PBL教学法在整合课程神经学理论教学中的应用

目的:评价以问题为基础的教学法(PBL)在整合课程神经学理论教学中的效果。方法:选择2013级教改班50名学生按照PBL教学(PBL组)、2012级教改班48名学生按照传统的教师授课为主的基础教学法(教学LBL组);学期结束时采用问卷调查了解学生对教学方法(包括提高学习的主动性、巩固基础知识及学习负担等10个方面)的满意度,采用闭卷考试评价学生的学习成绩。结果:问卷调查结果显示除对学习负担的评价外(P>0.05),PBL组学生对其它9个方面内容的满意度得分均明显高于LBL组学生,差异有高度统计学意义(P<0.01);考试成绩结果显示,除填空题得分外(P>0.05),PBL组学生的案例分析题、选择题、名词解释题的得分和总分均明显高于LBL组学生,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论:PBL教学法可较好地应用于整合课程神经学的教学实践中,加深了医学生对理论知识的掌握和理解、应用,有利于提高教学效果。

蛋白激酶Cδ参与帕金森大鼠模型中6-OHDA的神经毒性作用

目的研究蛋白激酶Cδ(PKCδ)细胞核转移在帕金森大鼠模型神经元丢失中的病理作用。方法 40只雄性SD大鼠随机分为Sham组(10只)和PD组(30只),立体定位右侧纹状体注射生理盐水或6-OHDA溶液并通过阿朴吗啡(APO)诱导旋转进行模型筛选,免疫组化检测黑质致密部(SNpc)酪氨酸羟化酶(TH)表达情况。采用Western blotting检测PKCδ蛋白表达并通过共聚焦观察PKCδ在细胞核的表达。结果 PD组SNpc部位TH阳性神经元形态发生了病理改变且密度显著下降(P<0.05);Western blotting显示PD组SNpc组织中PKCδ及Cleaved PKCδ的表达较Sham组显著上调(P<0.05);共聚焦显微镜提示PD组SNpc部位PKCδ与细胞核有共定位。结论 PKCδ的酶解激活及细胞核转位可能参与了PD的神经病理发生。

进行性非流利性失语症伴运动神经元病误诊为脑梗死1例

额颞叶变性（frontotemporal lobar degeneration,FTLD）是一类以选择性的额叶和（或）颞叶进行性萎缩为病理特征,以语言损害、进行性精神行为异常、执行功能障碍为特征的痴呆症候群[1];运动神经元病（motor neuron disease,MND）是一组病因未明的选择性侵犯脊髓前角细胞、脑干后组运动神经元、

磁共振波谱联合视频脑电图对伴海马硬化的内侧颞叶癫痫的诊断价值

目的:探讨磁共振波谱(MRS)结合视频脑电图(V-EEG)对内侧颞叶癫痫(MTLE)的定位诊断价值,分析不同疗效MTLE患者MRS的特点。方法:将52例入组前V-EEG监测有发作间期异常放电的MTLE患者根据国际抗癫病联盟对耐药性癫病的定义分为耐药组(n=18)和有效组(n=34),根据V-EEG异常放电部位再分为单侧放电组和双侧放电组,收集同期20例健康体检者作为对照组;MTLE患者行V-EEG检查,所有被检者均行头颅MRI扫描及双侧海马体MRS检查,记录MTLE患者发作间期V-EEG及影像学表现,比较耐药组和有效组患者V-EEG与MRS检查单双侧异常放电的一致性;分析3组受检者双侧海马体的代谢物肌酸(Cr)、胆碱(Cho)、N-乙酰天门冬氨酸(NAA)峰值,比较NAA/Cr、NAA/Cho及NAA/(Cr+Cho)比值的变化。结果:MTLE患者头颅MRI检出颞叶异常改变30例,检出率58%;MRS检查检出异常46例,检出率88%,有16例MRS发现异常改变的患者MRI检查为阴性;耐药组和有效组V-EEG和MRS检出单侧异常放电的一致性分别为83.3%和78.6%,V-EEG和MRS检出双侧异常放电的一致性分别为100.0%和33.3%,有效组双侧一致性较差;与对照组比较,有效组和耐药组NAA/Cr、NAA/Cho及NAA/(Cr+Cho)的比值降低(P<0.05);耐药组NAA/Cr、NAA/Cho及NAA/(Cr+Cho)的比值虽较有效组低,但仅NAA/Cr比值比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:V-EEG联合MRS检查对单侧MTLE初步定位具有较高的价值,耐药性MTLE患者更易出现NAA/Cr比值的降低。

