CalothrixinB衍生物对白血病K562细胞的抑制作用及机制

目的:研究CalothrixinB衍生物L20对白血病K562细胞的抑制作用及其机制。方法:采用四唑盐(MTT)法检测化合物L20对K562细胞的抑制作用,使用流式细胞分析仪检测化合物L20对K562细胞凋亡及周期的影响,用DCFH-DA标记的荧光探针通过荧光显微镜观察活性氧(ROS)的改变,Western蛋白印迹检测相关蛋白的表达。结果:L20处理后的K562细胞增殖受到明显抑制,L20能够诱导K562细胞凋亡,并使其细胞周期阻滞在G 2/M期,L20还可以使ROS在K562细胞中堆积;在蛋白水平上L20能够下调p-ERK、BCL-2和p-CDC25C,上调BAX、p-CDK1及CDC25C,并激活Caspase家族。结论:L20具有通过MAPK通路诱导K562细胞凋亡及将细胞周期阻滞在G 2/M期的活性。

Flavaglines类化合物对人白血病HEL细胞的作用及机制

目的:探讨Flavaglines类化合物对人白血病HEL细胞的作用及机制。方法:取HEL细胞培养至对数生长期,以DMSO组为空白对照组,采用过四唑盐(MTT)法检测阳性对照药阿霉素(0.100、0.050、0.030、0.010及0.006μmol/L)、化合物M8(0.20、0.10、0.05、0.03及0.01μmol/L)及M9(2.50、1.25、0.63、0.30及0.16μmol/L)对HEL细胞作用72 h后的吸光度值(OD)并计算抑制率和半抑制浓度(IC 50)值;采用流式细胞仪检测M8(0.20、0.05及0.02μmol/L)和M9(1.00、0.50及0.25μmol/L)对HEL细胞作用24、48及72 h后的细胞凋亡率;采用Western blot分析M8(0.20μmol/L)和M9(1.00μmol/L)对HEL细胞作用24 h后B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Caspase3、Cleave-Caspase3、磷酸化信号传导转录激活蛋白3(p-Stat3)及c-Myc蛋白表达的变化。结果:MTT结果显示,阿霉素及化合物M8、M9抑制HEL细胞增殖的抑制率均随浓度的增加而增高(P<0.05或P<0.01),IC 50值分别为(0.06±0.001)μmol/L及(0.02±0.010)μmol/L、(0.21±0.060)μmol/L;流式细胞仪结果显示,化合物M8和M9促进HEL细胞的凋亡率随浓度的增加而增高(P<0.05或P<0.01);Western blot结果显示,与DMSO组比较,M8和M9组HEL细胞的Bcl-2、Caspase3、p-Stat3及c-Myc蛋白表达减少(P<0.05或P<0.01),Cleave-Caspase3蛋白表达增加(P<0.01)。结论:Flavaglines类化合物M8和M9可通过影响Stat3信号通路而促进HEL细胞发生凋亡。