侵染贵州烟草的辣椒脉斑驳病毒鉴定及其基因组分子特征分析

【目的】明确辣椒脉斑驳病毒(Chilli veinal mottle virus,ChiVMV)在贵州烟草上的发生情况及其与我国其他省份不同ChiVMV株系之间的遗传进化关系,为制定科学合理的防控措施提供依据。【方法】从贵州省贵阳、遵义、安顺和铜仁的烟田采集表现叶片斑驳、皱缩、坏死和花叶等症状的疑似病毒侵染的烟叶样品80份。采用RT-PCR法,设计多种病毒引物对所采集的样品进行检测,对检测出的ChiVMV进一步进行PCR分段扩增以获得贵州烟草ChiVMV的全基因组序列,基于NCBI已公布的所有ChiVMV基因组序列进行序列一致性分析并构建系统发育进化树,以研究贵州ChiVMV烟草分离株的遗传进化关系。【结果】RT-PCR检测结果显示,ChiVMV在贵州烟区检出率为37.50%,烟草普通花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)检出率为48.75%,马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)的检出率为35.00%,黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)检出率仅8.75%;检测出4种复合侵染类型TMV+PVY、PVY+ChiVMV、PVY+CMV和ChiVMV+PVY+TMV,检出率分别为26.25%、6.25%、10.00%和3.75%。PCR分段扩增获得贵州省烟草分离株ChiVMV-GZ(GenBank:OP589298),其与来自四川的番茄分离株(KC711055)和四川烟草分离株(MK405594)具有较高的序列一致性(98.70%和98.50%);构建系统发育进化树发现其与来自四川和云南的ChiVMV株系聚为一支。【结论】辣椒脉斑驳病毒在贵州烟草上的为害已日趋严重,应当引起足够重视,本研究在贵州烟草上分离获得分离株ChiVMV-GZ并扩增获得该病毒全基因组;基于遗传进化分析发现,ChiVMV-GZ与来自四川和云南的ChiVMV株系间的亲缘关系最近。

烟草糖苷水解酶GH3基因家族鉴定与表达分析

糖苷水解酶GH3基因家族在植物的糖代谢和生长发育中起着重要作用,而烟草GH3基因家族目前尚未见相关鉴定和分析研究报道。本研究采用生物信息学方法在烟草基因组中鉴定GH3家族基因,并对其在不同组织中及逆境条件下的表达模式进行了分析。结果表明,在普通烟草K326的基因组中共鉴定出35个GH3基因,其中23个被定位在14条染色体上,存在6对共线性基因;GH3家族蛋白均为热稳定性蛋白,其基因上游启动子区均包含多个激素和胁迫响应元件。转录组数据表明,GH3家族基因大多数在烟苗茎尖高表达,少部分在根和茎中高表达,表达量受光照时间影响;烟苗受到干旱胁迫后GH3家族成员都有不同程度的响应。挑选4个NtGH3基因进行qRT-PCR分析,结果表明,NtGH3-5、NtGH3-19、NtGH3-22、NtGH3-26可能参与响应低温以及ABA处理。这可为深入了解烟草GH3基因家族及其功能提供依据。

贵州省烟草病毒病的发生及综合防治措施

烟草病毒病是烟草生产中最具破坏性的病害之一,具传播快和防治难等特点.贵州省烟区病毒病发生严重,尤其是烟草花叶病毒(TMV)、马铃薯Y病毒(PVY)和黄瓜花叶病毒(CMV)分布广,发生普遍.本文介绍了贵州省烟草病毒病的发生情况,阐述了TMV, PVY和CMV等3种主要病毒的发生特点、症状及其检测方法,并提出了防治措施,以期为贵州省烟草病毒病的防治提供参考.