立体定向微创穿刺颅内血肿清除术对脑出血患者的疗效

目的:探讨立体定向微创穿刺颅内血肿清除术对脑出血患者的疗效及血清CRP影响。方法:60例脑出血患者均分为微创手术组(行立体定向微创穿刺颅内血肿清除术)和药物治疗组,比较2组患者的血肿清除时间、住院时间及复方甘露醇用量,记录2组患者入院及出院时的神经功能缺损(NIHSS)评分,采用免疫透射比浊法测定2组患者入院时、微创手术后1 d时或同时点药物治疗组、出院时的血清C反应蛋白水平。结果:微创手术组血肿清除时间、住院时间及复方甘露醇用量少于药物治疗组,差异有统计学意义(P<0.05);入院时,2组患者血清CRP水平、NIHSS评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);微创手术组患者手术后1 d时的血清CRP水平高于治疗前和同时点药物治疗组(P<0.05),而药物组(微创组手术后1d的同时点)血清CRP水平与入院时比较,差异无统计学意义(P>0.05);出院时2组患者血清CRP水平处于正常值内(P>0.05),但微创手术组高于药物治疗组(P<0.05);出院时,2组患者NIHSS评分均低于入院时,微创手术组降低更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:立体定向微创颅内血肿清除术能减少脑组织的损害程度,疗效优于药物治疗,术后1 d时血清CRP水平升高。

3.0T MRI磁敏感加权成像观察α-硫辛酸对帕金森病患者黑质的铁螯合作用

目的:应用3.0T MR磁敏感加权成像技术(SWI)了解α-硫辛酸(LA)对帕金森病(PD)患者黑质的铁螯合作用。方法:选取PD患者40例随机均分为研究组和对照组,在基础治疗的同时,研究组给予LA与单唾液酸四己糖神经节苷脂钠(GM1)进行治疗,对照组仅予GM 1治疗,应用SWI观察两组患者治疗前后黑质相位值变化以评估LA的铁螯合作用。结果:治疗后研究组患者黑质相位值升高,铁沉积减少(P<0.05);对照组治疗前后黑质相位值无明显变化,铁沉积无明显变化,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗前后黑质致密带(SNc)宽度、黑质(SN)宽度、SNc/中脑直径、SN面积平均值,研究组与对照组均无明显变化(P>0.05)。结论:SWI检查可评估LA治疗PD对黑质铁沉积的影响,LA是有效治疗PD的金属螯合剂。

颅内皮样囊肿自发性破裂的CT及MRI表现

目的:分析颅内皮样囊肿自发性破裂的CT及MRI表现。方法:9例经手术和病理证实颅内皮样囊肿自发性破裂的CT、MRI资料,分析其病变部位、大小、形态、与脑积液关系、水肿情况等影像学特点。结果:皮样囊肿6例位于幕上,3例位于幕下,4例位于鞍上池,2例位于鞍旁,3例位于桥小脑角区;5例囊肿形态规则,4例形态不规则,边界均清楚;8例周围无水肿,1例周围有轻度水肿,9例病灶均破裂,目脂滴进入脑脊液内;CT扫描2例呈均匀低密度,7例呈不均匀混杂密度,3例病灶内可见钙化;MRI扫描呈不均质混杂信号,其内均可见短T1脂肪信号,破裂的脂滴均呈短T1、长T2信号,脂肪抑制序列短T1信号均可被抑制;增强扫描6例病灶无强化,3例病灶壁呈明显环形强化,2例破裂脂滴邻近脑膜强化,1例室管膜强化。结论:CT及MRI能够准确显示原发部位的皮样囊肿和破裂后游离于脑脊液内的脂滴,表现具有特征性。

放射性脑组织内骨肉瘤1例

立体定向微创穿刺颅内病灶活检术能精确定位颅内肿瘤位置,避开大脑重要功能区,减轻对正常脑组织的损伤,对颅内组织病变的明确诊断非常重要[1]。有研究表明,被放射的骨发生骨肉瘤的概率为0.03%~0.8%,可发生于骨的任何部位,

