虫草生物活性物质研究概况

虫草及其无性型是具有多种用途的生物资源。现已在虫草中发现多种生物活性物质,据其化学结构大致分为腺苷类、多糖类、环状肽类、酶类等。多种实验表明这些生物活性物质有许多功能,例如:(1)抗生作用,包括抗细菌、抗真菌、抗病毒、抗癌和杀虫作用;(2)免疫调节剂;(3)免疫抑制剂;(4)抗辐射;(5)作为药剂等。

九株虫生真菌灭蚊试验初报

为寻找新的生物灭蚊资源，我们用九株菌株的孢子液作杀灭致倦库蚊早三龄幼虫的实验。其中Ｍ．ＳＰ．ＧＹ，Ｐ．ｆａｒｌｉｎｏｓｕｓ１０２０和Ｐ·ｆｌｕｍｏｓｏ－ｒｏｓｅｕｓ８０７８引起的蚊虫死亡率分别可达７５．１±２３．５％、５８．６±３８．８％和５９．３±１９．８％。从Ｐ·ｆｌｕｍｏｓｏ－ｒｏｓｅｕｓ８０７８感染致死的蚊幼虫中又分离出该菌，培养后产生的分生孢子仍具有较高的蚊虫致死率。Ｍ．ｓｐ，ＧＹ和Ｐ·ｆａｒｌｉｎｏｓｕｓ１０２０的孢子冰冻匀浆能在较短时间（１～２天）内使蚊虫死亡，表现出明显的真菌毒素作用。

古尼虫草无性型菌丝生长条件的研究

本文报道了不同营养组成的培养基,双相培养、pH以及生理活性物质对古尼虫草Cordyceps gunnii(Berk.)Berk的无性型——古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii Liang)5-19菌丝体生长的影响,结果表明,培养基的营养组成明显地影响菌丝体生长曲线的变化;双相培养方式促进菌丝营养生长;菌丝生长的适宜pH范围是pH7-8;在合成培养基中,植物激素及生长调节物质如吲哚乙酸,萘乙酸、激动素、苄基腺嘌啉、赤霉素、脱落酸、环腺苷酸在一定的浓度下对菌丝生长有明显促进作用;但在天然培养基中,一定浓度的2,4-二氟苯氧乙酸、玉米素表现出略有促进作用,而高浓度(100ppm)的吲哚乙酸、激动素、苄基腺嘌啉、萘乙酸抑制菌丝生长。维生素中的吡哆醇、肌醇、泛酸钙在一定浓度下能显著地促进菌丝生长。

戴氏虫草无性型的研究—Ⅰ.抗生素

戴氏虫草(cordyceps taii)的无性型—戴氏绿僵菌(Metarhiziumtaii)88-601菌株菌丝体乙醚浸提液对革兰氏阳性菌如金黄色葡萄球菌(Staphyl-occus aureus)、枯草杆菌(Bacillus subtilis)有明显的拮抗作用。鉴于粗提液的溶解性、热稳定性、紫外—可见光谱及抗菌谱初步推测该抗生素为蒽环类物质,这是首次在虫草及其无性型中报道的脂溶性抗生素。

采集自贵州的两个稀有虫草

1994年6月采集自贵州梵净山和荔波茂兰保护区的虫草属真菌，中国新记录种──螳螂虫草（CordycepsmantidaecolaKob.etShim.）和属于蛇形虫草亚属头状组的一新种──贵州虫草（CordycepsguizhouensisLiu,LiangetLiusp.nov）。贵州虫草寄生于刺蛾茧上，茧表面褐色，椭圆形，大小为4～6×5～9mm，在一个茧上可长1～2根子座，子座单生，不分枝，圆柱形，高1．5～5cm；柄和可孕部分界线不明，粗细相当，直径1～2mm，均为淡黄色，可孕部分皮层为丝状细胞的伪柔组织，有的柄部为白色；子囊壳散埋生，梨形，黄色，230～250×160～180μm；子囊为棍棒状或纺锤形，60～140×5～8μm，头部3～4μm；每个子囊中有8个子囊孢子，子囊孢子梭形，具3～4个隔膜，40～60×0．8～1．7μm，不断裂成次生子囊孢子。

微生物对真菌生长及分化的刺激作用

真菌是一类真核生物,产生多种孢子,行有性或无性繁殖。已知真菌约有10万余种,分布极广。土壤、水域、空气以及动物、植物和腐败有机物上都有存在,遍布全球。在真菌的进化过程中,每一种真菌都选择了其特定的环境条件,这些环境条件不仅包括理化因素（温度、湿度、酸度、O2与CO2、光线、营养等）而且也包含了其生物因素(动物、植物。

