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本科《生命科学导论》通识课程教学改革的探讨 被引量:1
1
作者 秦利军 赵德刚 《教育教学论坛》 2018年第40期142-144,共3页
从《生命科学导论》通识课程开设的现状、必要性以及教学任务和目标探讨出发,研究我校"生命科学导论"课程教学改革的重要性,提出用改革课程内容与教学手段等方法来促进《生命科学导论》授课的体系化、系统化和规范化,拓宽学... 从《生命科学导论》通识课程开设的现状、必要性以及教学任务和目标探讨出发,研究我校"生命科学导论"课程教学改革的重要性,提出用改革课程内容与教学手段等方法来促进《生命科学导论》授课的体系化、系统化和规范化,拓宽学生生物学及相关领域的知识面,加深学生对生命现象本质的认知,理解生命科学与其他自然学科之间的密切关系和相互联系,进而真正实现对我校非生物学本科生生命科学理论知识的普及化教育。 展开更多
关键词 生命科学导论 通识课 教学改革
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农杆菌介导McCHIT1基因遗传转化水稻茎尖研究 被引量:5
2
作者 张笑寒 仇志浪 赵德刚 《中国农学通报》 2016年第27期114-120,共7页
为了提高农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化效率,笔者以贵州特有的地方水稻品种‘平塘黑糯’茎尖为材料,以含有Ubiqutin启动子驱动苦瓜几丁质酶基因McCHIT1表达的植物表达载体p Cambia-UbiMcCHIT1为转化载体,采用正交试验设计,系统研究了菌... 为了提高农杆菌介导的水稻茎尖遗传转化效率,笔者以贵州特有的地方水稻品种‘平塘黑糯’茎尖为材料,以含有Ubiqutin启动子驱动苦瓜几丁质酶基因McCHIT1表达的植物表达载体p Cambia-UbiMcCHIT1为转化载体,采用正交试验设计,系统研究了菌液OD600值、真空处理时间和真空渗透压强对水稻茎尖遗传转化效率的影响。结果表明:在3个因素中,真空处理时间是影响水稻转化效率和死亡率的最关键因素。农杆菌介导‘平塘黑糯’茎尖遗传转化的最优条件为农杆菌菌液浓度OD600为1.0、真空处理时间为7 min、真空渗透压强为15 k Pa。GUS组织化学染色和PCR分子鉴定表明,通过本研究优化的农杆菌介导水稻茎尖遗传转化体系,已将苦瓜的几丁质酶基因McCHIT1已整合到水稻基因组中,获得转McCHIT1基因‘平塘黑糯’新种质。 展开更多
关键词 水稻 茎尖 遗传转化 McCHIT1基因
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杜仲EuCHIT1基因表达载体构建及在大肠杆菌中的表达 被引量:5
3
作者 董旋 丁延庆 +1 位作者 冉昕 赵德刚 《山地农业生物学报》 2016年第5期9-12,共4页
构建了T7启动子驱动杜仲几丁质酶基因EuCHIT1的原核表达载体pET-EuCHIT1和pMCSG-EuCHIT1,其表达产物分别含6个组氨酸(6His)标签和6个组氨酸连接的麦芽糖结合蛋白(his6-tag–maltose-binding pro-tein, MBP)标签,分别将重组载体遗传... 构建了T7启动子驱动杜仲几丁质酶基因EuCHIT1的原核表达载体pET-EuCHIT1和pMCSG-EuCHIT1,其表达产物分别含6个组氨酸(6His)标签和6个组氨酸连接的麦芽糖结合蛋白(his6-tag–maltose-binding pro-tein, MBP)标签,分别将重组载体遗传转化大肠杆菌细胞BL21(DE3),在37℃、150 rpm条件下培养至菌液OD值为0.4~0.8后,转到16℃、150 rpm条件下以1 mM IPTG诱导培养12 h,表达产物经SDS-PAGE分析,pET-Eu-CHIT1/BL21( DE3)表达以包涵体形式存在36.03 kD融合蛋白,pMCSG-EuCHIT1/ BL21( DE3)成功表达可溶形式存在的77.21 kD融合蛋白。故可以使用pMCSG-EuCHIT1/ BL21( DE3)获得可溶的融合蛋白,为之后的EuCH-IT1的多克隆抗体的制备和及功能研究奠定基础。 展开更多
