2015—2019年贵州省某三甲医院分离细菌的分布及对常用抗菌药物的耐药率变化

目的探讨2015—2019年贵州省某三甲医院分离细菌的分布情况及对常用抗菌药物的耐药率特点。方法收集2015—2019年医院不同标本分离的所有需氧菌(真菌、分枝杆菌除外)32277株,采用全自动细菌鉴定和药敏分析仪进行细菌鉴定和药敏试验,根据细菌鉴定和药敏试验结果,分析各年度革兰阳性和阴性菌分布、细菌类别分布、不同标本来源的细菌分布和细菌对常见抗菌药物的耐药率。结果分离细菌中革兰阳性菌和阴性菌分别占28.1%和71.9%,居前5位的细菌分别是大肠埃希菌、克雷伯菌属、凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)、不动杆菌属及金黄色葡萄球菌;呼吸道、尿液、伤口脓液及血标本居首位的细菌分别是肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌和CNS,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)检出率分别为29.1%和84.1%;大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率分别为0.3%~0.9%和5.4%~19.3%,铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对美罗培南的耐药率分别为13.4%~18.9%和61.4%~79.2%;肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素的耐药率呈逐年上升趋势(P<0.001)。结论2015—2019年贵州省某三甲医院分离细菌以肠杆菌科细菌、葡萄球菌属及不动杆菌属为主,鲍曼不动杆菌对美罗培南的耐药率较高,肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类抗生素耐药率迅速上升。

贵州省七家医院细菌分布情况对比及我院耐药性监测报告

目的比较贵州省细菌耐药监测网2017年10月—2018年9月七家成员单位耐药情况,并分析某院细菌耐药性监测结果。方法根据耐药监测网监测方案,使用标准纸片扩散法或自动化仪器检测法,根据CLSI 2017年标准判断结果,用WHONET5.6软件及SPSS 23.0进行统计分析。结果七家成员单位共分离出病原菌58565株,其中重复菌株占24.12%;革兰阴性菌中大肠埃希菌的分离率最高,革兰阳性菌中金黄色葡萄球菌分离率最高。耐碳青霉烯类大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的平均检出率为1.20%和5.68%;耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的平均检出率为15.13%和47.18%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌平均检出率为32.34%和81.38%。某院细菌耐药监测结果显示,大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对头孢菌素、青霉素类、喹诺酮类药物耐药性较高;鲍曼不动杆菌对除替加环素的其他药物耐药性普遍较高;铜绿假单胞菌对头孢哌酮/舒巴坦、阿米卡星有较高敏感性,未发现对利奈唑胺、万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。结论长期和连续性得监测不同地区细菌耐药性有助于了解当地病原菌的构成及细菌耐药性的变迁。做好细菌耐药监测工作的同时也应加强实验室与临床的沟通,为临床上合理使用药物提供理论依据,最大限度地发挥出细菌耐药性监测工作的价值。

贵州某三甲医院血培养分离病原菌分布及耐药性分析

目的分析贵州某三甲医院2020年1月至2020年12月血培养的病原菌分布特点和耐药性情况,为临床血流感染的诊断和治疗提供依据。方法血培养采用美国BD公司BACTEC FX全自动血培养仪,细菌鉴定和药敏试验使用美国贝克曼MicroScan WalkAway 96全自动细菌培养仪完成,采用WHONET5.6软件对结果进行统计分析。结果全年共收集21497例血培养,其中阳性标本共计1488例,阳性率为6.9%。分离病原菌共1046株,其中革兰阴性菌548株,占52.4%;革兰阳性球菌398株,占38.0%;革兰阳性杆菌3株,占0.3%;真菌97株,占9.3%。主要病原菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌,构成比分别为17.5%、12.1%、7.3%。产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌108株,检出率59.1%。碳青霉烯类耐药的大肠埃希菌(CR-ECO)2株,检出率为1.1%;碳青霉烯类耐药的肺炎克雷伯菌(CR-KPN)54株,检出率为42.5%;耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CR-AB)37株检出率为77.1%;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)26株,检出率为34.2%,未发现利奈唑胺、万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌。结论我院血培养分离菌以革兰阴性菌为主,多重耐药菌检出率较高,根据病原菌的药敏结果用药十分重要。