烟草叶斑病菌Cumuliphoma indica的生物学特性及室内药剂筛选

烟草是重要的经济作物,其叶具有较高的经济价值。近年来,随着烟草种植面积增加,叶部病害种类呈上升趋势。前期从广西壮族自治区贺州市烟区烟叶病样中分离得到2株烟草叶斑病致病菌,经多基因系统发育分析,确定为Cumuliphoma indica,是国内关于该病原菌引起烟草叶斑病的首次报道。为明确该病原菌的生物学特性并筛选防治药剂,本研究采用菌丝生长速率法,研究分离菌株菌丝的致死温度,以及其在不同培养基、温度、pH、碳源、氮源、光照周期条件下的生长情况,并测定病原菌对9种化学药剂的敏感性。生物学特性研究结果表明:C.indica菌丝生长的温度范围广,最适温度为28℃;弱酸性环境更利于菌丝生长,最适pH为5;在玉米粉琼脂培养基(CMA)和察氏培养基(CDA)上生长最快;最适氮源为蛋白胨;最适碳源为可溶性淀粉;菌丝致死温度为49℃,水浴10 min;光照对菌丝生长有显著影响,24 h全光照对其最有利。室内防治药剂筛选结果表明:9种供试杀菌剂对C.indica菌丝生长均有不同程度的抑制作用,其中50%啶酰菌胺WG抑菌效果最好,EC_(50)为0.025 mg/L;其次分别是50%咯菌腈FS(0.084 mg/L)、500 g/L异菌脲SC(0.217 mg/L)、450 g/L咪鲜胺EW(1.354 mg/L)、80%代森锰锌WP(6.565 mg/L)、10%苯醚甲环唑ME(9.576 mg/L)、25%吡唑醚菌酯(34.237 mg/L)和40%腈菌唑SC(38.804 mg/L);430 g/L戊唑醇SC的抑制作用最弱,EC50为42.574 mg/L。本研究揭示了C.indica的生物学特性,推荐50%啶酰菌胺WG作为防治候选杀菌剂,本结果可为由C.indica引起烟草叶斑病的有效防治提供参考和依据。

基于重测序的BBLa过表达烟草雄性不育变异检测分析

BBLa基因编码小檗碱桥状酶(Berberine bridge enzyme-like, BBLa),烟草小檗碱桥状酶参与烟碱生物合成的最终催化步骤。课题组前期研究发现,BBLa过表达烟草T0代植株中出现雄蕊败育表型。为进一步了解该雄性不育表型的遗传机制,本研究以过表达BBLa烟草雄性不育表型OE1和野生型烟草WT为材料,基于全基因组重测序技术,对单核苷酸多态性(SNP)、插入-缺失(InDel)及染色体结构变异(SV)3种变异类型进行标记注释,平均测序深度≥14×,平均覆盖率≥95%。结果表明,在2个样本中共检测到7 505 620个SNP、628 034个InDel、79 576个SV。通过2个样本的SNP差异比对筛选,最终得到174个候选基因。

烟草碳代谢产物及关键酶基因对移栽期的响应

探究威宁黑石地区移栽期对云烟87大田期碳代谢产物含量、碳代谢酶活性及其关键基因表达量的影响,为明确威宁黑石地区最适宜的移栽时期,提高烟叶品质提供理论依据。以云烟87为试验材料,采用随机区组试验设计,移栽期设4个水平:T1(4月10日)、T2(4月20日)、T3(4月30日)、T4(5月10日),2022年于毕节市威宁地区开展田间试验,在大田不同生育时期测定云烟87碳代谢产物及关键酶基因对移栽期的响应。结果表明,云烟87旺长期、现蕾期烟叶中还原糖含量呈先升后降的趋势,且随生育进程推进,各移栽期处理的还原糖含量也呈先升后降的趋势,T2处理烟叶还原糖含量在多数生育期处于较高水平;各移栽期处理的总糖含量的变化规律在各生育期都不尽相同,T2处理烟叶总糖含量在多数生育期处于较高水平;淀粉含量则随移栽期推迟,在生育前期呈先降后升的趋势,在生育后期呈先降后升再下降的趋势。碳代谢酶活性方面,移栽后30~70 d,α-淀粉酶(α-Amylase)活性最低的处理均为T3或T4处理,T2处理活性均为最高或第二高;在同一生育时期内,蔗糖合成酶(SS)、蔗糖转化酶(INV)、蔗糖磷酸合成酶(SPS)活性最高的多数为T3、T4处理。碳代谢关键酶基因表达量方面,α-淀粉酶基因(Ntα-Amylase)、蔗糖酶合成酶基因(NtSS)表达量总体以较早移栽处理(4月10日、4月20日)较高。相关性结果分析表明,碳代谢产物含量、碳代谢酶活性及其关键酶基因表达量之间在不同生育时期均有不同程度的联系。综上,威宁黑石地区4月20日移栽,有利于碳代谢活动的进行。

