达芬奇机器人手术系统在妇科肿瘤治疗中的应用

早期宫颈癌和子宫内膜癌患者淋巴结转移对手术方式的制订、预后评估及术后补充治疗的选择均具有重要意义。吲哚菁绿通过达芬奇机器人搭载的近红外荧光成像系统在前哨淋巴结检测中具有较大优势,克服了开腹和传统腹腔镜手术的不足,不仅可减少传统分期手术清扫淋巴结后的并发症,还可准确判断淋巴结的转移状况,目前越来越多地应用于妇科肿瘤领域的临床实践,但其普及和推广仍受到各种因素的限制。因此,未来扩大达芬奇机器人手术系统的临床应用范围,可以使更多妇科肿瘤患者从微创手术治疗中获益。

无痛多通道3D模具引导的组织间插植联合腔内三维后装近距离放疗治疗难治性宫颈癌的剂量学研究

目的:评估无痛组织间插植联合三维后装近距离放疗治疗难治性宫颈癌的剂量学及安全性。方法:本研究收集从2022年03月至2023年06月间收治的50例盆腔外照射后评估肿瘤退缩不良的和偏心性难治性宫颈癌患者,治疗方式包括无痛多通道3D模具引导腔内/组织间插植(intracavitary/interstitial brachytherapy,IC/ISBT)治疗组和阴道卵圆体+宫腔管施源器(intracavitary brachytherapy,ICBT)治疗组。对于分类资料描述用率表示,两组计量资料比较采用两个独立样本t检验,P<0.05认为有统计学差异。结果:IC/ISBT组GTV-T_(res)体积、90%靶区所接受的处方剂量(D_(90))及100%处方剂量所包含靶区占整个靶区体积的百分比(V_(100))、HR-CTV体积、HR-CTV的D_(100)、D_(90)、V_(100)明显高于ICBT,差异具有统计学意义(P<0.05),100%靶区所接受的处方剂量(D_(100))两组无明显差异(P>0.05)。对于膀胱、直肠、乙状结肠、小肠1 cm^(3)接受的剂量(D_(1 cm^(3)))、2 cm^(3)接受的剂量(D_(2 cm^(3)))两组相近,无明显差异(P>0.05)。另外IC/ISBT组操作时间比ICBT组延长,CT扫描次数、插植针数及出血量均比ICBT组增多(P<0.05),但经采用无痛技术后,两组患者NRS评分差异无统计学意义(P>0.05)。结论:选择适合不同患者的个体化施源器组织间插植联合腔内三维后装近距离治疗技术,采用全麻下的无痛操作,一方面保证肿瘤靶区的体积剂量学覆盖,同时未明显增加周围危及器官的受照剂量,另一方面提高患者的治疗舒适感及依从性。

贵州省720例乳腺癌HER-2的表达情况及抗HER-2治疗的回顾性分析

背景与目的:乳腺癌是严重威胁女性生命的恶性肿瘤之一,在我国汉族与其他少数民族乳腺癌的发病率及其HER-2基因表达差异成为学者关注的问题。该研究旨在分析贵州省乳腺癌HER-2基因表达的民族差异性,评价应用曲妥珠单抗行分子靶向治疗的临床疗效,探讨多种临床因素对贵州省乳腺癌患者生存预后的影响。方法:回顾性分析2007年1月—2013年12月在贵州医科大学附属肿瘤医院接受治疗的720例女性乳腺癌患者的随访情况,采用SPSS 17.0中的Kaplan-Meier法对患者进行生存分析,统计患者无病生存期(disease free survival,DFS)及总生存期(overall survival,OS),采用Log-rank检验进行因素间比较。采用Cox回归模式进行多因素检验,分析乳腺癌的独立预后因素。结果:入组的720例患者中,HER-2阴性表达520例(72.2%),HER-2阳性表达200例(27.8%)。200例HER-2阳性乳腺癌患者中,汉族177例(177/645,27.4%),少数民族23例(23/75,30.7%)。200例HER-2阳性乳腺癌患者中,行抗HER-2治疗37例(18.5%),未行抗HER-2治疗163例(81.5%),可分为治疗组及对照组。统计分析显示,治疗组与对照组的DFS和OS差异均有统计学意义(P=0.041和0.022)。Cox回归分析提示,雌激素受体(estrogen receptor,ER)和Ki-67是入组乳腺癌患者的独立预后因素(P=0.03和0.016),孕激素受体(progesterone receptor,PR和HER-2不是独立预后因素(P均>0.05);其中汉族乳腺癌患者的ER和Ki-67是独立预后因素(P=0.018和0.031),PR和HER-2不是独立预后因素(P均>0.05);少数民族乳腺癌患者的ER、PR、HER-2和Ki-67均不是独立的预后因素(P均>0.05)。结论:HER-2基因阳性表达不具有民族差异性。HER-2阳性患者应用曲妥珠单抗行抗HER-2治疗可明显改善预后,延长DFS及OS,但目前贵州省行抗HER-2治疗人群不足20%。本研究初步提示ER、Ki-67作为乳腺癌独立的预后因素具有民族差异性的趋势。