2016—2021年贵州省某三甲医院临床无菌体液标本中侵袭性酵母样菌的分布特征及耐药性

目的探讨2016—2021年贵州省某三甲医院临床无菌体液标本中侵袭性酵母样菌的分布特征及耐药性。方法收集2016—2021年贵州省某三甲医院临床无菌体液(血液、骨髓、胸水、腹水、脑脊液、引流液、尿液等)标本185980份,采用全自动血培养仪及哥伦比亚血平板、巧克力平板(无添加抗生素)、沙保弱培养基分离培养标本,采用科玛嘉显色培养基、梅里埃API 20 CAUX鉴定系统以及基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术鉴定标本中分离的侵袭性酵母样菌,采用ATB FUNGUS 3进行药敏试验。结果无菌体液中分离非重复侵袭性酵母样菌2122株,主要以白假丝酵母菌为主(36.76%);样本来源主要为尿液(50.61%)和血液(35.16%);尿液、血液、腹水及引流液中菌株以白假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌及热带假丝酵母菌为主,脑脊液则以隐球菌属检出最多;检出侵袭性酵母样菌患者中男性占54.95%、女性占45.05%,15~65岁患者最多(49.95%)、其次是>65岁患者;分离的菌株最多来自于住院病人(92.27%)、其次是门急诊病人(7.73%),住院病人以重症监护室分离最多(59.91%);两性霉素B和5-氟胞嘧啶对常见侵袭性酵母菌保持较高的抗菌活性(敏感率>90%),白假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌及隐球菌属对氟康唑和伏立康唑具有较好的体外活性(敏感率>94%),但对伊曲康唑的敏感性低于其他两类唑类药物;光滑假丝酵母菌和热带假丝酵母菌对3种唑类药物敏感性较差,尤其是热带假丝酵母菌。结论2016—2021年贵州省某三甲医院临床无菌体液标本中侵袭性酵母样菌感染以白假丝酵母菌为主,临床常用抗真菌药物对大多数侵袭性酵母样菌具有较高敏感率。

2016-2021年贵州省某三甲医院临床穿刺液标本中细菌的分布特征及耐药性

目的探讨2016—2021年贵州省某三级甲等医院临床穿刺液标本中细菌的分布特征及其耐药(R)性。方法收集2016—2021年贵州省某三级甲等医院临床穿刺液标本中分离出的非重复细菌3539株,采用全自动细菌鉴定药敏仪和基质辅助激光解析电离飞行时间质谱仪(VITEK-MS)检测标本中的细菌种类,采用自动化仪器检测法、纸片扩散法及Etest法检测标本中细菌的药物敏感(S)性,并根据临床实验室标准化协会(CLSI)2021年标准判断细菌的S及R情况。结果3539株非重复细菌中革兰阴性菌2244株(63.41%)和革兰阳性菌1295株(36.59%),85.7%来自于住院病人、且以重症监护室分离最多,门急诊病人占14.3%;检出率最高的细菌依次为大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌及鲍曼不动杆菌,耐碳青霉烯类的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌及阴沟肠杆菌检出率为1.1%、40.2%及13.6%,耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌检出率为92%和46%,替加环素对鲍曼不动杆菌仍保持较高抗菌活性(S率为93.6%);葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌的检出率分别为24.37%和72.33%,未检出万古霉素R的菌株,利奈唑胺和奎奴普丁/达福普汀对葡萄球菌具着较高的抗菌活性;屎肠球菌对大部分抗菌药物R率高于粪肠球菌,未检出万古霉素、利奈唑胺R的屎肠球菌。结论2016—2021年贵州省某三甲医院临床穿刺液标本中细菌感染以大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、屎肠球菌及鲍曼不动杆菌为主,分离细菌对部分常见抗菌药物的R率呈增长趋势,尤其是耐碳青霉烯类药物的肺炎克雷伯菌和鲍曼不动杆菌。

