氟化钠对人原代成骨细胞p21基因组蛋白乙酰化及表达的影响

[目的]观察氟化钠对人原代成骨细胞p21基因组蛋白乙酰化水平、m RNA转录及蛋白表达的影响,为阐释氟骨症发生分子机制提供依据。[方法]以0、125、250、500、1 000μmol/L氟化钠处理人原代成骨细胞72 h,定量染色质免疫共沉淀技术检测p21基因转录调控区Ch IP1区域及编码区Ch IP2区域组蛋白乙酰化水平,实时荧光定量PCR法检测p21基因m RNA转录水平,免疫印迹法检测P21蛋白表达。[结果]氟化钠处理的0、125、250、500、1 000μmol/L浓度组中,p21基因转录调控区Ch IP1区域组蛋白H3K9乙酰化水平分别为1.998±0.085、1.644±0.162、1.381±0.069、1.280±0.129、1.040±0.270,差异有统计学意义(F=15.757,P<0.05);组蛋白H3K14乙酰化水平分别为1.344±0.068、1.248±0.070、1.140±0.090、1.040±0.116、0.770±0.059,差异有统计学意义(F=21.284,P<0.05);组蛋白H4K16乙酰化水平分别为1.330±0.084、1.251±0.085、1.087±0.044、0.854±0.070、0.788±0.051,差异有统计学意义(F=36.429,P<0.05)。不同浓度染氟组中,编码区Ch IP2区域组蛋白H3K9、H3K14、H4K16乙酰化水平差异均无统计学意义(F=0.084、0.206、0.500,均P>0.05)。p21基因m RNA转录水平分别为2.65±0.35、1.93±0.48、0.88±0.17、0.82±0.09、0.67±0.16,差异有统计学意义(F=3.90,P<0.05);P21蛋白表达水平分别为1.62±0.06、1.02±0.08、0.84±0.07、0.26±0.05、0.07±0.03,差异亦有统计学意义(F=281.58,P<0.05)。[结论]氟可致人原代成骨细胞p21基因转录调控区组蛋白乙酰化水平降低,抑制p21基因m RNA转录及蛋白表达,可能是氟致人成骨细胞增殖活跃的重要分子机制之一。