上皮性卵巢癌中CXCR4与MMP-9的表达及其相关性研究

目的:探讨趋化因子受体4(CXCR4)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在上皮性卵巢癌中的表达及其相关性。方法:选择30例上皮性卵巢癌(浆液性卵巢癌、黏液性卵巢癌)患者组织标本作为恶性组,同期14例卵巢良性上皮性肿瘤(浆液性囊腺瘤、黏液性囊腺瘤)患者组织标本作为良性对照组,采用免疫组化法检测两组组织中CXCR4及MMP-9蛋白的表达,以及与临床病理特征的关系,并分析恶性组中CXCR4、MMP-9蛋白表达的相关性。结果:CXCR4、MMP-9主要表达于细胞质中,呈棕黄色;恶性组CXCR4、MMP-9蛋白表达阳性率高于良性对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关性检验显示,CXCR4和MMP-9的表达与淋巴结转移、病理分期、大网膜转移、腹水中找到癌细胞、术前CA125值>600有关(P<0.05);配对设计关联性分析显示,CXCR4与MMP-9表达呈正相关(r=0.356,P<0.05)。结论:CXCR4、MMP-9在上皮性卵巢癌的侵袭转移过程中起重要的作用,两者具有协同关系。

CD44v6和EGFR表达对Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌新辅助化疗敏感度的预测价值

目的探讨CD44v6和EGFR的表达对Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌新辅助化疗(NACT)疗效的预测价值。方法选择经病理确诊的Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌患者53例,所有患者均行2周期紫杉醇+铂类的NACT,收集NACT前的宫颈肿瘤病理组织标本,免疫组织化学SP法检测CD44v6和EGFR的表达,并分析其与Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌NACT疗效的相关性。结果53例患者中NACT敏感组(CR+PR)38例,NACT不敏感组(SD+PD)15例,不敏感组CD44v6的表达显著高于敏感组(P<0.05);CD44v6的表达在疗效为CR、PR、SD的患者中具有明显差异(P<0.05)。CD44v6对Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌NACT疗效的AUC为0.74,P<0.05;与CD44v6低表达组患者相比,高表达组NACT疗效更差(P<0.05)。Pearson检验发现CD44v6和EGFR表达具有相关性(R=0.34,P<0.05)。结论CD44v6和EGFR表达呈正相关。CD44v6高表达可能会降低Ⅱ~Ⅲ期宫颈癌NACT的疗效,CD44v6表达对宫颈癌紫杉醇+铂类NACT疗效有一定预测价值和临床意义。

局部晚期宫颈癌同步放化疗中尿道受照剂量与泌尿系统并发症相关性研究

目的探讨局部晚期宫颈癌患者盆腔外照射时泌尿系统不良反应与膀胱及尿道剂量的相关性。方法回顾性收集贵州医科大学附属医院肿瘤科诊治的局部晚期宫颈癌患者行盆腔外照射计划中膀胱及尿道最大剂量点(D_(max))、最小剂量(D_(min))、平均剂量(D_(mean))、计划靶区周围01、1、2 cm^(3)接受的平均剂量(D01 cm^(3)、D1 cm^(3)、D2 cm^(3))及接受5、10、15、20、25、30、35、40、45、50 Gy受照体积占整个器官体积百分比(V_(5 Gy)、V10 Gy、V_(15 Gy)、V_(20 Gy)、V_(25 Gy)、V_(30 Gy)、V_(35 Gy)、V_(40 Gy)、V_(45 Gy)、V_(50 Gy))等相关剂量学参数及患者出现的尿频、尿急、尿痛等泌尿系症状。采用独立样本t检验及Logistic回归模型分析泌尿系症状与剂量学参数相关性。结果膀胱及尿道的中位体积分别为2948、471 cm^(3),以尿道各个参数的中位值为界分成两组,行单因素分析发现尿道D_(max)、D_(min)、D_(mean)、V_(5 Gy)、V_(10 Gy)、V_(15 Gy)、V_(20 Gy)、V_(25 Gy)、V_(30 Gy)、V_(35 Gy)、V_(40 Gy)、V_(45 Gy)、V_(50 Gy)与发生泌尿系并发症相关(t=1430、2165、3219、3336、1662、1791、2152、2011、1227、3725、3018、3624、2198,P<005),进一步行多因素分析显示,尿道D_(2) cm^(3)、V20、V_(40)及膀胱V_(40)、D_(1) cm^(3)、D_(2) cm^(3)是预测泌尿系发生2级不良反应的独立因素(P<005)。结论建议限制尿道的D_(2) cm^(3)、V_(20)、V_(40)以尽量减少2级泌尿系统并发症的风险。