2020年贵州医科大学附属医院就诊女性人乳头瘤病毒感染特征分析

目的分析贵州医科大学附属医院就诊的女性人乳头瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染情况及亚型分布特点。方法收集2020年1—12月贵州医科大学附属医院行宫颈脱落细胞检查的宫颈拭子样本8427例,采用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)技术进行基因分型检测,分析其分布特征和感染特点。结果贵阳市女性HPV总感染率为28.23%(2379/8427)。在不同年龄组中,≥60岁组与0~<20岁组感染率较高,分别为43.57%(173/397)和41.67%(20/48)。感染基因型分布依次为HPV52、HPV16、HPV58、HPV53和HPV39,分别为619例(18.41%)、401例(11.92%)、362例(10.76%)、236例(7.02%)、212例(6.30%)。高危型HPV感染2046例(24.28%),其次是中危型385例(4.57%),低危型感染325例(3.86%)。HPV感染以单一基因型感染为主,占73.52%(1749/2379);二重感染发生率为18.28%(435/2379),其中HPV52+HPV16两种亚型较为常见。结论贵州医科大学附属医院就诊的女性HPV感染率较高,且以单一高危型感染为主,为针对性采取防控策略,应加大HPV筛查及宣传HPV感染途径和危害,增加HPV疫苗数量,可有效减少感染率和降低子宫颈癌发生风险。

亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢及因子调控的作用

背景:肝脏作为砷毒作用的主要靶器官,成为砷毒性作用机制相关研究的焦点。目的:探讨亚砷酸钠对人正常肝细胞脂质代谢、细胞增殖、细胞凋亡及相关调控因子表达的影响。方法:MIHA正常人肝细胞株暴露于0,10,20,30μmol/L亚砷酸钠48 h,光学显微镜观察细胞形态变化,CCK-8法检测细胞活性,单试剂COD-PAP法、单试剂GPO-PAP法及酶微板法检测细胞上清总胆固醇、三酰甘油及总胆汁酸水平,油红O染色法检测细胞内脂质含量,Edu-488渗入法检测细胞增殖,PI染色法及Annexin V-FITC/PI双标记法结合流式细胞术分别检测细胞周期和细胞凋亡,实时荧光定量PCR和Western blot检测肝细胞核因子4α、胆固醇7α-羟化酶及法尼醇X受体的m RNA及蛋白表达水平。结果与结论:(1)与对照组(0μmol/L亚砷酸钠)相比,随着亚砷酸钠浓度的增加:MIHA细胞活性逐渐降低;细胞上清中总胆固醇、三酰甘油水平逐渐增高,总胆汁酸水平逐渐降低;细胞内脂质含量逐渐增多;细胞停滞于S期及G_2/M期细胞比例逐渐增多;细胞凋亡率逐渐升高;肝细胞核因子4α mRNA表达水平未见明显变化,胆固醇7α-羟化酶与法尼醇X受体mRNA表达水平下降;肝细胞核因子4α、胆固醇7α-羟化酶、法尼醇X受体蛋白表达水平逐渐下降;(2)亚砷酸钠具有细胞毒性,显著降低MIHA细胞活性,诱导细胞脂肪变性,阻滞细胞增殖,诱发细胞凋亡等损伤;亚砷酸钠可下调肝细胞核因子4α蛋白表达以及胆固醇7α-羟化酶、法尼醇X受体的转录和蛋白表达,进一步引起肝细胞的脂质代谢紊乱。