关键词 杜仲 几丁质酶基因( EuCHIT1) 原核表达 可溶性蛋白
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应用Gene-deletor系统创制安全复合抗逆转ZmSDD1、BT和BAR基因玉米新种质研究 被引量:1
4
作者 项阳 刘延波 +1 位作者 赵德刚 Yi Li 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期1953-1961,共9页
本研究通过农杆菌介导玉米茎尖遗传转化法将含有花粉特异启动子Zm13驱动的Gene-deletor外源基因清除系统、表达元件Ubi-Zm SDD1-3'UTR、Actin-Bt-NOS和Ubi-Bar::GUS-3'UTR的植物表达载体遗传转化玉米交51,经过除草剂初步筛选、... 本研究通过农杆菌介导玉米茎尖遗传转化法将含有花粉特异启动子Zm13驱动的Gene-deletor外源基因清除系统、表达元件Ubi-Zm SDD1-3'UTR、Actin-Bt-NOS和Ubi-Bar::GUS-3'UTR的植物表达载体遗传转化玉米交51,经过除草剂初步筛选、GUS组织化学染色和PCR分子鉴定,获得31株转基因植株。研究表明转基因植株比野生型植株具有更强抗旱性、抗玉米螟能力和抗除草剂草丁膦的能力。抗旱性鉴定表明干旱处理后转基因植株的存活率比野生型高70%,同时,转基因植株的叶片保水性显著高于野生型植株。抗虫性试验表明转基因植株的叶片蛀孔少而小,对玉米螟具有明显抗性,还抑制了玉米螟的取食和发育。叶片离体和田间抗除草剂试验表明转基因植株比野生型能够抵抗更高的除草剂浓度,最高可抵抗150 mg/L草丁膦浓度。同时,在统计的20株转基因玉米植株的基因删除效率时发现部分植株可完全清除玉米中的外源基因,对于未完全清除的玉米植株还需要进一步研究。本研究创制了一种抗虫、抗除草剂、抗旱的复合性状转基因玉米新种质,可为培育多性状叠加的转基因玉米新品种奠定基础,同时结合"Gene-deletor"技术,为实现转基因生物安全提供技术支撑。 展开更多
关键词 玉米 抗逆性 转基因安全
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大豆GmAP1基因的功能初探 被引量:3
5
作者 宋拉拉 张晓玫 +2 位作者 陈福禄 傅永福 赵德刚 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期84-89,共6页
以大豆天隆1号为材料,根据Glycine max Wm82.a2.v1中大豆基因组的预测序列,克隆出一个AP1同源基因,命名为GmAP1。该基因编码区CDS长度为711 bp,编码一个含236个氨基酸的蛋白质。对蛋白质序列的结构分析结果显示GmAP1蛋白符合MADS-box基... 以大豆天隆1号为材料,根据Glycine max Wm82.a2.v1中大豆基因组的预测序列,克隆出一个AP1同源基因,命名为GmAP1。该基因编码区CDS长度为711 bp,编码一个含236个氨基酸的蛋白质。对蛋白质序列的结构分析结果显示GmAP1蛋白符合MADS-box基因家族特征。为了初步分析GmAP1的功能,利用实时定量RT-PCR分析GmAP1在不同花器官中表达,并且在拟南芥中过表达该基因。在不同花器官中,GmAP1表达量不同,在花萼中表达量较高;花瓣次之。GmAP1过表达植株表现出早花、植株矮小以及花器官(花瓣、雄蕊和雌蕊)数量增多等表型。结果表明,大豆的GmAP1是一个功能保守的AP1基因,在花的发生和花器官发育中起着重要作用。 展开更多
关键词 开花 花萼 GmAP1 MADS基因 大豆
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过表达GmAP1.2转基因大豆的遗传转化及植株发育特性
6
作者 周航 陈福禄 +2 位作者 傅永福 宋莉 张晓玫 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期833-839,共7页
