异氟烷对体外精子超微结构的影响

目的:探讨异氟烷在体外对人类精子超微结构的影响。方法:收集24例精液常规正常的男性精子标本,每例精液均分成3份,分别给予1.1%异氟烷(A组)、2.2%异氟烷(B组)和空气(C组),并放置于孵箱培养5 h,采用扫描电镜观察各组精子的超微结构改变,计算异氟烷处理后顶体完整率、头部及尾部畸形率。结果:用异氟烷孵育后,头部及尾部畸形、顶体凹陷的精子数量增多;A、B组精子顶体完整率低于C组、头部及尾部畸形率高于C组,其中B组精子形态异常情况较A组更为严重,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:异氟烷可影响精子形态,且随着异氟烷浓度增加,精子形态改变越来越明显。

人脑胶质瘤细胞来源外泌体的提取鉴定及微环境中的摄取

目的探讨提取、鉴定及观察细胞对外泌体在微环境中的摄取,为后续开展胶质瘤外泌体相关的研究建立稳定的提取方法,以及更清楚地观察到外泌体奠定基础,为今后研究提供一定的参考。方法运用超速离心法从人脑胶质瘤细胞培养上清液中分离外泌体以及观察在肿瘤细胞微环境中肿瘤细胞对外泌体的摄取,通过透射电子显微镜观察外泌体的大小、形态特点,通过马尔文粒径分析确定外泌体粒径的大小,应用Western blotting法进行外泌体特异性抗原分子CD63、TSG101的鉴定,采用荧光共聚焦显微镜观察胶质瘤细胞摄取外泌体。结果通过透射电子显微镜观察到从人脑胶质瘤U251细胞的培养上清液中分离出来的呈圆形杯盘样结构的囊泡样物质,其外形呈典型的杯状和双凹圆盘的扁平球囊体且具备完整的膜结构,粒径大小为30~150 nm,Western blotting结果显示其表达外泌体特异性蛋白CD63、TSG101;外泌体通过细胞内吞噬作用形成、分泌和释放,通过荧光共聚焦显微镜可以证实其有效摄取外泌体,主要集中于细胞质。结论人脑胶质瘤U251细胞中提取分离得到具有双层膜结构茶托样囊泡物质,鉴定其为外泌体,并能观察细胞摄取外泌体集中分布于细胞质。

天然抗氧化剂治疗糖尿病睾丸氧化应激损伤的研究进展

糖尿病的发病率逐年上升且呈年轻化趋势,目前已成为一个严重的全球公共健康问题。糖尿病患者体内长期高血糖状态极易诱发多个器官和系统的功能障碍。糖尿病雄性存在明显的生精障碍,其性及生殖能力显著下降。研究表明多种天然抗氧化剂对糖尿病睾丸氧化应激损伤具有保护作用。本文对天然抗氧化剂治疗糖尿病所致睾丸氧化应激损伤的研究进展进行综述,以期为天然抗氧化剂治疗糖尿病男性患者睾丸损伤提供理论依据,也为新药的开发提供参考和支持。

循环肿瘤细胞在胃癌中应用的研究进展

复发和转移是导致胃癌术后低生存率的主要原因。循环肿瘤细胞在胃癌转移中的起到关键作用,所谓的“肿瘤细胞播散的上皮-间质/间质-上皮假说”很好地解释了这一点。近年来,随着循环肿瘤细胞检测技术的进步,循环肿瘤细胞作为推动精准医学的重要技术得到了广泛的关注。该研究就循环肿瘤细胞在胃癌的早期诊断、治疗过程中的动态监测、预后的判断、个体化治疗中的研究进展及展望作一综述。

股动脉穿刺介入术后3种止血方法的比较

目的:比较经皮冠状动脉介入(PCI)术后3种不同压迫止血方法的临床疗效。方法:选择行PCI的患者181例,根据术后压迫止血方式不同分为A组(人工压迫止血法,n=58)、B组(YM-GU-动脉压迫止血器,n=61)和C组(股动脉气囊压迫止血器,n=62),比较3组患者临床基础情况、术后止血时间、肢体制动时间、舒适度和并发症。结果:3组患者的临床基础情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);3组患者止血操作时间及肢体制动时间两两比较,A组明显长于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.01);术后并发症的发生率,A组和C组明显低于B组,差异有统计学意义(P<0.01);术后舒适度不满意的发生率,A组和B组明显高于C组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:股动脉气囊压迫止血疗效可靠,压力值易调控。

