长春新碱调控RAS相关结构域蛋白2A基因去甲基化抑制卵巢癌细胞增殖

目的探讨长春新碱调控RAS相关结构域蛋白2A(RASSF2A)去甲基化对卵巢癌细胞增殖的影响。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为不同浓度长春新碱组,将慢病毒转染至LV-NC组(转染LV-NC慢病毒液,感染复数为70)和LV-RASSF2A组(转染LV-RASSF2A慢病毒液,感染复数为70)SKOV3细胞,空白组加入等量磷酸盐缓冲液。采用CCK-8法检测6.25 nmol/L长春新碱组、12.5 nmol/L长春新碱组、25 nmol/L长春新碱组、50 nmol/L长春新碱组和100 nmol/L长春新碱组SKOV3细胞的活力,集落形成实验检测SKOV3细胞的增殖能力,流式细胞术检测SKOV3细胞的凋亡情况,逆转录聚合酶链反应检测人正常卵巢上皮细胞IOSE-29和SKOV3细胞中RASSF2A mRNA的表达水平,Western blot检测IOSE-29和SKOV3细胞中RASSF2A蛋白的表达水平,甲基化特异性聚合酶链反应检测IOSE-29和SKOV3细胞中RASSF2A甲基化和去甲基化水平。结果6.25 nmol/L长春新碱组、12.5 nmol/L长春新碱组、25 nmol/L长春新碱组、50 nmol/L长春新碱组和100 nmol/L长春新碱组SKOV3细胞的存活率分别为(87.19±4.49)%、(73.67±8.62)%、(66.35±6.04)%、(50.32±6.00)%和(34.92±6.11)%,均低于对照组[(100.46±4.69)%,均P<0.05]。培养48 h时,长春新碱半数抑制浓度为50.02 nmol/L。12.5 nmol/L长春新碱组、25 nmol/L长春新碱组和50 nmol/L长春新碱组SKOV3细胞的增殖率分别为(41.70±2.21)%、(32.15±1.80)%和(23.00±2.01)%,均低于对照组[(100.78±5.66)%,均P<0.05)];SKOV3细胞的凋亡率分别为(3.65±0.27)%、(5.21±0.76)%和(10.46±1.00)%,均高于对照组[(2.12±0.23)%,均P<0.05)]。SKOV3细胞中RASSF2A mRNA和蛋白的表达水平分别为0.32±0.04和0.24±0.02,均低于IOSE-29细胞(分别为1.00±0.07和0.68±0.04,均P<0.05)。LV-RASSF2A组SKOV3细胞的存活率、增殖率和凋亡率分别为(68.92±3.94)%、(16.38±2.16)%和(8.65±0.56)%,与LV-NC组[分别为(101.60±4.39)%、(100.73±3.29)%和(4.06±0.30)%]比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论长春新碱通过上调RASSF2A的表达,促进RASSF2A启动子去甲基化,以抑制卵巢癌细胞的增殖能力。

改良New-Bioscore系统对乳腺癌新辅助化疗后生存预测研究

目的新辅助化疗越来越被广泛用于可手术乳腺癌患者。探讨改良Neo-Bioscore评分系统作为一种新的方法对我国乳腺癌新辅助化疗后生存预测作用。方法收集贵州省肿瘤医院乳腺妇瘤科2007-07-08-2013-12-01行新辅助化疗的乳腺癌患者495例,每例患者根据CPS+EG评分系统(clinical-pathologic scoring system+estrogen receptornegative disease and nuclear grade 3tumor pathology)及改良Neo-Bioscore评分系统(clinical-pathologic scoring system+estrogen receptor-negative disease and nuclear grade 3tumor pathology+HER2positive)分别评分,采用Kaplan-Meier法对不同临床分期、不同病理分期、不同CPS+EG评分分值及不同改良Neo-Bioscore评分分值进行乳腺癌特异性生存(disease-specific survival,DSS)分析。结果中位随访71个月,全组5年DSS为81%,95%CI为77.08%~84.92%。改良Neo-Bioscore评分系统计算每位患者所得分值,其DSS均随着分值增加而下降,差异有统计学意义,χ~2=34.618,P<0.05;对于临床Ⅲ期、病理Ⅲ期、新辅助化疗后未达到病理完全缓解(pathological complete responses,pCR)的乳腺癌患者,随着改良Neo-Bioscore分值增加,其DSS明显降低,差异有统计学意义,χ~2=33.018,P<0.05;对于HER2阳性及阴性的患者,随着改良Neo-Bioscore分值增加,其DSS明显降低,差异有统计学意义,χ~2=29.233,P<0.05。根据所得分值的中位值分为高分值组(>3分)和低分值组(≤3分),改良Neo-Bioscore评分系统,高分值组DSS明显低于低分值组,差异有统计学意义,χ~2=43.201,P<0.05;对于临床Ⅲ期、病理Ⅲ期、新辅助化疗后未达到pCR的乳腺癌患者,高分值组DSS明显低于低分值组,差异有统计学意义,χ~2=25.675,P<0.05;对于HER2阴性的患者,改良Neo-Bioscore高分值组患者的DSS明显低于低分值组患者的DSS,差异有统计学意义,χ~2=18.784,P<0.05。结论改良Neo-Bioscore评估系统优化了接受新辅助化疗患者的分期和预后评估,有助于个体化设计患者的后续强化辅助治疗,以期改善生存、有效避免过度治疗及治疗不足,为乳腺癌个体化治疗提供参考。