贵州珍珠半夏高频再生体系的建立与优化

研究了贵州珍珠半夏外植体类型、外植体年龄和植物生长调节物质对植株再生的影响。结果表明,叶柄为珍珠半夏植株再生最佳外植体,叶片次之,珠芽较易再生成苗,但出芽数较低;叶柄诱导再生的适宜培养基为MS附加0.5mg/LBA和0.2mg/LIBA,叶片诱导再生的适宜培养基为MS附加0.2mg/LTDZ和0.2mg/LIBA;正常生长20d左右的外植体有利于植株再生。半夏组培苗较易生根;生根苗经过驯化移栽后成活率均在95%以上。

贵州地方稻种资源的ISSR遗传多样性评价

利用ISSR标记对27份贵州地方稻种资源进行了遗传多样性鉴定与评价。结果表明,用筛选出的12条引物进行PCR扩增,共扩增出清晰、重复性好的谱带155个,其中127个具有多态性,比率为81.9%。ISSR指纹图谱表明,3个引物就能有效地将27份稻种资源完全区别;聚类分析表明,供试品种间的遗传相似性系数为0.555～0.942。在相似性系数为0.66时可将供试种基本按糯性与非糯性分为两大类群。

11种兰属植物DNA的提取及RAPD-PCR实验体系的建立与优化

采用改进的CTAB-DNA提取方法，从11种兰属植物的嫩叶中提取总DNA。所得的DNA样品的A260／A280值在1．7～1．9之间，琼脂糖凝胶上主带清晰，较少降解，样品纯度高，DNA量大。另外，对影响RAPD-PCR的Mg^2＋、dNTPs、Taq酶、引物浓度等因素进行了优化。确定优化的反应体系为：75ng模板DNA，1×Buffer，2．5mmol／LMg^2＋，0．15mmol／LdNTPs，0．75UTaq酶，引物浓度0．4μmol／L，反应总体积为25山。该体系在20个供试兰属实验材料中获得较好的扩增结果。

木豆高频不定芽再生及体细胞遗传变异的分子检测

以木豆子叶节为外植体,建立高频不定芽再生体系,并对继代丛芽的遗传变异进行分子检测。结果表明:子叶节不定芽再生的最佳培养基为EC6附加4.0mg/LBA和0.1mg/LIBA;丛芽增殖培养以EC6附加4.5mg/LBA、0.1mg/LIBA和0.4mg/LKT效果最佳。同时,随机挑选继代第5代的20个丛芽提取基因组DNA,采用45个ISSR引物对基因组DNA进行分子检测,结果显示,在所用引物范围内均未检测到变异。

利用ISSR标记解析黔东南玉米地方种质的遗传多样性

采用ISSR标记技术对来自贵州省黔东南州的43份玉米地方种质遗传多样性进行了评价。结果表明,用筛选出的17条引物进行PCR扩增,共扩增出清晰、重复性好的谱带261条,其中257条具有多态性,多态性比率为98.5%。品种间遗传多样性分析表明,其遗传相似系数变化范围为0.579-0.828。以ISSR构建的指纹图谱表明,其中有2条引物能有效地将43份玉米资源完全区别。表明贵州省黔东南州地方玉米种质间存在着丰富的遗传多样性。