微课教学在药理学课程改革中的应用

药理学是医药高等院校重要的基础课程。随着微课的兴起及其重要性的日益凸显,将微课教学与传统教学有机地结合,探索药理学的课程改革,提高学生的学习兴趣。文章通过微课应用于药理学教学的必要性、微课教学结合传统教学的课程体系构建以及微课资源库的建设等几个方面探讨微课教学在药理学课程改革中的应用。

卡维地洛对ox-LDL诱导的人主动脉内皮细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究卡维地洛(CAR)对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用。方法:体外培养HAECs,分为对照组、模型组、CAR高剂量组(CAR H组)和CAR低剂量(CAR L组),即对照组(无血清DMEM)、模型组(200 mg/L ox-LDL 100μL)、CAR高剂量组(CAR H组,200 mg/L oxLDL及1×10-5mol/L CAR各100μL)及CAR低剂量组(CAR L组,200 mg/L ox-LDL及1×10-6mol/L CAR各100μL),后两组CAR预保护1 h后,加入ox-LDL作用24 h;采用MTT法分析细胞存活率,吉姆萨(Giemsa)染色后观察HAECs形态;酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养液中一氧化氮(NO)含量及乳酸脱氢酶(LDH)外漏量。结果:模型组与对照组相比,细胞发生严重的病理形态学改变,细胞存活率及NO含量显著降低,LDH外漏量显著升高(P<0.05),CAR H组和CAR L组细胞接近对照组,细胞存活率及NO含量较模型组显著提高,LDH外漏量显著降低(P<0.05)。结论:CAR能减少ox-LDL诱导的HAECs损伤,其作用可能与NO系统有关。

反相-高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度

万古霉素是三环糖肽类抗生素,对革兰氏阳性菌有强大杀菌作用,是治疗耐药革兰阳性菌特别是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）所致重症感染的首选药物。万古霉素治疗窗窄,谷浓度〈10mg/L时易增加诱导耐药风险,导致治疗失败[1-2],而谷浓度〉20mg/L时肾损害发生率显著增加[3]。

“应用型、服务型”药学人才培养体系改革探索

我国传统药学教育由于受到前苏联模式的影响,人才培养以制药及药物研发为核心。随着医疗模式的转变、医药产业的发展和公众健康需求的提升,传统"化学-药学"培养模式下的药学人才不能满足社会发展的需要,掌握生物医学、药物应用知识的药学服务型人才正成为社会的紧缺人才。本文阐述了培养"应用型、服务型"药学人才的重要性,根据医学学科发展特点和社会需求,从培养目标、教学内容、教学方法等方面对药学人才培养体系的改革进行了初步探讨,提出优化课程设置体系、加强教学基地建设以及增加实践课程比重等措施,为培养新型药学人才提供建议与思路。

民族药艳山姜提取物对实验性动脉粥样硬化大鼠血管舒缩因子的影响

研究采用连续给予高脂饲料24周建立实验性动脉粥样硬化大鼠模型,分别检测大鼠血管活性物质NO、ET-1、AngⅡ、TXA2和6-K-PG的含量或活性,并计算血管舒缩因子NO/ET-1比值、血栓因子TXA2/6-K-PG的平衡比值,探讨民族药艳山姜提取物对实验性动脉粥样硬化大鼠血管舒缩活性因子的调控作用.实验结果表明,艳山姜提取物能明显升高大鼠血清NO和6-K-PG含量,降低ET-1、AngⅡ和TXA2含量,分别改善血管舒缩因子NO/ET-1及血栓因子TXA2/6-K-PG的比值,恢复各血管舒缩因子之间的平衡失调.上述结果提示,艳山姜提取物具有较好的调节血管舒缩功能,保护血管内皮功能,有效阻止AS进一步发生和发展的作用.

