HIF-1α对脑缺血再灌注损伤细胞凋亡及凋亡相关基因的研究进展

缺氧诱导因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)是一种在低氧条件下发挥作用的重要转录调节因子,HIF-1蛋白α亚基受细胞内氧分压的影响,常氧条件下HIF-1α被降解而表达很少,低氧条件下HIF-1α被激活而大量表达,通过调节其下游多种效应分子的转录和表达而发挥作用,HIF-1的生物学功能由HIF-1α决定。脑缺血再灌注时可导致脑组织缺血缺氧,诱导HIF-1α表达上调,有助于机体更好地耐受低氧环境而发挥脑保护作用。本文就HIF-1α对其重要靶基因Bcl-2、Bax及Caspase-3在脑缺血再灌注损伤中的表达和调节作用做一综述,为临床以HIF-1α基因作为靶点治疗脑缺血再灌注损伤提供参考。

丰富环境对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能和缺血半暗带区葡萄糖代谢的影响

目的探讨丰富环境对脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能及缺血半暗带区葡萄糖代谢的影响。方法成年雄性Sprague-Dawley大鼠72只随机分为假手术组(n=24)、模型组(n=24)和丰富环境组(n=24)。后两组采用改良Longa法制备大鼠脑缺血60 min再灌注模型。丰富环境组造模后立即饲养在丰富环境中。分别于造模前及造模后1 d、7 d、14 d、21 d、28 d采用改良神经损害严重程度评分(mNSS)进行评估。术后1 d和28 d,神经功能评估后各组取12只,HE染色观察脑组织病理结构,逆转录实时定量聚合酶链反应(RT-qPCR)和Western blotting检测缺血半暗带缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-双磷酸酶3(PFKFB3)mRNA和蛋白表达;高效液相色谱法测定缺血半暗带ATP、ADP和AMP变化,计算能量负荷(EC)。结果术后14 d后,丰富环境组mNSS评分持续低于模型组(P<0.05)。术后1 d,与假手术组相比,模型组和丰富环境组缺血半暗带细胞出现水肿、核固缩边缘化、成空泡状排列等病理改变,ATP含量及EC下降(P<0.05),HIF-1α、GLUT1和PFKFB3 mRNA和蛋白表达增高(P<0.05)。术后28 d,与模型组相比,丰富环境组病理改善,缺血半暗带区ATP含量及EC增高(P<0.05),HIF-1α、GLUT1和PFKFB3 mRNA和蛋白表达增高(P<0.05)。结论丰富环境可促进脑缺血再灌注损伤大鼠神经功能恢复,可能与上调HIF-1α及其下游基因GLUT1和PFKFB3表达,改善葡萄糖代谢有关。

肯尼迪病3个家系的临床、基因型和遗传特征分析

目的分析3个肯尼迪病（Kennedy disease,KD）家系的临床、基因及遗传特征。方法收集3个KD家系患者的详细病史、体格检查、血生化及电生理检查等资料,用基因分析的方法测定先证者及家族成员雄性激素受体（androgen receptor,AR）基因的CAG重复序列拷贝数。结果 3个家系发现的5例KD患者主要临床表现为四肢肌肉萎缩、无力和肢体震颤,舌肌萎缩、纤颤;实验室检查发现肌酸激酶升高;肌电图检查可见失神经电位;神经传导速度检查提示感觉神经受损。KD患者AR基因CAG重复次数在42～49。3个家系的遗传方式符合X连锁隐性遗传。结论 KD主要影响男性患者,病情缓慢进展,主要表现为脊髓和延髓肌肉的萎缩和无力。基因检测有助确诊,并可检测出携带者,以进行家系遗传分析。

细胞焦亡与缺血性脑卒中的关系研究进展

缺血性脑卒中(ischemic stroke,IS)是一种严重危害人类健康的疾病,其发病机制仍不清楚,治疗方法有限,迫切需要探索新的干预方法。细胞焦亡是近年来发现的一种促炎性调控细胞死亡,参与了IS的发病机制,抑制细胞焦亡可减轻IS后脑损伤。现就细胞焦亡的发生机制、其参与IS的发病机制以及靶向细胞焦亡治疗IS的研究进展进行综述。