蓝莓对肝损伤大鼠肝功能、肝纤维化及组蛋白乙酰化修饰的影响

目的:研究蓝莓对四氯化碳(CCl_4)致肝损伤大鼠肝功能、肝纤维化及组蛋白乙酰化修饰的影响。方法:将50只SD大鼠随机均分为对照组、模型组、蓝莓治疗组、蓝莓干预组和自然恢复组5组;模型组、蓝莓治疗组、蓝莓干预组和自然恢复组均给予CCl_4植物油溶液皮下注射4周处死;蓝莓治疗组于造模结束后给予蓝莓汁灌胃8周,共12周;蓝莓干预组在造模4周前至造模结束均以蓝莓汁灌胃,共8周;自然恢复组在造模4周后自然饮食8周,共12周;检测5组大鼠血清中肝功能[丙氨酰胺基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)]2项指标及肝纤维化[血清透明质酸(HA)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、血清层粘连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PⅢNP)]4项指标,肝脏切片HE染色行肝脏病理检查,肝脏组织进行核浆分离后检测各组大鼠肝脏组织中组蛋白乙酰化acH3K9、acH3K14和acH3K18蛋白的表达。结果:与对照组比较,各组大鼠血清中ALT、AST、HA和CⅣ明显增高(P<0.05);与模型组比较,蓝莓治疗组及蓝莓干预组大鼠血清ALT、AST、HA和CⅣ水平均明显下降(P<0.05);肝脏HE染色显示,4周CCl_4植物油溶液皮下注射造模成功;与模型组比较,蓝莓干预组大鼠肝脏有明显改善,而蓝莓治疗组及自然恢复组大鼠的肝脏有轻微改善;与对照组比较,蓝莓治疗组及蓝莓干预组大鼠肝脏组织中acH3K9、acH3K14和acH3K18修饰水平的差异不明显(P>0.05);与模型组比较,余各组大鼠肝脏组织中acH3K9、acH3K14和acH3K18蛋白修饰水平增高(P<0.01);与自然恢复组比较,蓝莓治疗组和蓝莓干预组肝组织中acH3K9、acH3K14、acH3K18修饰降低程度比模型组稍高(P<0.05)。结论:灌胃蓝莓可改善CCl_4肝损伤模型大鼠的部分肝功能指标,其机制可能与其影响大鼠肝组织组蛋白乙酰化修饰水平有关。

脑胶质瘤免疫微环境中细胞因子的研究进展

脑胶质瘤是人类中枢神经系统中最常见的原发性恶性肿瘤,目前手术切除以及术后联合放化疗等传统治疗改善患者远期生存率的效果并不太理想。免疫微环境对胶质瘤的发生发展起关键作用,而作为免疫微环境的重要组成部分的细胞因子(白细胞介素、基质细胞衍生因子-1、转化生长因子-β等)是调控微环境免疫抑制性的重要一环。因此,探究胶质瘤中存在的相关细胞因子对免疫微环境的影响是进一步了解肿瘤免疫微环境的关键,并有望为延长脑胶质瘤患者生命,甚至治愈脑胶质瘤提供新的方法及思路。

达芬奇机器人在直肠癌手术中的应用进展

直肠癌是常见的消化系统恶性肿瘤,手术为主要治疗方案。传统腹腔镜手术因盆腔解剖复杂等问题,手术难度系数较大。随着医疗技术的发展,机器人手术治疗直肠癌体现出稳定性好、出血量少、创伤小、中转开腹率低、灵活度高、学习周期短、易于远程操作和教学等优势,并可降低手术难度系数,克服了开腹手术及传统腹腔镜手术操作中的不足,更适用于腹腔手术。但机器人手术也存在手术时间相应延长、费用高、钳夹肠管时触觉反馈丧失等缺点。虽然其短期术后疗效与腹腔镜微创手术疗效相当,但机器人手术治疗直肠癌的潜在优势及患者的远期效果仍需更多的数据进行证实。

蓝莓花青素对高侵袭性人肝癌LM3细胞株增殖的抑制作用及对细胞组蛋白乙酰化修饰水平的影响

目的探讨蓝莓花青素对高侵袭性人肝癌LM3细胞株增殖的抑制作用以及对细胞组蛋白乙酰化修饰水平的影响。方法(1)取对数生长期的LM3细胞,加入不同浓度(0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、150μg/mL、200μg/mL)的蓝莓花青素。干预30 h后显微镜下观察细胞生长情况并计数,采用免疫荧光法观察细胞凋亡现象;于干预12 h、24 h、34 h时,采用实时无标记动态细胞分析技术检测细胞的增殖情况,并选择适宜的干预浓度和时间。(2)采用0μg/mL和适宜浓度的蓝莓花青素干预LM3细胞一定时间后,采用蛋白免疫印迹法检测乙酰化H3K14(acH3K14)、乙酰化H3K18(acH3K18)、乙酰化H3K27(acH3K27)的相对表达水平。结果(1)无蓝莓花青素(0μg/mL)干预的LM3细胞生长旺盛,而经过蓝莓花青素干预后,LM3细胞体积缩小,细胞数目减少,中晚期凋亡细胞数量增多,且随蓝莓花青素浓度升高上述现象更加明显。与0μg/mL蓝莓花青素相比,除干预12 h时的50μg/mL蓝莓花青素外,各时间点不同浓度蓝莓花青素干预后LM3细胞的增殖水平均减弱(均P<0.05),且具有剂量依赖性(均P<0.05)。在干预34 h时,100μg/mL蓝莓花青素对LM3细胞的增殖抑制率超过50%,故可选取100μg/mL干预34 h作为最适浓度和时间。(2)与0μg/mL蓝莓花青素相比,100μg/mL蓝莓花青素干预后LM3细胞的acH3K14、acH3K18、acH3K27相对表达水平均增加(均P<0.05)。结论蓝莓花青素可抑制高侵袭性人肝癌LM3细胞的增殖并促进其凋亡,这可能与其提高细胞组蛋白乙酰化修饰水平有关。