长链非编码RNA KIAA0125对急性髓系白血病U937细胞增殖和凋亡的影响

背景:U937细胞可以作为急性髓系白血病细胞模型,用于研究急性髓系白血病的生物学特性、信号通路和治疗靶点。目前虽然已有研究报道长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病中呈高表达,但其在U937细胞中的生物学功能尚不清楚,在急性髓系白血病发生发展中的作用机制有待进一步阐明。目的:探讨长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病患者外周血中的表达水平及对U937细胞增殖、凋亡的影响。方法:RNA-seq分析急性髓系白血病患者骨髓单核细胞样本,筛选得到差异表达基因——长链非编码RNA KIAA0125,利用qRT-PCR检测长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病患者外周血中的表达进行验证,通过GEPIA数据库统计分析173例急性髓系白血病患者和70例健康人骨髓细胞中长链非编码RNA KIAA0125 mRNA的表达与预后的关系。随后使用重组慢病毒技术及CRISPR/Cas9-SAM技术分别构建敲低/过表达长链非编码RNA KIAA0125的U937细胞系,qRT-PCR检测长链非编码RNA KIAA0125敲低/过表达效率。接下来,使用CCK-8实验、流式细胞术及Western blot检测敲低/过表达长链非编码RNA KIAA0125对U937细胞增殖、凋亡的影响。最后,使用Western blot检测敲低/过表达长链非编码RNA KIAA0125对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的影响。结果与结论:①qRT-PCR结果显示长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病患者外周血中呈高表达,GEPIA数据库显示长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病患者骨髓细胞中呈高表达,高表达组具有更差的生存期;②敲低组长链非编码RNA KIAA0125的敲低效率为70%,成功构建了稳定敲低长链非编码RNA KIAA0125表达的U937细胞,过表达组长链非编码RNA KIAA0125的表达是Vector组的4倍,成功构建了稳定过表达长链非编码RNA KIAA0125的U937细胞;③敲低长链非编码RNA KIAA0125抑制U937细胞的增殖并促进其凋亡,过表达长链非编码RNA KIAA0125则促进U937细胞的增殖但对U937细胞的凋亡无显著影响;④敲低长链非编码RNA KIAA0125抑制Wnt/β-catenin信号通路活性,而过表达长链非编码RNA KIAA0125则激活Wnt/β-catenin信号通路。结果表明,长链非编码RNA KIAA0125在急性髓系白血病外周血中呈高表达,其可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路影响U937细胞的增殖和凋亡,可能是急性髓系白血病的潜在预后标志物。

大麻二酚对转化生长因子β1诱导肝星状细胞活化和肝纤维化的作用

背景:大麻二酚具有抗炎、抗氧化等药理学作用,并且不具有精神活性,在肝脏疾病中的研究日渐增加,但其对肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号转导通路的作用尚未明确。目的:探讨大麻二酚对肝星状细胞中转化生长因子β1/Smad信号转导通路的影响,研究其抗肝纤维化的可能机制。方法:(1)体外实验:选取大鼠肝星状细胞株(HSC-T6),分6组培养:对照组常规培养24 h,单纯药物组加入大麻二酚培养24 h,造模组加入转化生长因子β1培养24 h,造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组均加入转化生长因子β1培养24 h后分别加入1,5μmol/L大麻二酚或水飞蓟素培养24 h。培养结束后,检测各组细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路蛋白表达。(2)动物体内实验:将C57BL/6J小鼠随机分为5组,每组8只:假手术组不造模,造模组、造模+低剂量药物组、造模+高剂量药物组、造模+阳性对照组通过胆管结扎法建立肝纤维化模型,造模3周后分别腹腔注射4,8 mg/kg大麻二酚或水飞蓟素,1次/d,连续给药7 d。给药结束后,检测各组小鼠肝功能、肝脏病理形态及α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1/Smad信号转导通路相关蛋白表达。结果与结论:(1)体外实验:与对照组比较,造模组HSC-T6细胞α-平滑肌肌动蛋白与Ⅰ型胶原mRNA表达、白细胞介素1β与肿瘤坏死因子α水平以及Ⅰ型胶原、转化生长因子β1、p-Smad2/3蛋白表达均升高(P<0.05),Smad7蛋白表达降低(P<0.05);两种剂量大麻二酚处理可改善转化生长因子β1诱导的HSC-T6细胞上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组改善作用更明显;(2)体内实验:与假手术组比较,模型组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性升高(P<0.05),肝组织中炎性细胞浸润及胶原含量增加(P<0.05),转化生长因子β1/Smad信号转导通路被激活,α-平滑肌肌动蛋白、Ⅰ型胶原蛋白表达升高(P<0.05);两种剂量大麻二酚干预可减轻造模小鼠上述指标的变化,并且以造模+高剂量药物组效果更明显;(3)结果表明,大麻二酚通过抑制肝星状细胞转化生长因子β1/Smad信号传导通路的激活抑制肝纤维化。

