日; 6喷/次,6次/日; 8喷/次,6次/日; 2喷/次,8次/日; 4喷/次,8次/日; 6喷/次,8次/日; 8喷/次,8次/日;共12个给药组。除正常组外,其余各组采用5%氨水咽部喷雾致大鼠急性咽炎、乙型溶血性链球菌感染致家兔急性咽炎和急性扁桃体炎、腺病毒感染致小鼠急性咽炎3种动物模型,通过咽部病变评分及病理检测评价开喉剑喷雾剂(儿童型)的最佳用法用量。结果:与正常组比较,各实验中模型组动物肉眼及病理观察评分均有显著升高(P <0. 01);与模型组比较,开喉剑喷雾剂(儿童型)各给药组均可不同程度减轻大、小鼠咽部病变,减轻家兔咽部组织和扁桃体组织病变,在4～8喷/次,6次/日以及2～6喷/次,8次/日剂量范围内疗效显著,与模型对照组比较有显著性差异。结论:开喉剑喷雾剂(儿童型)治疗急性咽炎和急性扁桃体炎的不同年龄小儿推荐用量为1～3岁:2喷/次,6～8次/日; 4～6岁:3～6喷/次,6～8次/日; 7-12岁:5～8喷/次,6～8次/日。

开喉剑喷雾剂(儿童型)幼龄大鼠重复给药13周毒性研究

目的依据儿科用药非临床安全性评价技术指导原则要求,对开喉剑喷雾剂(儿童型)进行幼龄SD大鼠13周毒性实验研究,为儿童临床用药提供参考。方法160只幼龄(15日龄,PND15)大鼠,采取裂窝分层设计分组法随机分为5组,设1个空白对照组(氯化钠注射液)、赋形剂组以及低、中、高剂量组(以生药计,1.75、3.51、7.01 g/ml)。在哺乳期(PND15~21),每只仔鼠给予喷雾25μl/次;断乳后,每只仔鼠给予喷雾50μl/次;当大鼠体质量达到100、200、300、400 g级别时分别给予100、200、250、300μl/次,每天给药两次,前后间隔4 h,连续给药13周,恢复期4周;每组雌雄动物于给药结束、恢复期结束时分别各剖检10、6只。检测观察指标包括:一般观察、体质量、摄食量、行为学测试、尿液、血液学、血生化、脏器质量、脏器系数及组织病理学检查等。结果开喉剑喷雾剂(儿童型)可轻度提高动物摄食量和体质量;一些组别部分指标如血液学网织红细胞计数(RET#)升高、血小板总数(PLT)降低等,血生化碱性磷酸酶(ALP)降低、总蛋白(TP)升高等,尿液(pH改变,比重增加)以及部分脏器质量及脏器系数出现异常;病理学检查结果显示,各组动物均出现不同程度的肺损伤;对性征发育、行为学、眼科、骨髓细胞形态学等指标未见明显毒性影响。结论在该实验所确定的条件下,开喉剑喷雾剂(儿童型、10倍于临床浓度)未见其对幼龄动物的一般毒性以及对幼龄动物身体、反射发育的不良影响。