小柴胡汤对伊立替康致迟发性腹泻模型小鼠血便的防治作用

目的:考察小柴胡汤对伊立替康(CPT-11)致迟发性腹泻模型小鼠血便的防治作用。方法:将40只小鼠随机分为正常对照组(等体积生理盐水)、模型对照组(等体积生理盐水)、小柴胡汤组(1 500 mg/kg,以生药计)和洛哌丁胺组(阳性对照,0.533 3mg/kg),ig给药,每天1次,连续17 d。于实验第4~10天,除正常对照组外,其余各组小鼠均ip CPT-11诱导迟发性腹泻。测定小鼠体质量变化、血便率并观察小鼠大肠、小肠黏膜组织病理改变。结果:给药17 d后,造模组小鼠的体质量较正常对照组均明显下降(P<0.05),但小柴胡汤组小鼠体质量高于模型对照组(P<0.05)。实验第11~17天,小柴胡汤组和洛哌丁胺组小鼠血便率均显著低于模型对照组(P<0.01),且小柴胡汤组小鼠血便率低于洛哌丁胺组(P<0.05)。病理观察结果显示,模型对照组小鼠大肠和小肠黏膜上皮细胞伴明显弥漫性坏死脱落和炎症细胞浸润,给药组小鼠肠黏膜组织均趋于正常。结论:小柴胡汤能有效降低血便率、改善肠黏膜组织损伤,对CPT-11致小鼠血便具有防治作用,且效果优于阳性药物洛哌丁胺。

清热、益气及活血化瘀类中药对血管内皮细胞保护作用的研究进展

血管内皮细胞作为连续被覆在全身血管内膜的一层细胞群,不仅是血液与血管平滑肌之间的生理屏障,而且是高度活跃的代谢库,能够合成多种血管活性物质,如从小分子的一氧化氮（NO）到大分子内皮素（ET）及缓激肽等,这些血管活性物质对血管的舒缩功能与血液流动性有不可替代的调节作用,具有重要的生理功能[1]。

复方对乙酰氨基酚金银花胶囊的抗炎镇痛解热作用

目的:研究复方对乙酰氨基酚金银花胶囊的抗炎、镇痛和解热作用。方法:采用小鼠腹腔毛细血管通透性实验及角叉菜胶致大鼠足肿胀实验观察复方对乙酰氨基酚的抗炎作用,热板法和冰醋酸致痛扭体法观察镇痛作用,用10%的干酵母混悬液致大鼠发热模型研究其解热作用。结果:复方对乙酰氨基酚金银花胶囊对小鼠腹腔毛细血管通透性和大鼠足肿胀有显著的抑制作用,热板法实验结果提示给药后1、2、3及5 h复方对乙酰氨基酚金银花胶囊均能显著延长小鼠疼痛反应的潜伏期,痛阈值提高,明显减少小鼠的扭体反应数;对酵母致大鼠发热有明显的降低体温的作用。结论:复方对乙酰氨基酚金银花胶囊具有抗炎、镇痛和解热作用。

姜黄素对宫颈癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用

目的:探讨姜黄素对宫颈癌Hela细胞荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法:40只雌性裸鼠腋下接种Hela细胞构建荷瘤模型,随机分为姜黄素低、中、高剂量组、5-氟尿嘧啶(5-Fu)组及模型组,分别腹腔注射压榨法提取姜黄素60、120、240 mg/kg,5-Fu 20 mg/kg及等量生理盐水,0.2 m L/只,隔天1次,连续给药10次;观察肿瘤生长情况、抑瘤率、病理组织学改变,检测细胞周期及凋亡率。结果:姜黄素低、中、高剂量组的抑瘤率分别为20.14%,32.43%,59.56%,呈剂量依赖性升高;病理切片可见姜黄素给药组细胞核固缩、裂解,肿瘤组织内有炎性细胞浸润,纤维结缔组织增生明显,血管数量减少;姜黄素各给药组的肿瘤细胞凋亡率为12.79%,16.23%,21.90%,较模型组明显增加(P<0.05),且肿瘤细胞主要被阻滞于G2/M期。结论:压榨法提取姜黄素可显著抑制宫颈癌裸鼠移植瘤的增殖,其机制可能与姜黄素诱导癌细胞凋亡有关。