为研究大豆GmAP1.2(Glyma.08G269800)的生物学功能,通过农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化法将GmAP1.2基因遗传转化至大豆天隆1号,获得过表达GmAP1.2转基因植株;并对转基因大豆的株高、花器官、叶片等特性进行分析。结果表明,GmAP1.2过表... 为研究大豆GmAP1.2(Glyma.08G269800)的生物学功能,通过农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化法将GmAP1.2基因遗传转化至大豆天隆1号,获得过表达GmAP1.2转基因植株;并对转基因大豆的株高、花器官、叶片等特性进行分析。结果表明,GmAP1.2过表达使转基因大豆比野生型(WT)早花31d,株高明显降低,且与野生型相比,GmAP1.2转基因大豆叶片变小,叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量分别增加了1.43、1.52和1.57倍,但未影响花器官结构。表明GmAP1.2不仅能够影响大豆的株型,还能影响叶片的大小和叶绿素的含量。本研究结果为进一步阐明大豆AP1基因在大豆中的功能与应用奠定了理论基础。 展开更多
关键词 大豆 GmAP1.2 转基因 开花时间 株高
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杜仲BR受体蛋白基因EuBRI1克隆及生物信息学分析 被引量:6
7
作者 刘明月 赵懿琛 赵德刚 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期1582-1588,共7页
为解析杜仲BR相关基因功能,本研究通过前期构建的杜仲转录组数据库注释的信息,获得BRI1同源序列。设计特异性引物,以杜仲基因组DNA及c DNA为模板进行PCR扩增克隆得到3 612 bp cDNA序列,命名为EuBRI1。序列分析发现EuBRI1是一个无内含子... 为解析杜仲BR相关基因功能,本研究通过前期构建的杜仲转录组数据库注释的信息,获得BRI1同源序列。设计特异性引物,以杜仲基因组DNA及c DNA为模板进行PCR扩增克隆得到3 612 bp cDNA序列,命名为EuBRI1。序列分析发现EuBRI1是一个无内含子的完整开放阅读框,编码1 203个氨基酸的蛋白。分析表明,EuBRI1为稳定亲水性蛋白,相对分子质量为131.361 kD;理论等电点p I为6.31;对其二级结构分析显示α-螺旋占31.50%,无规卷曲占55.94%,延伸链占12.55%,EuBRI1含信号肽序列和跨膜结构以及BRI1家族激酶的保守结构域。进化树分析表明,EuBRI1蛋白序列与醋栗番茄(Solanum pimpinellifolium)BRI1进化上较接近,与橡胶树(Hevea brasiliensis)BRI1相对等较远。研究结果为进一步阐明杜仲BR相关基因的功能奠定基础。 展开更多
关键词 杜仲 EuBRI1 基因克隆 生物信息学分析
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贵州地方稻种来拢大粒突变体bs3光合特性分析 被引量:1
8
作者 黄仁权 曾晓芳 赵德刚 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第20期6847-6854,共8页
本研究以甲基磺酸乙酯(ethylmethane sulfonate, EMS)诱变处理贵州地方稻种来拢获得的大粒突变体bs3 (Big seed 3)为材料,对其扬花期剑叶的光合特性和成熟期产量特征进行了研究。结果表明bs3植株除具有籽粒增大的特点外,其株高、有效穗... 本研究以甲基磺酸乙酯(ethylmethane sulfonate, EMS)诱变处理贵州地方稻种来拢获得的大粒突变体bs3 (Big seed 3)为材料,对其扬花期剑叶的光合特性和成熟期产量特征进行了研究。结果表明bs3植株除具有籽粒增大的特点外,其株高、有效穗粒数、粒长、千粒重也显著高于野生型;bs3在扬花期的剑叶类胡萝卜素含量(4.35 mg/g FW)和光合色素总量(6.89 mg/g FW)分别比野生型(类胡萝卜素含量为3.23 mg/g FW,光合色素总量为5.75 mg/g FW)提高了34.7%和20.5%;bs3剑叶的净光合速率、胞间CO_2浓度、水分利用率、气孔导度及蒸腾速率均高于野生型。说明突变体bs3的光合特性与野生型相比发生了显著的变化。 展开更多