蛹虫草的无性型及子实体人工培养研究

比较了蛹虫草〔Cordyceps militaris（Vuill.）Fr.〕无性型,蛹草拟青霉〔Paecilomyces Militaris（Kob.）Br.et Sm.）的一个野生型菌株CGAC88-821L及角变分离株CGAC88-821S间的均菌落特征、形态特征、寿命及子实体形成能力的差异。观察结果表明,88-821S菌株的菌落颜色比88-821L菌株稍淡,但产孢结构较密;在形态特征方面,88-821L的产孢细胞以拟青霉型（Paeci-lomyces-type）为主,分生孢子多聚集成迭瓦状长链,而88-821S的产孢细胞则以锥形的顶孢霉型（Acremonium-type）为主,分生孢子常聚集成头状。88-821L的寿命较长,8～15℃可存活5个月以上,人工培养易产生具成熟子囊壳的子实体;而88-821S在相同条件下则全部死亡,且不形成子实体。本文还讨论了蛹虫草无性型分类的历史演变及其合理的分类地位。

被毛孢属的两种新昆虫病原真菌

本文报道了被毛孢属的两个新种,多颈被毛孢(Hirsutella polycoll-utaLiang sp.nov.)和长白山被毛孢(Hirsutella changbeisanensis Liang sp.nov.).多颈被毛孢的主要鉴别特征是;1)有性型为一种子囊壳表生的虫草(Cordyceps sp.);2)瓶梗及其支撑茵丝皆再育;和3)分生孢子拟棒形或拟梭形,5～8.5×1.5～2μm.长白山被毛孢和其近缘种能以下列特征相区别:被覆寄主的菌丝体白色,瓶梗可再育且上部光滑,无二次分生孢子形成和瓶梗基部略膨大但不靠菌丝的隔膜产生.

寄生柑桔害虫的两种座壳孢

本文报导了寄生黑点蚧(Parlatoria zizyphus)的座壳孢属(Ascharsonia)一新种,贵州座壳孢,(Aschersonia guizhouensis Liu et Liang sp. nov.)及寄生粉虱(Aleyrodidae)和盾蚧Diaspidiae的双生座壳孢。(Aschersonia duples Berk.)。新种的主要特征是,孢子器不规则无定形,远离子座基端着生,敞口宽大,150～500×125～350μm。分生孢子拟纺锤形,单孢具油滴,19～20×1.75～2.5μm。侧丝48～118×2～2.5μm。此菌与黄座壳孢(A. flava Petch)和台湾座壳孢(A. formosensis Saw)等6个种有相似之处,但可据以上特征加以区别。双生座壳孢除寄主和子座颜色不同外,其它特征均与(1974)的描述相似。

营养条件对古尼虫草菌丝生长量的影响

本文报道了古尼虫草(Cordyceps gunnii(Berk)Berk)的无性型,古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii Liang)5—19菌株,在不同营养条件下的菌丝产量。实验表明:碳源中,最适于此菌生长的是单糖。其中甘露糖最佳,其次为葡萄糖和半乳糖。双糖中麦芽糖最好。在淀粉中,以洋芋粉最适于生长,且菌丝体成为纯白色。在氮源试验中,最适于生长的有机氮为尿素,无机氮为硝酸钠。实验还表明:在所试微量元素浓度范围内对此菌生长无明显影响。

戴氏虫草无性型的研究——Ⅱ多糖

本文报道了戴氏虫草(Cordyceps taii Liang et Liu)的无性型,戴氏绿僵菌(Metarhizium taii Liang et Liu)88-601菌株水溶性胞外多糖(CD-1)的免疫调节作用和多糖的组成及液体培养的条件。结果表明,CD-1经提取、分离、纯化表明它是均一性的葡聚糖,分子量约200,000,产量为13.5 g/l(纯多糖)。有免疫调节作用。菌丝生长的适宜温度范围为25～29℃。37℃时分生胞子不萌发,菌丝产量和粗多糖产量最高的培养基为黄豆粉葡萄糖培养液(SGM)(分别为1.24g/100ml,16.75g/l)。粗多糖纯度可达80％。

丝状真菌原生质体融合中亲本标记及融合子检出

丝状真菌原生质体融合中亲本标记及融合子检出谌斌，梁宗琦，刘爱英（贵州农学院虫生真菌研究室贵阳５５００２５）ＰＡＲＥＮＴＡＬＭＡＲＫＥＲＡＮＤＦＵＳＡＮＴＳＥＬＥＣＴＩＯＮＩＮＰＲＯＴＯＰＬＡＳＴＦＵＳＩＯＮＯＦＦＩＬＡＭＥＮＴＯＵＳＦＵＮＧＩＳｈｅｎ...

粉被虫草(Cordyceps pruinosa Petch)无性型对苏云金杆菌(Bacillus thuringiensis subsp.galleria Heimpel)抗紫外辐射的保护效应

本文首次报道了粉被虫草的无性型粉被马利娅霉(Mariannaea PruinosaLiang)对苏云金杆菌抗紫外辐射的保护作用,建立了粉被马利娅霉抗紫外辐射物质的苏云金杆菌检测法。用粉被马利娅霉的培养液、菌丝体浸提液及孢梗束浸提液所培养的苏云金杆菌经紫外辐射后,活菌数依次比对照提高26.3％、138.6％、187.8％。揭示了抗辐射物质的含量是孢梗束高,菌丝体次之,培养液最低的趋势。不同来源的粉被马利娅霉菌株抗紫外辐射物质的含量是有差异的。