基于p-Akt/eNOS信号的阿司匹林对ox-LDL诱导的人主动脉内皮细胞损伤的保护作用

目的:研究阿司匹林对氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导的人主动脉内皮细胞(HAEC)损伤的保护作用及对p-Akt/eNOS信号系统的影响。方法:体外传代培养HAEC,分为空白对照组、模型组及阿司匹林组,建立ox-LDL(150 mg/L,24 h)诱导的HAEC细胞损伤模型,阿司匹林组在建模前用阿司匹林预处理1 h,利用MTT法检测HAEC存活率、LDH外漏率分析细胞损伤,测定细胞培养上清液一氧化氮(NO)含量,蛋白印迹法及RTPCR方法检测p-Akt、eNOS蛋白及mRNA表达。结果:与空白对照组比较,ox-LDL诱导损伤后细胞MTT值显著降低,LDH外漏明显增加,内皮细胞NO分泌与释放减少,p-Akt、eNOS的蛋白及mRNA表达下调,阿司匹林干预后能显著改善上述指标。结论:阿司匹林对ox-LDL诱导的HAEC损伤具有保护作用,其机制可能与其调控激活p-Akt/eNOS信号通路密切相关。

阿托伐他汀对脂多糖诱导人主动脉内皮细胞细胞间黏附分子-1表达的影响

目的:观察阿托伐他汀(Atv.)对脂多糖(LPS)诱导人主动脉内皮细胞(HAECs)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响,并探讨其分子机制。方法:用1 mg/L LPS复制HAECs损伤模型,通过MTT和乳酸脱氢酶(LDH)外漏率实验观察5μmol/L Atv.对LPS诱导HAECs损伤的保护作用,采用RT-PCR法检测Atv.对ICAM-1 mRNA表达的影响,Western blot检测Atv.对ICAM-1、IκBα及NF-κB蛋白表达水平的影响。结果:与LPS组比较,Atv.能有效抑制LPS诱导的HAECs损伤,细胞活力增加(P<0.01),LDH外漏率减少(P<0.01),Atv.可抑制LPS诱导的ICAM-1 mRNA(P<0.05)和蛋白表达上调(P<0.01),还可抑制LPS诱导的IκBα蛋白表达水平的降低和phospho-NF-κB p65蛋白表达水平的升高(P<0.01)。结论:阿托伐他汀对LPS诱导HAECs损伤具有保护作用,并有效抑制ICAM-1的表达,该作用与抑制IκBα降解及NF-κB p65磷酸化有关。

黔产辣蓼的显微鉴别与金属元素的检测研究

目的通过显微鉴别的方法对黔产辣蓼的根、茎、叶等显微特征进行对比研究,测定其金属元素的含量,为其质量控制及开发利用提供实验依据。方法采用常规的显微技术分别观察辣蓼的根、茎、叶的组织结构,同时采用电感耦合发射光谱法(ICP-OES)测定辣蓼中22种金属元素含量。结果鉴定了黔产辣蓼的显微特征,黔产辣蓼叶表面可见腺毛与非腺毛,气孔多为平轴式,偶见不等式或不定式,副保卫细胞常为2～4个。根横切面可见维管束为有限外韧型;茎横切面中柱鞘纤维束断续排列成环,韧皮部狭窄,髓部薄壁细胞内含草酸钙簇晶。检测出辣蓼中含有丰富的Ca、Mg、Al、K、Fe、Mn、Ag、Zn等元素,精密度RSD为0.244%～2.681%,辣蓼中的Pb、As、Cu、Hg、Cd等有害重金属元素含量均未超标,符合2015年版中国药典的质控标准。结论黔产辣蓼中有害重金属含量均符合《药用植物及制剂进出口绿色行业标准》要求,本实验从显微鉴定及重金属元素的测定方面为黔产辣蓼的药用安全性评价提供实验依据,同时也为辣蓼的综合开发利用提供理论基础。

黔产莪术油的品质分析

该研究应用比重瓶法、折光率测定法、旋光度测法及电感耦合等离子体发射光谱法,分别对莪术油的相对密度、折光率、比旋度、重金属含量进行了测定,同时采用HPLC法测定莪术油中成分含量以及建立指纹图谱进行相似度的比较分析。结果表明:黔产莪术油的相对密度为0.987 0,比旋度为+24.146 8°,折光率为1.509,指纹图谱与中药制剂指纹图谱对照,相似度为0.976,总重金属含量总和<10 mg·kg^(-1),砷盐未检测出。检测的各项指标均符合2015版中国药典莪术油项下的相关规定,该研究方法可行、数据可靠。该研究结果确认了黔产莪术油有较高的安全性及良好的品质,可作为药材原料使用,为黔产莪术油的综合开发利用及质量控制提供了科学依据。