新医科背景下贵州医科大学医学检验技术应用型人才培养的改革与探索

为探索"新医科"背景下地方高校医学检验人才培养改革路径,分析医学检验技术人才培养现状,贵州医科大学实际,在教学模式、教学平台和实践教学等方面进行探索与改革,构建形成了"区域一体化"育人体系及"三化驱动、四面融通"人才培养模式,提升了人才培养质量并向贵州基层输送了大量医学检验人才。贵州医科大学的改革实践可为地方高校培养应用型医学检验人才提供参考。

2009-2018年某三甲医院金黄色葡萄球菌临床分布及耐药性分析

目的了解我院2009年1月至2018年12月金黄色葡萄球菌(SAU)的临床分布和耐药情况变迁,以及耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出情况。方法采用WHONET2018软件回顾性分析10年内SAU的标本来源、标本类型及耐药情况,并采用SPSS21.0分析软件进行统计学分析。结果分离出革兰氏阳性菌株共15666株,其中SAU占30.5%(4771株),MRSA检出率为41.4%(1976株)。标本类型以痰(35.1%),分泌物(30.2%),及血液(9.0%)为主,临床上主要分布在皮肤科(718株,15.0%),其次是ICU(679株,14.2%)及外科(626株,13.1%)。SAU对青霉素类抗生素的耐药率近10年一直处于87%以上,未检出对利奈唑胺和万古霉素耐药的菌株。结论10年来我院MRSA的检出率有降低趋势,但仍对多种抗生素表现出不同程度耐药性。SAU的临床分布具有典型性,重点科室应合理使用抗生素,加强医院感染控制,降低MRSA感染的发生率。

PDCA联合PBL教学法在骨髓检验实习教学中的应用

目的探讨戴明环(plan-do-check-action,PDCA)循环联合以问题为导向的教学法(problem-based learning,PBL)在医学检验骨髓细胞学临床实习中的教学效果。方法选取2020年1月—2022年1月贵州医科大学附属医院医学检验专业的60名本科实习生,随机分为观察组(PDCA循环联合PBL教学法)和对照组(传统教学),各30名,比较两组实习生的理论知识和临床实践操作技能考核成绩及综合能力。结果观察组的理论部分考核成绩、临床实践部分操作技能考核成绩、临床病例分析考核成绩分别为(93.77±0.51)分、(92.90±2.72)分(、93.10±2.73)分,高于对照组的(83.57±0.56)分、(84.03±3.19)分、(85.90±3.61)分,差异有统计学意义(P<0.05);调查问卷结果显示与对照组相比,观察组认为教学方法重难点突出、明确学习目的,提升学习积极性,提升细胞形态辨认能力,提升临床沟通能力,提升语言表达能力,提升动手能力、分析能力,提升团队合作能力,减轻骨髓细胞学习压力的人数更多,差异有统计学意义(P<0.05)。结论医学检验专业骨髓细胞学检查在临床实习教学中采用PDCA联合PBL教学法,不仅能提高学生在临床实习的教学质量,也能提高学生的理论知识、临床实践能力及综合素质。

基于雨课堂的混合式教学在临床血液学检验技术实习教学中的实践探讨

目的:为了研究基于雨课堂的混合式教学在临床血液学检验技术骨髓细胞形态学实习教学中的教学效果。方法:选择在我科实习的2016、2017级医学检验技术专业两个年级本科学生为研究对象,试验组利用雨课堂教学平台采用混合式教学法,对照组采用传统教学法,通过发放调查问卷、理论考试、技能考试、病例分析考试比较两组学生的学习效果。结果:试验组出科考核成绩明显高于对照组。调查问卷显示试验组学生普遍喜爱雨课堂教学平台采用混合式教学法进行教学,能提高学习自主性,激发学习兴趣,充分体现以学生为主体,活跃学习氛围。结论:基于雨课堂的混合式教学能激发学生的学习兴趣,进一步提高学生对骨髓细胞形态的识别能力,从而调动学生学习的积极性和主观能动性,加强了学生理论联系临床实践的技能,提高教学效率与质量。

