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基于高分辨率熔解曲线技术的CRISPR/Cas9介导的细胞基因突变快速检测研究
被引量:
1
1
作者
陈黎
卢茜
+2 位作者
杨红兰
张鹏
何志旭
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期90-96,共7页
旨在建立一种通过高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)分析技术快速检测CRISPR/Cas9介导的细胞基因突变的方法。采用野生型、纯合突变及杂合突变小鼠胚胎干细胞优化和完善HRM检测条件,然后应用建立的HRM方法对30个测序结果...
旨在建立一种通过高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)分析技术快速检测CRISPR/Cas9介导的细胞基因突变的方法。采用野生型、纯合突变及杂合突变小鼠胚胎干细胞优化和完善HRM检测条件,然后应用建立的HRM方法对30个测序结果已知的CRISPR/Cas9技术编辑过的小鼠胚胎干细胞单克隆进行检测,根据熔解温度与熔解曲线的差异区分野生型、纯合突变型及杂合突变型,以验证HRM方法的可行性和准确性。结果表明,优化的HRM检测方法能够鉴别野生型、纯合突变型及杂合突变型小鼠胚胎干细胞。应用建立的HRM方法分析30个CRISPR/Cas9技术编辑过的小鼠胚胎干细胞单克隆,结果显示,14个单克隆为杂合突变型、2个单克隆为纯合突变型、14个单克隆为野生型,与测序结果一致,准确率为100%。本研究建立的高分辨率熔解曲线法能对CRISPR/Cas9介导的细胞基因突变进行快速筛选,是一种灵敏、准确、简便、高通量的方法。
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关键词
高分辨率熔解曲线
CRISPR/Cas9
细胞基因突变
检测
下载PDF
职称材料
题名
基于高分辨率熔解曲线技术的CRISPR/Cas9介导的细胞基因突变快速检测研究
被引量:
1
1
作者
陈黎
卢茜
杨红兰
张鹏
何志旭
机构
贵州医科大学基础医学院免疫学教研室组织工程与干细胞实验中心
中国
医学
科
学院
成体
干细胞
转化研究重点
实验
室
遵义
医科
大学
附属医院儿科
出处
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第10期90-96,共7页
基金
国家自然科学基金项目(32000601,81871313)
贵州医科大学博士启动基金(院博合J字[2018]016号)
贵州医科大学学术新苗计划(黔科合平台人才[2018]5779-74)。
文摘
旨在建立一种通过高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)分析技术快速检测CRISPR/Cas9介导的细胞基因突变的方法。采用野生型、纯合突变及杂合突变小鼠胚胎干细胞优化和完善HRM检测条件,然后应用建立的HRM方法对30个测序结果已知的CRISPR/Cas9技术编辑过的小鼠胚胎干细胞单克隆进行检测,根据熔解温度与熔解曲线的差异区分野生型、纯合突变型及杂合突变型,以验证HRM方法的可行性和准确性。结果表明,优化的HRM检测方法能够鉴别野生型、纯合突变型及杂合突变型小鼠胚胎干细胞。应用建立的HRM方法分析30个CRISPR/Cas9技术编辑过的小鼠胚胎干细胞单克隆,结果显示,14个单克隆为杂合突变型、2个单克隆为纯合突变型、14个单克隆为野生型,与测序结果一致,准确率为100%。本研究建立的高分辨率熔解曲线法能对CRISPR/Cas9介导的细胞基因突变进行快速筛选,是一种灵敏、准确、简便、高通量的方法。
关键词
高分辨率熔解曲线
CRISPR/Cas9
细胞基因突变
检测
Keywords
high-resolution melting
CRISPR/Cas9
gene mutation in cells
detection
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于高分辨率熔解曲线技术的CRISPR/Cas9介导的细胞基因突变快速检测研究
陈黎
卢茜
杨红兰
张鹏
何志旭
《生物技术通报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
1
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