硫辛酸对6-羟多巴胺诱导的帕金森模型大鼠的保护作用

目的:探讨硫辛酸(LA)对6-羟多巴胺(6-OHDA)诱导的帕金森病(PD)模型大鼠的神经保护功能。方法:健康雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、PD模型组和PD干预组,采用立体定位技术向PD模型组和PD干预组大鼠右侧大脑纹状体注射6-OHDA诱导建立PD大鼠模型,假手术组注射抗坏血酸的生理盐水;术后第4周开始,PD干预组腹腔连续注射LA 14 d,PD模型组和假手术组注射生理盐水;建模后第4周和第7周进行阿扑吗啡(APO)诱导的旋转行为学检测,建模后第4、5、6和7周通过圆筒实验测试大鼠左前肢的使用率;行为学检测结束后,免疫组化染色观察各组大鼠酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞表达。结果:注射APO后,PD模型组和PD干预组均出现向健侧旋转的行为,在第4周时旋转速度均≥3 r/min,表明PD大鼠复制成功;LA干预后(造模后第7周),PD干预组比PD模型组大鼠的旋转速度明显减慢,亦比本组干预前(第4周)减慢,差异具有统计学意义(P<0.05);与假手术组大鼠比较,造模后第5周开始,PD模型和PD干预大鼠的左前肢使用率减少(P<0.05),PD干预组大鼠左前肢的使用率比PD模型组增加(P<0.05);免疫组化示,PD干预组TH染色阳性细胞数较PD模型组多。结论:LA对6-OHDA诱导的PD模型大鼠的黑质多巴胺能神经元具有神经保护作用。

改良6-OHDA注射法建立早期帕金森病大鼠模型

目的:改良6-羟基多巴胺(6-OHDA)立体定位注射法建立早期帕金森病(PD)大鼠模型。方法:40只雄性SD大鼠随机分为control组10只,model组30只;于手术前30 min,腹腔注射地昔帕明(25 mg/kg)及帕吉林(5 mg/kg),control组采用立体定位右侧纹状体注射生理盐水,model组注射6-OHDA;术后第3、4周采用圆筒测试及旋转测试测定大鼠的左前肢使用率和旋转速度,免疫组化方法检测黑质内酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元数量。结果:圆筒测试显示madel组大鼠左前肢使用率低于control组(P<0.01),旋转测试显示model组平均向左侧旋转速度(3.48圈/min),明显快于对照组(P<0.01),PD模型成功率为89.66%;免疫组化显示,model组右侧中脑黑质致密部(SNc)部位TH阳性神经元数目较control组右侧减少(44.81±2.89)%,差异有统计学意义(P<0.01),符合临床早期PD诊断标准。结论:改良的6-OHDA注射法建立早期PD大鼠模型简单易行,成功率高。

超声检查评估帕金森病患者的吞咽功能障碍

目的:超声评价帕金森病(PD)患者的吞咽运动。方法:选取有吞咽障碍的PD患者38例为PD组,另选取40例无任何吞咽障碍的后循环缺血病人为对照组,超声检测各组受试者空咽及吞咽5 m L水时口腔期及咽期的运动时间,并进行组间比较,Logistic回归分析PD患者吞咽功能的影响因素。结果:PD组受试者空咽及吞咽5 m L水时口腔期及咽期的运动时间均明显长于对照组受试者,差异有统计学意义(P <0. 05); Logistic回归分析显示病程和Hoehn-Yahr分级是影响PD病人吞咽功能的危险因素。结论:B/M型超声能够用于评估吞咽功能,安全无创,有吞咽障碍的PD患者的吞咽时间在口腔期、咽期较无吞咽障碍者延长。

VPS13A基因突变致舞蹈病-棘红细胞增多症的诊断及家系研究

目的:探讨舞蹈病-棘红细胞增多症(Ch Ac)的诊断方法及家系特点,为Ch Ac的精准诊断提供可行合理的策略。方法:选取1例临床疑似Ch Ac患者(先证者)作为研究对象,收集其临床资料和家系资料并绘制遗传家系图;采用扫描电镜检测棘红细胞,利用全外显子目标序列捕获2代测序技术筛查Ch Ac易患性基因及其突变类型。结果:先证者主要临床表现为不自主伸舌、磨牙、扮鬼脸、头部及四肢舞蹈动作及口唇自噬动作,外周血肌酶和转氨酶均增高,头颅MRI可见尾状核轻度萎缩;其兄生前具有与先证者同样的临床表现,其父母及姐姐均体健;先证者外周血检测到典型棘红细胞,检测出液泡蛋白分类同源物13A(VPS13A)基因,且VPS13A基因存在c. 9403C> T纯合突变,引起氨基酸改变p. R3135X,为无义突变;先证者的父亲和母亲均为c. 9403C> T杂合突变。结论:结合临床表现及扫描电镜检查可以高度怀疑Ch Ac,但全外显子目标序列捕获2代测序技术可准确检测VPS13A基因突变,并可结合遗传家系特点,作为Ch Ac首选确诊手段。