两种评估肾小球滤过率公式在IgA肾病患者中的一致性检验

目的 探讨IgA肾病患者两种评估肾小球滤过率公式的一致性。方法 回顾性分析在本院肾内科治疗的IgA肾病患者293例资料,分别使用2009 CKD-EPI-Cr公式以及2021 CKD-EPI Cr-Cys-C公式来计算eGFR值。通过偏差、精度、准确度及协方差相关系数(CCC指数)及克拉克误差网格分析对两者的一致性进行评估。分层分析探究不同肾功能组患者的两种eGFR一致性变化。结果 在总人群及肾功能异常人群中,这两种公式的偏差中位数较小且处于临床可接受范围,精度和准确度亦处于较好水平,而CCC指数也表明两者一致性较好。但在肾功能正常或轻度异常的患者中,这两种公式的偏差较大,精度和准确度较低,CCC指数提示其一致性较差。误差网格分析结果表明,在总人群中,有72%的患者这两种方法可进行替换,68.3%的肾功能不全患者两种方法一致性较好,对于肾功能正常或轻度异常的患者,这两种方法的一致性比例分别为78.26%和100%。结论 对于肾功能异常的IgA患者,新的2021 CKD-EPI Cr-Cys-C公式与原公式一致性较好。

贵州省血友病A患儿治疗后抑制物产生的影响因素

目的探讨贵州省血友病A(HA)患儿抑制物产生的情况及影响因素。方法选取贵州省HA患儿210例,抽取HA患者外周血,采用Bethesda法检测患儿血浆凝血因子Ⅷ(FⅧ)抑制物水平,据抑制物浓度分为抑制物阳性组和阴性组,收集2组患儿的临床资料[年龄、FⅧ活性、HA确诊时间、治疗方式(按需治疗和预防治疗)、治疗药品种类、HA家族史、HA抑制物家族史、暴露日(EDS)、首次暴露年龄、基因突变类型及高强度暴露史等];采用logistic二元回归分析HA患儿抑制物产生的影响因素。结果贵州省HA患儿中检出抑制物阳性51例(24.3%),治疗方式、抑制物家族史、基因突变类型与抑制物的产生有统计学意义(P<0.05),而民族、血友病分型、HA家族史、暴露日与抑制物的产生无统计学意义(P>0.05);按需治疗(OR=2.727,95%CI为0.233~2.386)、抑制物阳性家族史(OR=0.448,95%CI为0.313~0.642)及高风险基因突变类型(OR=0.682,95%CI为0.536~0.869)为抑制物产生的影响因素。结论按需治疗、有抑制物阳性家族史及高风险基因突变类型特征的贵州省HA患儿更容易产生抑制物。

重症医学科耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的基因型和同源性分析

目的:了解贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者金黄色葡萄球菌耐药变迁情况,掌握耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的主要耐药基因和耐消毒剂基因,并对部分菌株作同源性分析。方法:回顾性分析贵州省从江县人民医院重症医学科下呼吸道感染患者2018~2021年金黄色葡萄球菌耐药情况变迁情况,以相关性分析(pearson)统计学方法探讨细菌耐药性与抗菌药物用药频度(defined daily dose system,DDDs)二者的关系。以四年间重症医学科下呼吸道感染患者送检标本分离获得的40株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌为研究对象,采用仪器法对试验菌株作鉴定及药敏,通过PCR技术作耐药基因(mecA、SCCmec、femB)和耐消毒剂基因(qacA/B)检测。应用多位点序列分型(MLST)法分析40株试验菌的同源性。结果:金黄色葡萄球菌每年的平均耐药率显示青霉素耐药率一直高于92%以上。四环素、克林霉素、复方新诺明耐药率在2019年有所下降后却又再次持续升高。红霉素、苯唑西林、左氧氟沙星、奎奴普丁/达福普丁的耐药率呈现逐年增长趋势。未发现对利奈唑胺、万古霉素和替加环素的耐药菌株。相关性分析提示青霉素耐药率与苯唑西林DDDs存在明显正相关(r=0.99,P<0.05),苯唑西林耐药率与红霉素DDDs存在明显负相关等,其他抗菌药物耐药率与各药物DDDs相关性无统计学意义。基因检测发现40株耐MRSA中mecA检出率为97.5%,SCCmec和femB基因未检出,qacA/B基因检出率为15%。MLST分型结果显示共分为7个序列型,其中以ST59型占比最高,为优势型别,占比42.5%,其次为ST45型,占25%,ST239型、ST28型、ST188型、ST1型和ST630型分别占12.5%、7.5%和5%、5%、2.5%。结论:重症医学科下呼吸道感染金黄色葡萄球菌耐药率逐年增加,可选择的抗生素有限。细菌耐药性的产生与药物使用频率有一定关系,携带mecA和qacA/B基因是耐甲氧西林金黄色葡萄球菌产生耐药的主要原因。MLST结果表明ICU病房存在科内克隆菌株。