关键词 地方稻种来拢 突变体bs3 光合特性 产量
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本科《茶树病虫害防治学》专业课程教学改革的探讨 被引量:6
9
作者 秦利军 赵德刚 《才智》 2018年第28期156-157,共2页
从茶树病虫害防治的重要性出发,研究我校茶学专业开设"茶树病虫害防治学"课程教学改革的重要性,提出用改革课程内容与教学手段等方法来促进《茶树病虫害防治学》授课的体系化、系统化和规范化,拓宽学生在植物病理学、微生物... 从茶树病虫害防治的重要性出发,研究我校茶学专业开设"茶树病虫害防治学"课程教学改革的重要性,提出用改革课程内容与教学手段等方法来促进《茶树病虫害防治学》授课的体系化、系统化和规范化,拓宽学生在植物病理学、微生物学、细胞生物学等领域的知识面,加深学生对茶树病虫害的认识,利用合理有效地方法对病虫害进行防控,真正实现知识的内化和应用。 展开更多
关键词 茶树病虫害防治 专业课 教学改革
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超量表达NtHAK1基因提高烟草干旱胁迫能力 被引量:6
10
作者 张祎 秦利军 +1 位作者 赵丹 赵德刚 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第8期1444-1452,共9页
高亲和钾离子通道蛋白(high-affinity potassium transporter protein,HAK)在植物干旱胁迫过程中起重要调控作用。本研究以超量表达NtHAK1基因烟草(Nicotiana tabacum)T4代种子为材料,分析干旱胁迫后种子发芽相关生理指标以及烟草抗性... 高亲和钾离子通道蛋白(high-affinity potassium transporter protein,HAK)在植物干旱胁迫过程中起重要调控作用。本研究以超量表达NtHAK1基因烟草(Nicotiana tabacum)T4代种子为材料,分析干旱胁迫后种子发芽相关生理指标以及烟草抗性相关指标。结果表明,干旱处理后,转基因烟草种子的平均发芽势、发芽率和发芽指数均高于野生型烟草种子。随干旱处理时间的延长,野生型烟草3 d即出现叶片萎蔫并停止生长,而转基因烟草到10 d出现叶片萎蔫现象,野生型烟草叶片相对含水量降幅更大。同时,干旱胁迫3 d时,转基因烟草植株体内MDA积累量显著低于野生型(P<0.05)。转基因和野生型烟草植株脯氨酸含量、SOD活性和CAT活性均呈上升趋势,但转基因烟草植株的涨幅高于野生型,差异达到显著水平(P<0.05)。干旱胁迫引起转基因烟草植株钾吸收相关基因VAG1和HAK1表达上调。干旱胁迫3 d时,超量表达NtHAK1基因极显著提高了植株钾含量。综上所述,超量表达NtHAK1基因增强了烟草在干旱逆境中的耐受力。本研究为后续培育耐旱烟草新种质和进一步研究超量表达NtHAK1烟草对干旱胁迫耐受机制提供参考。 展开更多
关键词 NtHAK1 干旱胁迫 生理指标 烟草
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朝仓花椒几丁质酶类似基因的克隆及分析 被引量:8
11
作者 刘雪薇 赵懿琛 赵德刚 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期1562-1569,共8页