新辅助化疗对比同步放化疗对宫颈癌放疗剂量影响的研究

目的比较局部晚期大肿块(>4 cm)宫颈癌新辅助化疗对比同步放化疗对靶区及危及器官的影响。方法收集2019年3月1日至2021年6月30日期间经病理学证实的局部晚期宫颈癌患者146例,非盲数字表法按1∶1随机分成新辅助化疗(NACT)+同步放化疗(CCRT)组73例、CCRT组73例。NACT+CCRT组给予紫杉醇联合顺铂新辅助化疗2个周期后给予CCRT,CCRT组直接行CCRT。分类资料统计描述用率表示,两组计量资料比较采用两独立样本比较的Wilcoxon秩和检验,两组率或构成比比较采用χ^(2)检验。结果NACT+CCRT组与CCRT组放疗前GTV分别为(31.95±25.96)、(71.54±33.59)cm^(3),差异具有统计学意义(P<0.01),NACT+CCRT组放疗前CTV及PTV与CCRT组相比亦明显降低(P值均<0.05)。在靶区剂量学方面,NACT+CCRT组100%GTV接受的剂量(D_(100GTV))、95%CTV接受的剂量(D_(95CTV))、100%处方剂量包含的GTV百分比(V_(100GTV))、100%处方剂量包含的CTV百分比(V_(100CTV))及95%处方剂量包含的PTV百分比(V_(95PTV))与CCRT组相比明显提高(P值均<0.05)。NACT+CCRT与CCRT两组患者完全缓解(CR)率分别为86.3%、67.6%,差异有统计学意义(P<0.01)。在危及器官方面,NACT+CCRT组膀胱、直肠、小肠及尿道受照剂量与CCRT组相比明显降低(P值均<0.05)。结论新辅助化疗可缩小宫颈大肿块患者肿瘤体积,提高肿瘤受照剂量,同时降低周围危及器官剂量,降低了三维后装近距离治疗的难度,因此新辅助化疗联合同步放化疗可成为局部晚期大肿块宫颈癌患者治疗的新选择。

HPV16阳性宫颈癌细胞株中miR-497-5p靶向PD-L1的免疫调控作用

目的:探讨miR-497-5p靶向PD-L1在HPV16阳性宫颈癌细胞株中的免疫调控作用。方法:通过免疫共沉淀(co-immunoprecipitation,Co-IP)验证宫颈癌细胞中HPV16 E6和E7蛋白对PD-L1蛋白是否有直接作用;对宫颈癌组织差异表达的miRNA进行生信分析筛查;以TCGA宫颈癌数据为基础,探讨miRNA与预后之间的关系;E6、E7 siRNA由上海吉玛制药技术有限公司设计合成,通过脂质体在HPV16阳性宫颈癌细胞株中转染E6、E7 siRNA,下调E6、E7的表达;构建E6、E7基因表达质粒,于HPV阴性子宫颈癌细胞株中表达E6、E7。利用qRT-PCR对不同组细胞表达miRNA进行检测;miR-497-5p mimics和inhibitor转染HPV16阳性宫颈癌细胞株,通过Western blot检测各组PD-L1蛋白的表达情况;通过预测软件,在PD-L1 mRNA 3’UTR上寻找miR-497-5p的作用靶点;利用双荧光素酶报告实验,验证miR-497-5p是否与PD-L1 mRNA 3’UTR靶向结合。结果:经Co-IP实验验证,HPV16 E6和E7对PD-L1无直接作用关系;在宫颈癌细胞中对E6和E7表达进行上调和下调后,发现E6、E7与hsa-miR-497-5p表达存在负调控关系;miR-497-5p mimics和inhibitor转染HPV16阳性宫颈癌细胞株后发现,hsa-miR-497-5p可抑制PD-L1蛋白的表达水平;hsa-miR-497-5p inbibitor可提高PD-L1蛋白的表达水平;双荧光素酶活性实验结果提示miR-497-5p可靶向结合PD-L1的3’-UTR序列。结论:HPV16 E6/E7可能通过miR-497-5P/PD-L1轴促进宫颈癌细胞免疫逃逸。