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞System Xc-/GSH/GPX4铁死亡通路的表达及其对炎症因子分泌的影响

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMC)胱氨酸/谷氨酸逆转运体(System Xc-)/谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)铁死亡通路中相关基因与蛋白的表达及其对炎症因子分泌的影响。方法纳入RA患者及同期健康体检者各30例,采用Ficoll-hypaque密度梯度离心法分离PBMC,将细胞分为健康对照、RA、铁死亡抑制剂、铁死亡诱导剂组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力,流式细胞术FerroOrange荧光探针检测细胞内Fe 2+相对荧光强度、DHE荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)阳性细胞比例,蛋白免疫印迹及实时荧光定量PCR(qPCR)检测核转录因子红系2相关因子(Nrf2)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、GPX4蛋白与mRNA的表达,流式细胞术检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1、IL-6的含量。结果与健康对照组比较,RA组PBMC内Fe 2+浓度和ROS水平升高,Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA的表达降低,PBMC上清液中TNF-α、IL-1、IL-6的含量升高,差异均有统计学意义。与RA组比较,铁死亡抑制剂组PBMC内Fe 2+浓度和ROS水平降低,SLC7A11、GPX4蛋白和mRNA的表达升高,Nrf2蛋白的表达升高,PBMC上清液中IL-6的含量降低、TNF-α的含量升高,差异均有统计学意义。与RA组比较,铁死亡诱导剂组PBMC内ROS水平升高,SLC7A11蛋白和mRNA的表达降低,Nrf2蛋白的表达降低、GPX4蛋白的表达升高,PBMC上清液中TNF-α、IL-1的含量升高,差异有统计学意义。与铁死亡诱导剂组比较,RA患者PBMC细胞活力降低,差异有统计学意义(P<0.0001)。结论RA患者PBMC中存在铁死亡,抑制或诱导RA患者PBMC铁死亡,将抑制或促进炎性因子分泌。抑制RA患者PBMC铁死亡可能有助于治疗RA。

阴道微环境失衡对HPV感染及宫颈病变的影响

目的评估阴道微生态环境失衡对高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染、宫颈上皮内瘤变(CIN)及子宫颈癌的影响。方法对接受检查的2469名女性的宫颈脱落细胞进行HPV基因分型检测、阴道微环境常见菌群革兰染色镜检、液基薄层细胞学检测(TCT)和病理活检观察病变组织及细胞形态,根据是否感染HPV、发生CIN或癌变分组,采用χ^(2)或Fisher精确检验及多因素logistics回归分析探讨阴道微环境与HR-HPV感染、CIN的发展以及子宫颈癌之间的关系。结果单一HR-HPV型的阳性率为12.31%,两种及以上的混合感染率为3.85%,以HPV16、HPV52和HPV58亚型多见,38~47岁人群阳性率最高(P<0.05);乳酸杆菌的减少、细菌性阴道病(BV)和杂菌感染在HPV阳性组中的检出率显著高于HPV阴性组(P<0.01),乳酸杆菌的减少和BV是HPV感染的独立危险因素(P<0.05);乳酸杆菌减少、清洁度异常、BV、滴虫和pH异常检出率,CIN或癌变组高于宫颈正常组(P<0.05),乳酸杆菌的减少和清洁度异常是宫颈发生CIN或癌变的独立危险因素(P<0.05)。结论阴道微生物种群的异常,特别是乳酸杆菌数量的减少,可能会增加HR-HPV感染的风险,并促进CIN或癌变的发展。