帕金森病患者血尿酸水平分析

目的:观察帕金森病(PD)患者血尿酸水平。方法:比较71例帕金森病患者(PD组)和79例健康体检者(对照组)的血尿酸水平,并比较早、中、晚期及不同性别PD患者的血尿酸水平。结果:PD组血尿酸水平低于健康对照组(P<0.05),男性和女性PD组血尿酸水平均低于对应的健康对照组(P<0.05);男性PD患者血尿酸水平低于女性PD患者血尿酸水平(P<0.05);早期和中期女性PD患者血尿酸水平间差异无统计学意义(P>0.05),但均高于晚期患者,差异具有统计学意义(P<0.05);在男性PD患者,随着病情加重,血尿酸逐渐降低,各期比较差异有统计学意义。结论:血尿酸水平可能是帕金森病的重要生物学指标之一,并且存在性别差异。

Seipin敲低对内质网应激通路诱导细胞凋亡的影响

目的:探讨Seipin敲低对肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞凋亡的影响及其相关机制,初步探索Seipin敲低在帕金森病(PD)模型中的可能调控机制。方法:对细胞给予不同浓度的6-羟多巴胺(6-OHDA,0、25、50、75、100及125μmol/L)处理,用CCK8法检测细胞活性筛选6-OHDA最佳造模浓度;选取阴性对照细胞和Seipin敲低细胞分别用6-OHDA诱导体外PD模型作为阴性模型组和Seipin模型组,同时设阴性正常组和Seipin正常组;4组细胞培养18 h时,采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测内质网应激(ERS)蛋白(GRP78和CHOP)和凋亡相关蛋白Bax水平。结果:CCK8法检测细胞活性,6-OHDA最适作用浓度为75μmol/L;Western blot结果显示,与阴性正常组比较,阴性模型组、Seipin模型组GRP78、CHOP及Bax蛋白水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05);而与阴性模型组相比,Seipin模型组GRP78、CHOP及Bax蛋白水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:敲低Seipin诱导细胞凋亡可能涉及ERS蛋白的增加,敲低Seipin后导致6-OHDA诱导的细胞凋亡更加严重。

低频电刺激对耐药癫痫大鼠海马细胞外液谷氨酸及γ-氨基丁酸的影响

目的:观察低频电刺激(LFS)海马对杏仁核电点燃耐药癫痫模型大鼠脑内谷氨酸(Glu)及γ-氨基丁酸(GABA)的影响。方法:选取60只雄性健康SD大鼠制作杏仁核点燃模型,采用苯妥英钠(PHT)和苯巴比妥(PB)对杏仁核点燃癫痫鼠进行耐药筛选,对明确耐药大鼠给予海马LFS治疗,收集电刺激海马治疗前后脑组织微透析液,采用高效液相色谱法(HPLC)观察治疗前后Glu及GABA含量。结果:筛选出的耐药癫痫模型大鼠7只,海马刺激前GABA浓度为(29.114 0±7.236 2)mg/L,刺激后为(37.130 0±7.622 5)mg/L,刺激前后比较差异有统计学意义(P<0.05);Glu刺激前浓度为(2 527.742 0±514.831 1)mg/L,刺激后为(2 243.906 0±329.277 8)mg/L,有降低趋势,但差异无统计学意义(P>0.05),GABA/Glu刺激前为0.011 63±0.002 34,刺激后为0.016 50±0.002 36,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:耐药癫痫大鼠海马LFS可增加刺激部位脑组织透析液中GABA水平,提高GABA/Glu比值,这可能是LFS抑制癫痫发作的机制之一。

Seipin敲低大鼠PC12细胞株的构建和对细胞凋亡的影响

目的:构建大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞的先天性脂肪代谢障碍2型(BSCL2/Seipin)敲低细胞株,探讨Seipin敲低后对细胞凋亡的影响。方法:将PC12细胞分为空白感染组和助感染组(加助感染试剂Hitans G),采用不同慢病毒感染复数(MOI)感染细胞进行病毒预感染试验筛选助感染试剂和合适的MOI;依据上述感染条件,用阴性对照病毒和Seipin-shRNA目的病毒感染PC12细胞作为阴性对照组和Seipin敲低组,同时设置正常组(正常PC12细胞),采用蛋白质免疫印迹法检测Seipin蛋白的表达;将阴性对照组与Seipin敲低组细胞用脱氧核苷酸末端转移酶介导的d UTP缺口末端标记(TUNEL)细胞凋亡染色法和Hoechst 33258染色法检测细胞凋亡情况。结果:慢病毒MOI=100时感染效果最强,助感染试剂能增加感染效率;与正常组相比,Seipin敲低组Seipin蛋白表达水平降低(P<0.05);与阴性对照组相比,TUNEL染色结果显示Seipin敲低组发红色荧光的凋亡细胞明显增加,Hoechst染色结果显示Seipin敲低组细胞的细胞核致密浓染或碎块状致密浓染程度明显增多。结论:成功构建大鼠PC12 Seipin敲低细胞,下调Seipin蛋白表达会增加细胞凋亡。