黔产莪术和种子中提取挥发油的具体成分异同比较

目的研究黔产莪术和莪术种子中挥发油质控成分的检定方法与含量范围。方法建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定黔产莪术与莪术种子中吉马酮和呋喃二烯含量方法:色谱柱为C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱(0~20 min,60%A^95%A;20~35 min,95%A),流速为1 ml/min,检测波长为216 nm,柱温35℃,进样量10μl。结果吉马酮和呋喃二烯的检测浓度分别在4.18~83.6μg/m L(r=0.9999),10.21~204.2μg/ml(r=1.0000)范围呈现良好的线性关系;吉马酮和呋喃二烯的平均回收率(n=6)分别103.2%(RSD=1.44%,102.2%(RSD=1.28%),重复性实验(n=6)RSD分别为0.90%,2.10%。结论黔产莪术与莪术种子中提取的挥发油的质量,可以用挥发油中所含吉马酮和呋喃二烯含量进行控制。控制范围是:黔产莪术挥发油中吉马酮,呋喃二烯含量依次是85.87%~100.10%,59.07%~78.92%;黔产莪术种子挥发油中吉马酮,呋喃二烯含量依次是65.69%~80.47%,59.94%~68.41%。

202例次万古霉素血药浓度监测与临床应用分析

目的分析万古霉素血药浓度监测结果及临床应用情况,为临床合理用药提供参考。方法采用反相-高效液相色谱法测定万古霉素血药浓度,对万古霉素血药浓度监测结果及相关用药信息进行比较分析。结果万古霉素谷浓度监测202次,平均血药谷浓度（14.36±8.12）mg/L,浓度小于10 mg/L的有68例次（33.66%）,在10~20 mg/L的有100例次（49.51%）,大于20 mg/L的有34例次（16.83%）;肾功能正常与异常组间,血药谷浓度有显著性差异;用药前后,各项肾功能指标无显著性差异。结论万古霉素个体差异大,需加强血药浓度监测;针对肾功能异常患者,临床医生和药师需审慎评估给药剂量;临床医生应根据血药浓度及时调整用药方案,实现个体化给药。

氧化苦参碱下调p38MAPK磷酸化及改善胶原沉积抑制TGF-β1诱导的CFBs增殖

目的:研究氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对TGF-β1诱导心肌成纤维细胞(CFBs)增殖的作用,并分析可能的作用机制。方法:试验分为空白对照组(无血清DMEM)、模型组(20μg·L-1TGF-β1)、OMT低剂量组(OMT-L组,1.89×10-4mol·L-1)、OMT中剂量组(OMT-M组,3.78×10-4mol·L-1)、OMT高剂量组(OMT-H组,7.56×10-4mol·L-1)和SB203580(p38MAPK阻断剂,1×10-5mol·L-1)。免疫细胞化学法鉴定CFBs中波形蛋白,测定TGF-β1诱导CFBs 24 h后α-SMA的表达情况;采用MTT法分析CFBs增殖的抑制作用;苦味酸天狼星红染色观察Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的沉积;Western blot分析p38MAPK,p-p38MAPK,Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果:MTT结果提示3.78×10-4,7.56×10-4mol·L-1的OMT对TGF-β1诱导的CFBs异常增殖具有抑制作用(P<0.01);α-SMA免疫细胞化学实验提示OMT能够抑制CFBs-my FBs转换;苦味酸天狼星红染色显示OMT能明显减少Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的沉积;Western blot表明OMT可以显著抑制TGF-β1诱导Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的沉积及p38MAPK的磷酸化(P<0.01)。结论:OMT可抑制TGF-β1诱导CFBs增殖的作用并抑制相关胶原蛋白的表达,改善心肌纤维化,其机制可能与抑制p38MAPK磷酸化有关。

