纳米技术在嵌合抗原受体T细胞肿瘤免疫治疗中的应用进展

肿瘤免疫治疗主要通过解除免疫抑制作用与增强免疫应答反应来实现对其有效治疗。纳米技术能够提高免疫刺激分子的聚集度与作用力,在完成局部免疫调节的基础上有效治疗癌症。嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)是肿瘤免疫治疗中的一种有力手段,能够对肿瘤患者的T细胞进行转化处理,令其成为可表达嵌合肿瘤细胞表面抗原受体的CAR-T细胞,随后将相应的CAR-T细胞回输至肿瘤患者体内,并通过特异性识别、杀伤肿瘤细胞的方式,有效杀灭肿瘤病毒。将纳米技术应用至CAR-T肿瘤免疫治疗中,有望提高肿瘤免疫治疗的疗效与安全性。本文就纳米技术在CAR-T肿瘤免疫治疗中的应用进展进行综述。

MiR-300对骨肉瘤细胞增殖与凋亡作用研究

目的骨肉瘤具有局部高度侵袭能力以及快速转移潜能,因而致死率较高。研究指出,miR-300的表达异常与多种肿瘤的发病相关。miR-300对骨肉瘤细胞是否存在调控作用却属未知。本研究探讨miR-300对骨肉瘤细胞Saos-2增殖与凋亡调控的作用。方法将miR-300转染进骨肉瘤细胞Saos-2中,实现miR-300在Saos-2细胞内的高表达。通过荧光定量PCR测定miR-300在细胞内的表达水平;分别采用MTT活细胞测试,细胞周期实验和克隆形成实验检测骨髓瘤细胞的增殖情况;通过蛋白质印迹法测定Bcl-2、Bax和Bak,裂解型Caspase-3蛋白水平来鉴定细胞凋亡。结果转染miR-300的Saos-2细胞,其miR-300表达量为对照组的(10.23±1.04)倍,t=3.613 8,P=0.000 6。MTT实验结果显示,在转染后24和48h,miR-300组的Saos-2相对活细胞百分比相对对照组分别为[(174.35±28.46)%,t=2.219,P=0.03]和[(225.73±24.62)%,t=2.738,P=0.008]。miR-300组Saos-2细胞处在G1期的百分比为39.42%,低于对照组的47.58%,t=2.366,P=0.021;而处在G2期的细胞百分比为19.12%,显著高于对照组的10.55%,t=2.987,P=0.004。miR-300组Saos-2细胞克隆形成率为(52.53±30.21)%,显著高于对照组的(24.67±2.05)%,t=2.711,P=0.008 6。miR-300组Saos-2细胞中Bax、Bak和裂解型Caspase-3表达水平分别为对照组的(0.25±0.02)倍(t=2.785,P=0.007)、(0.31±0.03)倍(t=3.223,P=0.002)和(0.36±0.03)倍(t=3.006,P=0.003 8),差异有统计学意义。Bcl-2蛋白水平为对照组的(6.32±0.57)倍,t=3.218,P=0.002。转染miRZip lent-shMiR-300的Saos-2细胞,其miR-300数量为对照组的(0.28±0.03)倍,t=3.531,P=0.000 78。转染24h后,miR-300组Saos-2相对活细胞数为对照组的(64.46±5.32)%,t=2.324,P=0.024;48h后为对照组的(48.14±4.38)%,t=3.009,P=0.004。miR-300组Saos-2细胞处在G1期的百分比为55.71%,高于对照组的46.78%,t=2.108,P=0.039;处在G2期的细胞百分比为2.81%,低于对照组的11.46%,t=3.224,P=0.002。miR-300组的Saos-2细胞的克隆形成率为(17.63±3.89)%,显著低于对照组的(26.84±2.94)%,t=2.989,P=0.004。miR-300组Saos-2细胞中Bax表达水平为对照组的(6.25±4.23)倍,t=3.138,P=0.002 6;Bak表达水平为对照组的(6.03±4.27)倍,t=3.395,P=0.001 2;裂解型Capase-3表达水平为对照组的(5.35±0.37)倍,t=3.017,P=0.003 7;而Bcl-2蛋白水平为对照组的(0.36±0.02)倍,t=2.769,P=0.007 4。结论 miR-300在骨肉瘤细胞的增殖与凋亡调控中具有重要作用,抑制miR-300表达可以一定程度上减少骨髓瘤细胞的增殖,促进其凋亡,为骨肉瘤的病理机制研究提供了新研究方向。