胺碘酮对大鼠睾丸形态和功能的影响及其作用机制

目的:探讨胺碘酮对大鼠睾丸质量、形态、酶活性及精子活力的影响。方法:健康雄性SD大鼠随机分为对照组、低剂量组和高剂量组,连续灌胃方式给予胺碘酮4周。处死大鼠后,分离大鼠双侧睾丸,并称重;光学显微镜观察精子活力,H-E染色观察睾丸形态;采用乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、一氧化氮合酶(NOS)及一氧化氮(NO)检测试剂盒分别测定LDH、SDH和NOS活性及NO含量。结果:高剂量组大鼠出现精神萎靡、毛发灰暗、活动减少现象,攻击性行为增强。高剂量组大鼠睾丸部分曲细精管外壁出现褶皱,生精上皮细胞排列不规则。睾丸质量、睾丸组织LDH活性和SDH活性方面,低剂量组、高剂量组与对照组差异无统计学意义;睾丸组织NOS活性、NO含量和精子活力方面,低剂量组与对照组差异无统计学意义,但高剂量组与对照组差异有统计学意义。结论:高剂量胺碘酮导致成年雄性大鼠睾丸形态改变,睾丸NOS活性增高,NO含量增加,精子活力下降,表明高剂量胺碘酮可能对雄性睾丸有一定影响,从而影响雄性生殖功能。

白蛋白紫杉醇与五氟尿嘧啶联合用药对人胃癌细胞增殖及周期的影响

目的探索白蛋白紫杉醇(Nab-PTX)与五氟尿嘧啶(5-Fu)联合用药对人胃癌细胞(AGS)增殖及周期的影响。方法对数生长的AGS细胞分为对照组(RMPI 1640,Ctrl组)、Nab-PTX组(Nab-PTX,浓度梯度为0.1、0.2、0.4μmol/L)、5-Fu组(5-Fu,浓度梯度为1、2、4μmol/L)及Nab-PTX+5-Fu组[Nab-PTX+5-Fu,浓度梯度为(0.1+1)、(0.2+2)、(0.4+4)μmol/l];相应药物作用24、48以及72 h,采用CCK-8法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期。结果与Ctrl组相比,Nab-PTX组、5-Fu组、Nab-PTX+5-Fu组细胞增殖能力均受到抑制(P<0.05),且联合用药抑制率较单药明显增加,同时Nab-PTX、5-Fu、Nab-PTX+5-Fu作用于AGS细胞株时抑制率随时间延长而递增;与Ctrl组相比,Nab-PTX组细胞周期阻滞于G2/M期(P<0.05),5-Fu组细胞周期阻滞于S期(P<0.05),Nab-PTX+5-Fu组细胞周期阻滞在S期(P<0.01)。结论Nab-PTX与5-Fu联合用药较两药单独应用能更有效地抑制细胞增殖,同时也使细胞周期阻滞在S期。

多学科团队协作在中晚期结直肠癌诊疗价值的研究

目的分析贵州医科大学附属医院肛肠外科Ⅲ期~Ⅳ期结直肠癌患者经多学科协作组(multi-disciplinary team, MDT)诊疗的病例资料,探讨经MDT模式后患者的疗效。方法回顾性分析2018年1月至2018年12月我院肛肠外科确诊的结直肠癌患者经MDT讨论后进行相应处理的情况。将实行MDT的目的:诊断、治疗、诊断+治疗、回顾+治疗、回顾+诊断+治疗。根据患者后期治疗效果反馈,将MDT决策执行情况分为:执行、未执行,并记录执行效果,执行效果包括:达到预期、未达预期和不详,对数据进行统计学分析。结果对40例Ⅲ期~Ⅳ期结直肠癌患者确定了50种MDT方案,随访结果显示,33例患者执行了MDT的治疗方案,其中30例达到预期患者数量,2例未达到预期效果,1例患者失联,执行MDT诊疗方案的患者预后明显优于未执行的患者,差异有统计学意义(X^(2)=9.57,P<0.05)。结论结直肠癌中晚期患者经MDT模式确定的诊治方案有重要价值,值得进一步完善深入研究及推广。