根据本实验室已建立的朝仓花椒转录组数据库提供的序列信息设计引物,以朝仓花椒嫩芽为材料提取总m RNA,采用RACE技术克隆了朝仓花椒几丁质酶基因5’端1 080 bp和3’端896 bp c DNA片段,连接至p UC19载体,经测序拼接后获得全长1 373 bp的... 根据本实验室已建立的朝仓花椒转录组数据库提供的序列信息设计引物,以朝仓花椒嫩芽为材料提取总m RNA,采用RACE技术克隆了朝仓花椒几丁质酶基因5’端1 080 bp和3’端896 bp c DNA片段,连接至p UC19载体,经测序拼接后获得全长1 373 bp的(Zanthoxylum piperitum DC.var.inerme Makino Chitnase 1,Za CHI 1)c DNA序列,其中开放阅读框969 bp,共编码322个氨基酸残基。在NCBI中BLASTp比对,Za CHIT 1与c克莱门柚、土瓶草CHIT序列同源性分别为88%和81%;预测的蛋白质Za CHIT 1氨基酸序列经BLAST比对,显示该预测蛋白质序列属于lysozyme-like超家族。对Za CHIT 1基因在不同器官中的表达量进行测定后发现,该基因在不同器官中的表达量有明显的差异,在器官中具体表现为在茎中最高,其次是果实,最后是叶片。此外,该基因的表达量与性别无关。 展开更多
关键词 朝仓花椒 几丁质酶 基因克隆
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百脉根原生质体制备酶解液优化及再生壁纤维素含量分析 被引量:6
12
作者 蒋友燊 宋莉 赵德刚 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期2274-2277,共4页
为了解百脉根细胞壁形成中纤维素含量的变化,以其成熟叶片为材料,筛选优化原生质体分离制备的酶解液组成和制备培养原生质体,并测定原生质体再生壁形成过程中的纤维素含量。结果表明,优化后的酶解液配比为:1.00%纤维素酶+1.00%果胶酶+0.... 为了解百脉根细胞壁形成中纤维素含量的变化,以其成熟叶片为材料,筛选优化原生质体分离制备的酶解液组成和制备培养原生质体,并测定原生质体再生壁形成过程中的纤维素含量。结果表明,优化后的酶解液配比为:1.00%纤维素酶+1.00%果胶酶+0.50%半纤维素酶,该酶液制备的原生质体产量和活力分别为1.12×106个/g·FW和68.7%。纤维素含量随着细胞壁的形成而逐渐增加,原生质体在培养1 d、3 d、5 d和7 d时,其纤维素含量分别占再生壁干重的1.13%、4.17%、8.08%和12.79%。 展开更多
关键词 百脉根 原生质体 细胞壁 纤维素
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转TfdA基因提高黑麦草抗除草剂2,4-D能力 被引量:2
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作者 李翠翠 韩丽珍 赵德刚 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期2076-2082,共7页
本研究以一年生黑麦草(Lolium multiflorum L.)为材料,通过农杆菌介导的茎尖转化法将降解除草剂2,4-D的Tfd A基因转入黑麦草。除草剂2,4-D喷施实验表明野生型黑麦草在10 g/L 2,4-D喷施17 d后黄化死亡,而转基因植株(转Act1::Tfd A基因和A... 本研究以一年生黑麦草(Lolium multiflorum L.)为材料,通过农杆菌介导的茎尖转化法将降解除草剂2,4-D的Tfd A基因转入黑麦草。除草剂2,4-D喷施实验表明野生型黑麦草在10 g/L 2,4-D喷施17 d后黄化死亡,而转基因植株(转Act1::Tfd A基因和Act1::Tfd A-Zml3::Flp基因)在10 g/L 2,4-D处理下仍生长良好,喷施10 g/L 2,4-D后所有植株叶片的叶绿素含量均下降,分别为2.411 mg·g-1·FW、3.006 mg·g-1·FW和3.039 mg·g-1·FW,比喷施前下降了24.444%、2.592%和1.619%。Tfd A基因在黑麦草中的表达显著提高了转Tfd A基因黑麦草抗2,4-D除草剂的能力。 展开更多
关键词 黑麦草 茎尖转化 Tfd A基因 2 4-D
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