早期宫颈癌术后三维后装近距离治疗时膀胱不同充盈体积对靶区与危及器官影响研究

目的通过分析膀胱不同充盈体积对三维后装靶区及危及器官体积、剂量的影响,探讨宫颈癌术后三维后装近距离治疗时最佳膀胱充盈体积。方法纳入术后病理明确的早期宫颈癌切缘阳性及安全边界不够的患者共111例,采用随机数表法给予膀胱灌注50、60、70、80、90、100 ml生理盐水共6组,每组依次为66、69、66、69、72、56人次分别行CT模拟定位,按照国际辐射单位和测量委员会(ICRU)89号报告勾画高危临床靶区及膀胱、直肠、小肠、乙状结肠等危及器官,采用Oncentra计划系统制定治疗计划,分别记录不同体积下的高危临床靶区(the high-risk clinical target volume,HR-CTV)体积、D_(90)及危及器官(organ at risk,OAR)的1 cm^(3)受照剂量(D_(1 cm^(3)))、2 cm^(3)受照剂量(D_(2 cm^(3)))。结果60 ml组与50 ml组、70 ml组、80 ml组、90 ml组及100 ml组比较,HR-CTV体积、剂量差异无统计学意义(P>0.05),膀胱D_(2 cm^(3))、D_(1 cm^)(3)及直肠D2 cm^(3)、D_(1 cm^(3))明显降低,差异具有统计学意义(t_(膀胱)=3.21、5.83、2.89、12.95、7.96,P_(膀胱)=0.031、0.010、0.041、0.000、0.001;t_(直肠)=2.94、4.66、2.53、5.89、4.13,P_(直肠)=0.037、0.024、0.049、0.005、0.028)。其他组两两比较,HR-CTV体积、剂量、膀胱D_(2 cm^(3))、D_(1 cm^(3))及直肠D_(2 cm^(3))、D_(1 cm^(3))差异无统计学意义(P>0.05)。乙状结肠及小肠D_(2 cm^(3))、D_(1 cm^(3))各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论在早期宫颈癌术后三维后装近距离治疗时,膀胱灌注60 ml时较其他体积能够保证HR-CTV体积、剂量,又能够更好保护膀胱和直肠。

宫颈癌组织中BNIP1表达对预后及体外宫颈癌细胞增殖、迁移及凋亡影响

目的 探讨Bcl-2/腺病毒E1B 19 kd相互作用蛋白1 (BNIP1)在宫颈癌组织中的表达与临床、病理特征之间相关性,以及对宫颈癌细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法 收集2016-01-10-2017-01-31贵州医科大学附属医院/贵州医科大学附属肿瘤医院新发76例宫颈癌病理组织标本及30例癌旁组织(距癌>2 cm)样本。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)与蛋白质印迹法分别检测组织样本中BNIP1基因及蛋白表达。选择具有BNIP1低表达特性的宫颈癌Siha细胞系,构建BNIP1过表达质粒,转染细胞进行BNIP1过表达。shRNA干扰技术转染Siha细胞,构建BNIP1沉默稳转细胞系,并分别验证转染效率,通过Transwell实验、划痕实验、MMT实验和流式细胞术实验分别检测过表达或沉默BNIP1后对Siha细胞侵袭、迁移、增殖活性及凋亡的影响。结果 根据BNIP1表达中位值,将76例患者分成BNIP1高表达组(40例)和低表达组(36例),高表达组1和2年总生存(OS)率分别为96%和83%,低表达组为87%和65%,2组中位OS分别为36个月和28个月,BNIP1低表达宫颈癌患者生存差于高表达患者,差异有统计学意义,χ^(2)=7.902,P=0.036。过表达BNIP1的Siha细胞其增殖、迁移及侵袭能力减弱,沉默BNIP1后的Siha细胞则呈现相反的趋势;通过流式细胞分析结果显示,BNIP1过表达促进Siha细胞凋亡,而沉默BNIP1则减弱了Siha细胞的凋亡,差异有统计学意义,t=9.803,P<0.001。结论 BNIP1表达高低与患者预后相关,表达越高患者生存期越长,原因可能与其高表达能够抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,促进其凋亡相关。