烟草西柏烷二萜醇类突变体的理化特征及其突变机制解析

以烟草突变体及其野生型为材料,通过测定农艺性状、腺毛密度、西柏烷二萜醇及其代谢前体物含量、西柏烷二萜醇类代谢关键基因的表达量,分析了突变体的生理生化和代谢差异,并结合基因表达差异初步解析了其突变的生理与分子机制。结果表明,突变体西柏三烯一醇和西柏三烯二醇含量分别是野生型的2.63倍和4.03倍,均极显著高于野生型;突变体分泌型腺毛密度为757.38条/cm 2,极显著大于野生型;突变体西柏烷二萜醇类代谢前体物IPP和GGPP分别为849.83 ng/g、298.29 ng/g,与野生型间的差异不显著;突变体西柏三烯一醇合成酶基因NtCYC-1、西柏三烯二醇合成酶基因NtCYP71D16的表达量分别是野生型的17.77倍和20.89倍,均极显著高于野生型。研究表明,突变体是一个培育优质、抗虫烤烟新品种的优良材料;其发生突变的原因是NtCYC-1、NtCYP71D16基因发生表达上调,促进了西柏三烯一醇、西柏三烯二醇的合成反应,同时,突变体的分泌型腺毛密度更高,为西柏烷二萜醇类的合成提供了更多的场所,使得西柏烷二萜醇类的含量显著提高。

烟草NtCYP734A1基因的克隆及表达分析

油菜素内酯是一种参与胁迫响应的甾醇类植物激素,CYP734A1基因是油菜素内酯代谢通路上的关键基因。为探索CYP734A1基因在烟草响应非生物胁迫时发挥的功能,本研究以普通烟草品种K326为材料,克隆CYP734A1基因,通过生物信息学技术分析NtCYP734A1蛋白的理化性质及进化关系,运用实时荧光定量法分析CYP734A1基因在不同组织、不同非生物胁迫处理下的基因表达模式。结果表明,CYP734A1基因全长1638 bp,编码545个氨基酸;亚细胞定位预测NtCYP734A1蛋白存在于内质网。qRT-PCR分析表明,烟草CYP734A1基因在不同组织均有表达,叶中表达量最高,茎中的表达量最低。非生物胁迫处理下,CYP734A1基因在各组织的表达量显著改变,在干旱、盐和低温胁迫下根的CYP734A1基因表达上调;在干旱、盐、高温和低温共4种胁迫下,叶中CYP734A1基因表达下调。

浅色戈卢别夫氏菌对烟草种子萌发及幼苗生长的影响

为探究浅色戈卢别夫氏菌培养液对烟草种子萌发及幼苗生长的影响,以烤烟品种‘K326’为试验材料,用不同浓度(原液、1/10原液、1/50原液、1/100原液、1/200原液)浅色戈卢别夫氏菌(Golubevia pallescens)培养液对烟草种子进行浸种处理,分析其对种子发芽势、发芽率、发芽指数以及根长的影响;用3个浓度(原液、1/50原液、1/100原液)浅色戈卢别夫氏菌培养液喷施烟草幼苗叶片,分析其对烟草幼苗生长及抗氧化代谢酶活性的影响。结果表明:1/100原液浸种处理对烟草种子萌发具有促进作用,发芽势、发芽指数和根长显著高于对照;喷施烟草幼苗叶片后,1/50原液可显著提高叶长、叶宽、株高、叶绿素a、叶绿素b、类胡萝卜素含量和过氧化氢酶(CAT)活性;1/100原液可显著提高烟草幼苗的根系活力,显著降低多酚氧化酶(PPO)活性。综上,浅色戈卢别夫氏菌培养液能显著促进烟草种子萌发和根的伸长,并显著促进烟草幼苗生长,提高其抗氧化能力。

