细脚虫草多糖液体发酵及分离纯化工艺研究

用Box-Behnken中心组合试验设计和单因素试验对虫草多糖发酵工艺、水提醇沉工艺及脱蛋白工艺进行优化。结果表明:细脚虫草最佳发酵工艺条件为葡萄糖33.3g/L、蛋白胨29.2g/L、接种量3.9%。胞外多糖最佳提取工艺条件为浓缩,加3倍乙醇,pH为6.0,沉淀24h;胞内多糖最佳提取工艺条件为浸提比(m(菌丝)∶V水)1∶40(g/mL),提取时间90 min,浸提次数2次,浸提温度80℃。多糖纯化中Sevage法脱蛋白的最佳工艺为氯仿与正丁醇配比(V(氯仿)∶V(正丁醇))4∶1、Sevage试剂与发酵液配比(Vsevge试剂∶V发酵液)1∶2、振摇时间15min、脱蛋白次数3次。优化后胞外多糖产量提高了37.89%,胞内多糖产量提高了24.59%,纯化后蛋白脱除率在75%以上。

蘑菇状蛹虫草子实体的诱发及虫草素含量分析

为选育出消费者喜爱的商品形态、口感及虫草素含量更理想的蛹虫草(Cordyceps militaris)子实体,基于米饭和鸡蛋的基础培养基,采用5种组合配方进行了筛选试验。试验结果表明,在米饭全蛋(RE)、全蛋(CE)、蛋黄(CY)固体培养基中均长出不同形态的子实体;其中,全蛋固体培养基中子实体呈明显蘑菇状,直径可达3.2 cm,蛋黄固体培养基中子实体虫草素含量最高,为30 414μg·g^(-1)。这一结果为培育获得蘑菇状商品形态的蛹虫草菌株提供了新的思路。

蛹虫草固、液发酵天麻的单因素研究

目的研究在固、液条件下蛹虫草发酵天麻药性基质的能力及发酵对虫草素和天麻素两种活性成分的影响,为后续发酵产物的获取和应用开发提供参考。方法运用单因素实验,以虫草素含量为主要考察指标,天麻素为参考指标,优化获得最佳单因素发酵条件。结果实验条件下固体发酵最佳单因素为:天麻粉添加量40%、发酵时间15 d、发酵温度25℃、蛹虫草接种量5 mL、营养水的量5 mL;液体发酵最佳单因素为:天麻粉2 g/100 mL、发酵温度25℃、液体培养基pH值6、加入离子为Na;。结论蛹虫草可以对含有一定量天麻的药性基质进行发酵,但固体培养基中天麻含量超过50%时不利于发酵,液体培养基中天麻含量超过4 g/100 mL时,不利于发酵进行。一定范围内,基质中天麻粉含量的增加可以显著提高产物中虫草素的含量,添加40%时含量达到0.455 g/mL,是不添加时的5.29倍。但这种作用也受温度的调控,当培养温度在中、高温(25℃、30℃)时有促进作用,当培养温度在低温(15℃)时,则有抑制作用。因此,通过控制发酵关键因子,就可以提高发酵产物中有效成分含量,为发酵产物的利用提供参考。