重复经颅磁刺激对缺血性脑卒中患侧上肢运动障碍治疗效果的荟萃分析

目的应用荟萃分析方法评价重复经颅磁刺激（rTMS）对缺血性脑卒中患者瘫痪上肢运动功能障碍的疗效。方法使用计算机检索自建库至2015年10月间公开发表在美国国立医学图书馆生物医学信息检索系统（MEDLINE／PubMed）（1966年1月至2015年10月）、Cochrane临床对照试验中心注册库（2015年10月）、荷兰医学文摘（EMBASE／SCOPUS）（1974年1月至2015年10月）以及中国生物医学文献数据库（CBMdisc）（1978年1月至2015年10月）、中国知网（CNKI）（1979年1月至2015年10月）和万方数据库（Wanwfang database）（1989年1月至2015年10月）中关于重复经颅磁刺激改善缺血性脑卒中后患者瘫痪上肢运动功能障碍的随机对照临床试验研究（RCT）。结果通过检索数据库，本文最终共纳入了9篇文献，共包括289例患者。对结果分析发现rTMS对缺血性脑卒中后瘫痪侧上肢运动功能恢复差异有统计学意义（SMD0．43，95％CI 0．19—0．67，P=0．0004）。通过对高／低频rTMS的进一步亚组分析，低频rTMS显示出明显的相关性（SMD0．50，95％CI 0．14～0．85，P=0．007），高／低频rTMS亚组分析结果提示低频rTMS对缺血性脑卒中后瘫痪侧上肢运动功能恢复可能较高频rTMS更有帮助。所纳入的9篇文献均报告了rTMS治疗过程中可能出现的不良反应，在所有这些纳入的患者中只有3例患者出现身体不适。结论本研究提示低频rTMS可能对缺血性脑卒中患侧上肢运动功能恢复有积极作用。rTMS在缺血性脑卒中后运动障碍的临床应用是相对安全的。iTBS可能是一种有效的干预。

缺氧诱导因子1α对脑缺血再灌注损伤后热休克蛋白90及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3和9表达的影响

缺氧诱导因子1α（HIF-1α）是一种转录活化因子，在低氧情况下充当基因表达使者，无论是全身缺氧、脑半球缺血、脑局灶性缺血，脑组织中均有HIF1α的激活。脑梗死后缺血缺氧条件可诱导HIF-1α表达，其可与下游靶基因的缺氧诱导原件结合，通过调节其下游靶基因的表达，使缺氧的组织和细胞耐受低氧环境而发挥脑保护作用。本文对HIF-1α及其重要靶基因在急性脑卒中的表达做一综述，为临床基因治疗提供理论依据。

大鼠局灶性脑缺血再灌注后促红细胞生成素蛋白表达的变化

目的探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后脑组织促红细胞生成素（EPO）蛋白表达的变化。方法将SD雄性大鼠随机分为3组：正常组、假手术组和缺血再灌注组，缺血再灌注组大鼠采片j局灶性脑缺【0【再灌注模型。在缺血2h再灌注24、48、72和96h对大鼠进行神经功能缺火体征评分，采用免疫荧光标记法和WesternBlot法检测大鼠脑组织EPO蛋白表达的变化。结果与缺血阿灌注24h神经功能缺失体征评分（3．00±0．22）分相比较，随着大鼠脑缺血再灌注时间（48h、72h、96h）的延K，神经功能缺失体征评分越高[（3．40±0．32）分、（3．60±0．17）分、（3．70±0．21）分，均P〈0．051。免疫荧光标记法和WesternBlot法结果分别显示，大鼠局灶性脑缺血再灌注24hEPO蛋白开始出现表达（0．36±0．05、140．20±0．30），48h明显增多（1．09±0．10、145．40±0．16），72h达高峰（1．29±0．09、156．23±0．12），96h开始下降（0．98土0．04、141．56土0．36）。结论脑缺血再灌注损伤nI诱导EPO蛋白表达增强，提示EPO可能对神经细胞缺血缺氧损伤具有保护作蹦。

大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后半胱氨酸蛋白酶9及热休克蛋白-90的表达

目的探讨大鼠半胱氨酸蛋白酶9（Caspase-9）及热休克蛋白-90（HSP-90）的表达。方法将200~250g的SD雄性大鼠随机分为正常对照组、假手术组和局灶性脑缺血再灌注组，根据各组的再灌注时间，将每个组分为4个亚组，即6、24、48、和72h四个亚组；采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注的损伤模型，行酶联免疫学检测（ELISA）法检测大鼠Caspase-9及HSP-90的表达的变化。结果ELISA法观察大鼠脑细胞Caspase-9、HSP-90含量的变化，Caspase-9及HSP-90表达在假手术组为弱表达，在局灶性脑缺血再灌注组的表达在24～48h达高峰，72h开始下降。假手术组与正常对照组相比结果差异无统计学意义。脑缺血再灌流后，随着时间的延长凋亡细胞数逐渐增加，至48h达高峰；在缺血半暗带区，再灌流后神经细胞HSP-90和Caspase-9表达逐渐增强，到48h阳性细胞数目最多。结论脑缺血再灌流后神经细胞凋亡是一个动态的渐进过程。HSP-90和Caspase-9基因表达在介导细胞凋亡过程中起重要作用。