古尼虫草人工培养物的营养成份含量分析

古尼虫草无性型——古尼拟青霉(Paecilomyces gunnii Liang) 在不同培养条件下,菌丝体干重、蛋白质、氨基酸及维生素含量均有明显差异。在25℃下Ⅱ号培养基菌丝体干重比Ⅰ号培养基高40％以上;蛋白质含量,Ⅱ号培养基高达10.58％,约为对照的1.5倍,为冬虫夏草(Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.)的57％;菌丝体氨基酸含量为冬虫夏草全草和子座的1.5倍以上,维生素E平均含量高达2000mg/100g鲜菌丝体干重以上;维生素C的含量也高于一般粮食和蔬菜,烟酸的含量为酵母的50倍。

古尼拟青霉的种内杂交 Ⅰ.古尼拟青霉营养缺陷型原生质体的形成和再生

本文比较了不同酶液、渗透稳定剂、酶液pH、酶解温度、菌丝生长培养基成份及菌龄等因素对原生质体形成的作用及影响。用1.5％粗纤维素酶或1％脱壁酶、0.7MNaCl为渗透稳定剂,温度32℃、pH6、菌丝生长培养基为Sabouraud琼脂培养基,菌龄16小时,可以从所试的6株菌株的菌丝体得到大量的原生质体（4.0×10~6个/ml）。0.5MNaCl为稳定液,黄豆粉培养基上原生质体再生率可达11.4％。对原生质体释放和再生的形态学过程进行了描述和显微摄影。

虫草的无性型及其确定

本文讨论了正确确定虫草无性型的学术意义和实用价值,列表介绍了46种虫草的无性型和相关真菌.对报道含有虫草无性型的26属真菌中的一些属的变化作了简要介绍.结合作者自身的研究工作对确定虫草无性型的各类方法的优缺点作了评述,其中通过子囊孢子微循环产孢和子实体人工诱发确定无性型更具可靠性.

蛹虫草(Cordycepsmilitaris)无性型的多型现象

在萨氏琼脂和PDA上，蛹虫草Cordycepsmilitaris（Vuill）Fr.无性型，蛹草拟青霉Paecilomycesmilitaris(Kob）Br.＆Sm．的一些单孢子株可自发产生突变，基于多型现象及其它形态特征可分三种类型：（1）具野生型菌株特征；产孢结构拟青霉型（Paecilomyces－type），稳定，菌落通常不自发产生角变，大多数单孢子株属此类群。（2）属此类群的单孢子株，在PDA上可形成亮褐色至橙黄色的角变，它们典型的产孢结构为瓶梗轮生，分生孢子常聚集成头状的轮枝孢型（Verticillium－type）。在查氏培养基上则相反，拟青霉型的产孢结构占优势。单孢子株Cm-71是这一类群的代表。（3）单孢子株Cm－42是在所观察单孢子株中形态特征独特的菌株。在PDA上菌丝生长纤细，蛛网状，产孢结构轮枝孢型。蛹草拟青霉对氯酸钾（KClO3）不敏感，在浓度为6％（W／V）的KMM培养基上，23～24℃14天菌落的直径仅1～2cm，无气生菌丝生长。各单孢子株形成的不利用硝酸盐突变株（nit突变株）的途径和形态特征，也可分成类似于粉被虫草CordycepspruinosaPeteh不利用硝酸盐突变株（nit突变株）的三种类型。

双型孢绿僵菌的鉴定研究

本文报导了一个危害桔柑的螂蝉寄生菌,双型孢绿僵菌新组合Metarhizium biformisporae(Chen et Guo)Liu et Liang comb. nov.其主要特点是:瓶梗柱状或具短突尖的瓶形,2～5个呈束排列。分生孢子两型,小型分生孢子多数柱状、棒状或拟卵圆形,(3.5-)5～7(-8)×(2-)2.5～3(-3.5)μm;大型分生孢子柱状、长圆形或腊肠形,两端钝圆或尖细,中间有时略细,(10-)16～18(-22)×(2～1)2.5～3.5(-4)μm。

被毛孢属(Hirsutella Pat)的分类研究 Ⅱ 已知种的检索

本文提出了被毛孢属（Hirsutella pat）的62个种和变种的检索类。对一些有争议和可疑种亦作了扼要介绍。

梵净山自然保护区的一些虫生真菌

本文报道了采自梵净山自然保护区的蛹虫草(Cordyceps militaris),下垂虫草(Co-rdyceps nutans),金龟子虫草(Cordyceps scarabaeicola),蝉拟青霉(Paecilomyces cicadae),撑拟青霉(Paecilomyces suffultus),爪哇拟青霉(Paecilomyces javanicus)和暗绿拟青霉(Paecilomyces atrovirens)等14种昆虫病原真菌。其中撑拟青霉为国内首次报道的新记录种,暗绿拟青霉为一新种。此新种能以(1)在查氏琼脂上菌落暗绿、生长缓慢;(2)瓶梗基部球顶长颈瓶形;和(3)柱形分生孢子聚集成迭瓦状长链与已知种相区别。