贵州省遵义市烟区施用钙、镁肥对烤烟K326产量和品质的影响

钙、镁、硫是植物必需中量营养元素,农业生产中主要施氮、磷、钾肥并强调其平衡施用,近些年来开始逐渐重视微量元素肥料施用,但仍然忽视并很少施用镁等中量元素肥料。因此,以烤烟K326为供试材料,通过开展钙、镁肥的二因素三水平大田试验,研究钙镁肥施用量对遵义市湄潭县烟地烤烟农艺性状、产量及品质的影响,为当地烤烟合理施用钙镁肥提供参考。结果表明,施用钙肥降低了烤烟的茎高、茎粗、最大叶长、最大叶宽和叶面积等农艺性状,而施用镁肥能改善烟株农艺性状。钙肥(CaO)施用量84 kg/hm^(2)时显著降低了烤烟的产量和产值(P<0.05),施用镁肥均能增加烤烟的产量和产值,随着镁肥用量的增加,烤烟产量与产值表现出先增加后降低的趋势,其中施用镁肥(MgO)25 kg/hm^(2)时产量和产值显著高于其他处理。从化学品质指标看,施用钙镁肥均会降低烟叶钾含量、提高烟叶还原糖含量和糖碱比。T_(1)不施钙镁肥处理多数指标优于T_(10)施烤烟专用复合肥处理,表明当前的烤烟专用肥可能存在钙镁不平衡现象。综合各指标看,遵义烟区在当前氮磷钾肥施用量基础上不施钙肥而增施镁肥25 kg/hm^(2)更利于烤烟产量与品质的平衡以及获取更大的经济效益。

贵州地方樱桃番茄资源产量品质比较分析

以145份贵州地方番茄资源为材料,测定其平均单株产量、单果重、果形指数、可溶性固形物、维生素C、可溶性糖、可滴定酸、糖酸比、番茄红素、可溶性蛋白等10个性状,采用统计分析法结合DTOPSIS法对各材料进行综合评价分析。结果表明,各性状分别分布在303.71~7247.90 g、2.51~59.90 g、0.48~1.71、1.33%~6.97%、9.78~50.76 mg·(100 g)^(-1)、0.31%~4.47%、1.05%~8.97%、0.05~2.25、0.86~8.91 mg·g^(-1)和0.13~2.56 mg·g^(-1)之间;各性状之间差异明显,遗传多样性丰富,变异系数分布在19.03%~83.25%范围内,遗传多样性指数H’为1.37~2.01;综合性状排名前五的资源为来源于马场村、独山县5、乌当区4、普安县2和紫云县2的地方樱桃番茄。

