miR-503-5p靶向VEGFA基因通过PI3K/AKT信号通路调控人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的:探讨微小RNA-503-5p(miR-503-5p)对人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及作用机制。方法:培养滋养层细胞HTR8/Svneo和人绒毛膜癌细胞系JEG-3、BeWo和JAR,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-503-5p和血管内皮生长因子A(VEGFA)mRNA表达水平,Western blot法检测VEGFA蛋白表达水平。以JEG-3细胞为研究对象,构建过表达miR-503-5p或敲低VEGFA的JEG-3细胞,MTT检测细胞增殖,Transwell检测细胞的迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞周期蛋白D1(CyclinD1)、基质金属蛋白酶2(MMP2)、基质金属蛋白酶9(MMP9)、磷酸化的磷脂酰肌醇-3-激酶(p-PI3K)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)蛋白水平。生物信息学软件预测VEGFA的3′非翻译区(3′UTR)中含有与miR-503-5p互补的核苷酸序列,双荧光素酶报告基因实验验证miR-503-5p与VEGFA调控关系。结果:与HTR8/Svneo细胞比较,人绒毛膜癌细胞系JEG-3、BeWo和JAR中miR-503-5p水平均降低(P<0.05),VEGFA mRNA和蛋白水平均升高(P<0.05)。过表达miR-503-5p或敲低VEGFA可降低JEG-3细胞OD值、迁移数和侵袭数及细胞中CyclinD1、MMP2、MMP9、p-PI3K和p-AKT蛋白表达水平(P<0.05)。miR-503-5p靶向负调控VEGFA表达。VEGFA过表达逆转了miR-503-5p对JEG-3增殖、迁移和侵袭及PI3K/AKT信号通路的影响。结论:过表达miR-503-5p通过靶向负调控VEGFA表达和抑制PI3K/AKT信号通路抑制人绒毛膜癌细胞增殖、迁移和侵袭。