SMYD2介导高糖诱导小鼠肾成纤维细胞活化的机制研究

目的 探讨组蛋白赖氨酸甲基转移酶2(SMYD2)介导体外高糖环境下小鼠肾成纤维细胞(NRK-49F)活化的可能机制。方法 复制糖尿病(DM)小鼠模型,经全自动生化分析仪检测各组小鼠血糖(BG)、血肌酐(Scr)水平,经苏木精-伊红、Masson染色观察小鼠肾组织病理改变,经Western blotting检测各组小鼠肾组织纤维连接蛋白(Fibronectin)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、组蛋白H3赖氨酸4三甲基化(H3K4me3)、SMYD2、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)及磷酸化NF-κB p65(NF-κB p-p65)蛋白表达,经免疫荧光检测各组小鼠肾组织α-SMA及SMYD2表达。复制体外DM细胞模型,使用正常糖(含5.5mmol/L葡萄糖)或高糖(含30.0 mmol/L葡萄糖)处理NRK-49F细胞,经Western blotting检测SMYD2、α-SMA及细胞外基质(ECM)成分蛋白表达;经CCK-8法检测SMYD2特异性抑制剂AZ505的细胞毒性;在AZ505处理/不处理的条件下,经Western blotting检测SMYD2、α-SMA、H3K4me3、Fibronectin、CollagenⅠ、NF-κB p65、NF-κB p-p65蛋白表达,经免疫荧光检测α-SMA、SMYD2及NF-κB p-p65在细胞中的表达及空间定位情况。结果 DM组血清BG、Scr水平高于NC组(P <0.05)。DM组肾组织α-SMA、Fibronectin、CollagenⅠ、SMYD2、H3K4me3、NF-κB p-p65蛋白相对表达量高于NC组(P <0.05),两组NF-κB p65蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。HG刺激不同时间点NRK-49F细胞α-SMA、Collagen I、Fibronectin、SMYD2蛋白相对表达量比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。40μmol/L组、60μmol/L组NRK-49F细胞存活率较0μmol/L组低(P <0.05)。HG组NRK-49F细胞Fibronectin、CollagenⅠ、SMYD2蛋白相对表达量较NG组高(P <0.05),HG+AZ505(20μmol/L)组较HG组低(P <0.05)。HG组NRK-49F细胞Fibronectin、CollagenⅠ、α-SMA、H3K4me3、SMYD2蛋白相对表达量较NG组高(P <0.05),HG+AZ505组较HG组低(P <0.05)。HG组NRK-49F细胞NF-κB p-p65蛋白相对表达量较NG组高(P <0.05),HG+AZ505组较HG组低(P <0.05),各组小鼠NRK-49F细胞NF-κB p65蛋白相对表达量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论SMYD2可介导高糖诱导的NRK-49F细胞活化,其机制可能与激活NF-κB细胞信号通路有关。

外周血miR-571水平对肝纤维化的诊断价值

目的 通过检测肝纤维化患者外周血中miR-571的表达,探讨miR-571水平对肝纤维化的诊断意义。方法 选取2022年12月至2023年9月诊断为肝纤维化的患者40例(肝纤维化组)、肝炎患者40例(肝炎组)和健康对照者40例(健康对照组)作为研究对象。采用实时荧光定量PCR检测外周血中miR-571的表达水平,分析各组中miR-571的相对表达量。使用Spearman相关性分析miR-571与临床常见指标的相关性。通过二元logistic回归构建多变量诊断模型,并绘制ROC曲线评价miR-571和多变量诊断模型对肝纤维化的诊断能力。结果 肝纤维化组中miR-571的表达水平显著高于健康对照组和肝炎组,差异有统计学意义(P <0.001)。Spearman相关性分析显示,miR-571的表达水平与ALT、APRI评分和FIB-4指数呈正相关(r=0.23、0.30、0.22,P <0.05),与PLT呈负相关(r=-0.19,P <0.05)。logistic回归分析得出miR-571和FIB-4指数是肝纤维化的独立危险因素。ROC曲线结果显示miR-571诊断纤维化的AUC为0.91(95%CI:0.85~0.96),miR-571联合FIB-4指数诊断肝纤维化的AUC为0.94(95%CI:0.90~0.98)。结论 肝纤维化患者的外周血中miR-571表达显著升高,联合FIB-4指数对肝纤维化具有一定临床诊断价值。