广西烟区烟蚜为害烟草的经济损失及防治指标

【目的】明确广西烟区烟蚜的田间防治指标,为广西烟区烟蚜的精准防控提供科学依据。【方法】采用田间笼罩接虫法,烟蚜接虫数量设0(CK)、10、50、100和200头/株5个处理,每处理40株烟,研究烟蚜发生量与烟株生长发育及烤后烟叶品质、烟叶经济损失、烟叶产量损失间的关系,获得其经济阈值和生态经济阈值。【结果】接虫后,烟株的株高、叶片数、最大叶宽和最大叶面积均随着接虫数量的增加而降低,接虫数量与烟株农艺性状各指标呈负相关。烟蚜为害会导致烤后烟叶总糖、还原糖、糖碱比和氮碱比显著上升(P<0.05,下同),淀粉、总氮、粗蛋白、烟碱和钾含量显著下降,两糖比无显著变化(P>0.05);接虫数量与总糖、还原糖、两糖比、氮碱比和糖碱比呈正相关,其中与氮碱比和糖碱比达极显著水平(P<0.01,下同),与总氮和烟碱呈极显著负相关;烟蚜为害并不会显著降低烤后烟叶化学成分综合协调性指标。烟叶的产量和产值均随着烟蚜接虫数量的增加而逐渐降低,接虫数量为10、50、100和200头/株时,其产量分别为2085.30、2023.20、1972.80和1916.10 kg/ha,产量损失率分别为1.18%、4.21%、6.48%和9.11%,产值分别为57623.36、54288.23、51792.62和48987.77元/ha,经济损失率分别为4.63%、10.27%、14.35%和18.83%。烟蚜的经济阈值为11.99~65.50头/株,生态经济阈值为23.41~90.30头/株。【结论】随着烟蚜为害程度的加重,烟株各农艺性状指标呈下降趋势,烟株长势逐渐变差,烤后烟叶化学成分综合协调性指标降低,烟叶产量、产值、上中等烟叶比例和均价逐渐下降,产量损失率和经济损失率逐渐上升。建议广西烟区烟蚜的田间防治指标为48.76头/株。

外源ABA对烟草苗期冷胁迫伤害的缓解效应研究

为探究外源脱落酸(ABA)对冷胁迫烟草幼苗的缓解效应,本研究以‘云烟97’为试材,分析了外源ABA对烟草幼苗叶片细胞膜透性、抗氧化酶活性和渗透调节物质含量的影响。结果表明,冷胁迫会增大烟草幼苗叶片细胞膜透性,随冷胁迫时间延长,膜透性逐渐增大,对烟苗产生伤害;叶面喷施ABA能维持细胞膜的相对稳定性,减轻冷胁迫对烟苗的伤害度,在冷胁迫1~4 d时,伤害度分别降低了33.36、36.78、58.60和1.86倍,显著小于未喷施外源ABA的冷胁迫处理。冷胁迫处理增加叶片丙二醛(MDA)含量,诱导抗氧化酶活性的增强,引起渗透调节物质含量的增加;而叶面喷施ABA处理能提高叶片中抗氧化酶活性,抑制MDA的过量积累,始终维持较高的渗透调节物质含量。综上,外源ABA通过调节植株保护酶活性和渗透调节水平等提高烟草幼苗抗冷性。

广西烟草棒孢霉叶斑病菌鉴定及毒素蛋白亚型检测

烟草棒孢霉叶斑病是影响烟草生产的主要叶部病害之一,为明确广西烟区该病害的病原菌及其毒素亚型,本研究对采自广西烟区的烟草叶斑病病原菌采用形态学、致病性、分子生物学进行鉴定。并利用毒素蛋白基因的特异性引物和对多种寄主植物的致病性进行毒素亚型测定。结果显示,广西烟草棒孢霉叶斑病菌为多主棒孢霉(Corynespora cassiicola),并首次鉴定、分析广西烟草棒孢霉病菌的毒素蛋白亚型,其中广西烟草棒孢霉病菌15个菌株中,14个菌株的毒素蛋白亚型为Cas0,1个菌株的毒素蛋白亚型为Cas7。结果表明,Cas0基因亚型较多,在靖西市同德乡首次发现烟草棒孢霉病菌中的Cas7毒素蛋白基因。本研究明确了广西烟草棒孢霉叶斑病病菌和病菌群体毒素亚型,可为防治烟草棒孢霉叶斑病提供基础依据。

烟草苗期病原微生物病害发生及综合防治

烟草苗期主要病原微生物病害(如炭疽病、猝倒病、立枯病和根黑腐病)的发生流行对我国烟草生产的影响逐渐加剧,研究烟草苗期病害的防治措施变得尤为重要.探索烟草苗期主要病原微生物病害的发生规律和流行趋势,以及当前的防治手段,可以保障烟草生产的质量和数量.基于此,本文对烟草病原微生物苗期病害的防治方法进行了概述,为烟苗病害的研究提供了参考和思路.

