α硫辛酰胺抑制糖尿病大鼠肾组织炎症和4型胶原蛋白的产生及其机制

目的通过观察糖尿病(DM)大鼠肾组织中Notch2、含pyrin结构域NOD样受体家族3(NLRP3)的表达情况及α硫辛酰胺(ALM)对Notch2、Toll样受体4(TLR4)、NLRP3和胶原蛋白表达的影响,初步探讨ALM抗糖尿病肾组织炎症和肾纤维化的可能保护机制。方法以链脲佐菌素(STZ)复制DM大鼠模型,分为DM组和ALM组,同时设正常对照组(NC组),每组8只。DM造模成功2周后,ALM组用ALM[150 mg/(kg·d)]进行灌胃,治疗6周后处死大鼠。HE和Masson染色观察肾组织形态变化,免疫组织化学染色观察肾组织中Notch2、TLR4、NLRP3的表达和定位,Western blot法检测肾组织中Notch2、TLR4、NLRP3和4型胶原蛋白(Col4)的蛋白水平,ELISA检测肾组织匀浆中炎性因子白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的水平。采用Spearman秩相关检验对Notch2与TLR4、NLRP3蛋白表达进行相关性分析。结果 DM组的血糖、24 h尿蛋白量、肾脏指数、总胆固醇、甘油三酯均显著高于NC组;与DM组相比,ALM组肾脏指数、24 h尿蛋白量明显降低,而血糖无明显改变。与NC组相比,DM组大鼠肾组织中Notch2、TLR4、NLRP3和Col4的蛋白水平增加,ALM组大鼠肾组织中的上述蛋白水平明显低于DM组; ALM组大鼠肾组织匀浆IL-6和TNF-α的水平较DM组明显降低。相关性分析显示在DM组以及ALM组中Notch2与TLR4的表达均呈显著正相关,Notch2与NLRP3的表达也均呈显著正相关。结论 ALM抑制DM大鼠肾组织的炎症和Col4的产生,与Notch2抑制TLR4和NLRP3的活化有关。

超高效液相色谱法检测花生油中4种黄曲霉毒素的含量

目的建立一种超高效液相色谱法测定花生油中4种黄曲霉毒素(B_1、B_2、G_1和G_2)含量的方法。方法花生油样品经甲醇-水提取后,静置2 min^3 min,过滤后稀释,用免疫亲和柱净化、浓缩。采用BEH C_(18)色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm),考察了不同流动相等度和梯度洗脱法,优化后的方法以甲醇-水溶液为流动相进行梯度洗脱,设定激发波长为360 nm、发射波长为450 nm进行检测。结果空白样品无干扰,4种黄曲霉毒素B_1、B_2、G_2在0.10μg/L^50.00μg/L,G_1在0.50μg/L^50.00μg/L时,线性关系良好,相关系数(r)均>0.999,最低检出限为0.04μg/kg^0.25μg/kg,相对标准偏差(RSD)为1.13%~8.82%,回收率为87.4%~104.6%。结论本方法简便、快速、准确,检出限低,干扰小,无需衍生,可用于粮油食品中黄曲霉毒素的检测。