黔产莪术不同炮制品中挥发油成分GC-MS分析

本研究利用GC-MS法分析比较不同炮制品的黔产莪术中挥发油含量及其化学成分的差别。本实验通过水蒸气蒸馏法提取不同炮制类型的黔产莪术中挥发油类成分,采用GC-MS法对黔产莪术挥发油的化学成分进行分析,通过标准谱库检索分析计算,确定黔产莪术挥发油中所含的主要成分,并比较四者所含化学成分的异同。结果显示,从4种饮片中共检测出78种化学成分,其中鲜品莪术挥发油中有58个化学成分,生切饮片挥发油中有53个化学成分,蒸制饮片挥发油中有52个化学成分,醋炙莪术挥发油中有51个化学成分。由此得出结论,4种挥发油中的主要成分为单萜和倍半萜类,但是不同炮制法制备的黔产莪术中挥发油的含量及其成分组成存在较大的差异。本研究将为黔产莪术加工炮制及综合开发利用提供指导。

莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达的影响

目的探讨莪术油对直肠癌SW1463细胞株增殖、凋亡及相关蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2表达的影响。方法水蒸气蒸馏法提取黔产莪术挥发油,配制成40、80、120、160、200、240、280 mg/L浓度梯度,干预SW1463细胞24、48、72 h,MTT法检测莪术油对SW1463细胞的增殖抑制率;Giemsa染色法观察莪术油对SW1463细胞凋亡形态的影响;蛋白免疫印迹法(Western blotting)检测Capase-3、Bax与Bcl-2蛋白表达。结果莪术油对SW1463细胞的增殖有明显抑制作用,并呈现时间-剂量相关性,24、48、72 h的半数抑制浓度(IC50)分别为144.33、134.11、120.04 mg/L;Giemsa染色可见细胞明显的凋亡形态学特征;莪术油干预SW1463细胞24 h后,与对照组比较,Caspase-3、Bax蛋白表达显著上调、Bcl-2蛋白表达显著下调(P<0.05)。结论莪术油能明显抑制SW1463细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与上调Caspase-3和Bax蛋白表达、下调Bcl-2蛋白表达相关。

阿司匹林对脂多糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用及NF-κB、COX-2表达的影响

目的研究阿司匹林对脂多糖(LPS)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)损伤的保护作用,并进一步阐明其对核因子-κB(NF-κB)及环氧合酶-2(COX-2)信号的调控。方法用LPS复制HAECs损伤模型,用MTT法、乳酸脱氢酶(LDH)外漏率分析HAECs的损伤,Western bloting法分析NF-κB激活、COX-2蛋白的表达;RT-PCR检测细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、COX-2 mRNA表达的影响。结果阿司匹林可显著改善LPS导致的细胞活力下降及LDH外漏率增加;抑制ICAM-1、COX-2 mRNA及蛋白表达的上调;抑制磷酸化NF-κB p65及IκBα的增加。结论阿司匹林对LPS诱导的血管内皮细胞炎性损伤具有保护作用,其作用机制可能与稳定IκB、抑制NF-κB p65磷酸化及COX-2的表达有关。

阿司匹林对人主动脉血管内皮细胞炎性损伤的保护作用

目的:研究阿司匹林(aspirin,Asp)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导人主动脉内皮细胞(human aortic endothelial cells,HAECs)损伤的保护作用,并进一步阐明其对一氧化氮合酶(NOS)及血管内皮生长因子(VEGF)及其相关受体信号的调控。方法:LPS建立HAECs损伤模型。苏木精-伊红(HE)染色观察细胞形态;MTT法、划痕实验分析HAECs损伤修复能力;ELISA测定一氧化氮(NO)含量;Western blot检测内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、VEGF和血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2)蛋白表达。结果 :给药12 h后Asp明显改善LPS(5 mg·L^(-1))导致的细胞损伤、提高修复能力(P<0.05),并上调NO分泌量及VEGF、VEGFR-2的蛋白表达(P<0.01);升高eNOS蛋白的表达(P<0.01)。而给药24 h后阿司匹林显著下调LPS导致的NO分泌量及iNOS、VEGF、VEGFR-2的蛋白表达升高,同时升高eNOS蛋白的表达(P<0.01)。结论:阿司匹林对LPS诱导的血管内皮细胞炎性损伤的保护作用与调节NOS/NO和VEGF及其受体的动态平衡密切相关。