耐苯巴比妥钠及苯妥英钠杏仁核点燃大鼠癫痫模型的制作

目的：建立耐苯巴比妥钠（PB）及苯妥英钠（PHT）的杏仁核点燃癫痫模型大鼠的方法。方法：60只雄性健康sD大鼠制作杏仁核点燃癫痫模型，采用PHT、PB对癫痫大鼠进行耐药筛选，用放电阈值（ADT）来判断癫痫大鼠对PHT和PB的敏感性，以应用PHT或PB前的ADT值为对照（对照值ADT），用药后ADT波动范围在20％对照值ADT以内为耐药癫痫模型判断标准。结果：60只大鼠，死亡13只，47只大鼠完成杏仁核点燃实验，点燃癫痫模型大鼠24只，发作强度4—5级，癫痫点燃率51％；PB及PHT筛选出7只耐药的癫痫大鼠，耐药率29．17％；耐药大鼠用药后仍可诱发癫痫发作，用药后ADT波动在20％对照值ADT之内。结论：利用杏仁核慢点燃癫痫模型大鼠建立的耐药癫痫模型可建立耐药癫痫模型。

经颅电刺激对AD模型大鼠学习记忆能力和海马CA1区BAX、BCL-2表达的影响

目的:探讨经颅电刺激对阿尔茨海默病(AD)模型大鼠学习记忆能力和海马CA1区BAX、BCL-2表达的影响。方法:将90只健康SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组及经颅电刺激(TES)2周、4周、6周组,模型组及TES各组大鼠连续6周腹腔注射1.25%D-半乳糖致衰老,再给予大鼠侧脑室注射10 g/L凝聚态β-淀粉样蛋白(Aβ25-35)的复合造模方法建立AD动物模型,假手术组侧脑室注射生理盐水,正常组不注射;TES各组大鼠于照模成功后第8天进行TES治疗(100μs脉宽、1 000 V窄高压方波),每天连续刺激l0次,刺激间隔2~3 s;采用Morris水迷宫记录各组大鼠治疗前后逃避潜伏期和穿越平台次数,用免疫组化染色观察大鼠海马CAl区Bcl-2、Bax阳性蛋白表达,实时荧光定量PCR检测Bax、Bcl-2 mRNA表达。结果:与正常组、假手术组比较,模型组大鼠的逃避潜伏期延长,穿越平台次数明显减少(P<0.05),提示造模成功;与模型组比较,TES 4周、6周组逃避潜伏期明显减少,穿越平台次数明显增多,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,TES 4周、6周组Bcl-2蛋白和mRNA表达不同程度升高,Bax蛋白和mRNA表达不同程度降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TES能够改善AD模型大鼠的学习记忆能力,其机制可能与增加海马CA1区Bcl-2 mRNA表达及减少Bax mRNA表达有关。

吸烟对大脑中动脉血流速度及搏动指数的影响

目的:吸烟对大脑中动脉(MCA)血流速度及搏动指数(PI)的影响。方法:入住神经内科的男性患者60例,根据吸烟情况分为吸烟组(n=30)和对照组(不吸烟,n=30);采用经颅多普勒超声(TCD)技术结合屏气试验检测2组受试者屏气前、屏气20 s后双侧MCA的平均血流速度(Vm)、PI、收缩期与舒张期血流速度比值(S/D),同时计算3项指标的变化率以及屏气指数(BHI),评价吸烟对患者脑血管功能的影响。结果:屏气前,吸烟组Vm明显低于对照组,PI、S/D均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);屏气后2组患者MCA的Vm均显著高于屏气前,PI、S/D均显著低于屏气前,差异有统计学意义(P<0.01);吸烟组屏气后MCA的Vm、PI及S/D3项指标的变化率均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);吸烟组BHI显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:长期吸烟可使脑血管反应性及顺应性降低。