基于D值法的烟草苗期抗旱评价方法研究及抗旱材料筛选

为了探究苗期抗旱性快速评价方法,筛选烟草苗期抗旱材料,开展苗期抗旱种质鉴定和抗旱品种选育。本试验以21个品种(系)5叶1心的烟苗为材料,采用15%PEG-6000模拟干旱胁迫处理,于处理48 h测定参试材料的叶绿素a等10项生理指标,通过主成分分析、隶属函数分析和通径分析构建了烟草苗期抗旱性评价方法。结果显示,主成分分析从10项指标中筛选出叶绿素a、H_(2)O_(2)、MDA、SOD、POD等5项典型的抗旱指标;通过筛选出的5项指标与各材料D值的通径分析构建出了烟草苗期抗旱性预测模型,模型表明叶绿素a对烟草苗期抗旱性直接通径系数最大;分别以构建出的抗旱性预测模型和叶绿素a的抗旱系数对各材料进行聚类分析,均将供试材料分为高抗型、中抗型、低抗型、不抗型和敏感型等5类,同时筛选出4份苗期抗旱性较强材料。研究表明,采用15%PEG-6000模拟干旱胁迫处理,利用叶绿素a等5项指标构建的抗旱性度量值及回归预测模型可用于烟草苗期抗旱性评价,干旱胁迫后叶绿素a含量变化可用于快速鉴定烟草苗期抗旱性。

外源独脚金内酯对烟草腋芽伸长及独脚金内酯代谢途径相关基因表达的影响

通过研究外源独脚金内酯(SL)对烟草Nicotiana tabacum腋芽伸长及其SL代谢途径相关基因表达的影响,探究SL与烟草腋芽生长的关系及烟草腋芽伸长过程中SL相关基因的表达变化,为SL调控烟草腋芽生长的分子机理研究提供理论依据。采用石蜡切片和转录组技术研究烟株打顶后烟草腋芽分生组织发育及在SL生物合成类似物GR24处理下腋芽SL代谢途径相关基因表达的变化。结果表明,烟草腋分生组织由中央母细胞区(CM)、周缘分生组织(PM)和肋状分生组织(RM)三个细胞区域组成,其中CM位于腋分生组织顶端,其可通过基部及侧面细胞的分裂形成PM及RM,PM位于腋分生组织两侧,RM处于CM下方及PM内侧的位置。三个细胞区域的细胞体积、排列方式不同,说明分生组织中各部分细胞分裂存在差异性;腋分生组织发育形成腋芽后,通过外源施加不同植物生长调节剂发现,GR24能抑制1~3节位腋芽的伸长,而BR能促进腋芽伸长;转录组分析发现,SL能影响其自身代谢途径相关基因的表达,与CK和独脚金内酯合成抑制剂(TIS-108)处理相比,SL诱导D27、D14、DAD2和SMAX1-LIKE4的表达,而在TIS-108处理中D27、D14及DAD2下调表达,SMAX1的表达受到SL的抑制,而TIS-108处理诱导SMAX1的表达。烟草腋芽由腋分生组织三个细胞区域发育而来,同时,不同植物生长调节剂对烟草腋芽的影响不同,BR促进烟草腋芽的伸长,而SL抑制腋芽伸长,且在烟草腋芽伸长过程中其代谢途径相关基因可能发挥着重要的调控作用。

2种植物生长调节剂诱导烟草抗链格孢菌研究

以链格孢菌Alternaria alternata和烟草Nicotiana tabacum品种云烟87为试材,研究不同浓度茉莉酸甲酯(MeJA)和水杨酸(SA)处理下,链格孢菌菌丝生长情况以及成熟期烟叶防御酶活性与多酚含量变化,探讨植物生长调节剂对烟草抗链格孢菌的影响。结果表明,1 mmol·L^(-1)MeJA对链格孢菌的抑制效果最好,抑菌率高达59%以上,其次是3.5 mmol·L^(-1)SA;MeJA和SA对链格孢菌的抑制效果随药剂浓度升高而增强;0.1 mmol·L^(-1)MeJA和2.5 mmol·L^(-1)SA能诱导烟草叶片SOD、POD、CAT等防御酶活性,并能降低H2O2活性氧含量,尤其以MeJA诱导效果较好。2种植物生长调节剂处理并接种链格孢菌能诱导提高烟叶多酚代谢相关酶PPO及PAL活性,但对烟草多酚类物质影响较小;成熟烟叶中含量较高的前3种多酚物质是绿原酸、芸香苷、隐绿原酸。

贵州黄壤性水稻土不同粒径有机碳之间的矿化差异

以贵州长期定位试验的黄壤性水稻土为对象,以单施有机肥处理为例,采用湿筛法和碱液吸收法研究不同粒径土壤[粗颗粒(>250μm)、微团聚体(53~250μm)、单粉粒(2≤粒径<53μm)和单黏粒(<2μm)]有机碳的矿化速率和累积矿化量,为提高土壤有机碳的稳定性提供理论依据。结果表明:所有组分有机碳的矿化速率呈现出先快速上升后逐渐下降的趋势,并在培养后4 d达到峰值,矿化速率CO2-C介于0.004 0~0.050 4 g/(kg·d)之间;培养前期单粉粒有机碳和微团聚体有机碳的矿化速率较高,粗颗粒有机碳矿化速率最低。所有组分的累积矿化量CO2-C介于0.151 7~0.185 4 g/kg之间,且粗颗粒和单黏粒有机碳累积矿化量较原土分别降低了13.3%和8.18%,其他组分较原土略有提高;微团聚体和单粉粒的有机碳累积矿化量较高,分别为0.176 4 g/kg和0.185 4 g/kg,显著高于粗颗粒和单黏粒(P<0.05)。在培养前期所有组分的矿化速率方程为指数函数且达到极显著水平(P<0.01),培养后期呈对数函数(P<0.01),累积矿化量呈对数函数由快到慢增长(P<0.01)。不同粒径土壤中可矿化有机碳的分配比例无显著差异(P>0.05),固碳能力依次是:粗颗粒>单黏粒>微团聚体>单粉粒。不同粒径土壤中可矿化有机碳的分配比例随粒级减小而变大,大粒径土壤固碳能力较小粒径强。

烟草叶斑病新病原分离鉴定及其生物学特性测定

【目的】明确广西贺州烟区一种烟草真菌性叶斑病害的病原菌种类和生物学特性,为病害的及时防控和后续研究提供理论参考。【方法】采用组织分离法对从广西贺州烟区采集的具明显叶斑病症状的烟草叶片组织进行病原菌分离纯化,利用柯赫氏法则验证其致病性;通过形态学结合多基因(ITS、LSU、TUB2、RPB2)序列联合分析对病原菌进行种类鉴定;应用十字交叉法测定病原菌的生物学特性。【结果】经分离纯化共获得7株菌株,通过柯赫氏法则证明7株菌株均为烟草品种K326的叶斑病病原菌,7株菌株间的致病力无明显差异。基于ITS、LSU、RPB2和TUB2构建的系统发育进化树显示,7株菌株均与菌株Stagonosporopsis vannaccii LFN0148和S.vannaccii YTH-12聚为一支,且支持率为100%。生物学特性测定结果表明,7株菌株菌丝生长的最适温度为25~28℃,最适碳源为可溶性淀粉,最适氮源为蛋白胨和牛肉浸粉,最适pH为6~9;适宜培养基为马铃薯葡萄糖培养基(PDA)、燕麦培养基(OA)和南瓜汁琼脂培养基(PA),在全光照条件下菌丝生长最快,最低致死温度为50℃水浴10 min。【结论】引起广西贺州烟区烟草叶斑病的病原菌为S.vannaccii,该病原菌喜好在弱酸性至弱碱性、光照充足且营养丰富的环境条件下生长。在烟草生产过程中可通过控制烟草种植密度、加强田间管理以及采取化学、生物防治等方法对由S.vannaccii引起的烟草叶斑病进行综合防控。