兰科药用植物杜鹃兰的研究进展

杜鹃兰为兰科珍稀药用植物,具有清热解毒、润肺止咳、活血止痛、消肿散结等功效。为杜鹃兰药用植物资源的保护及开发利用提供参考,从物种特性、繁殖方式、化学成分和药理作用等方面对杜鹃兰的研究进展进行归纳总结,对其今后研究方向进行展望。

影响狐臭柴扦插繁殖成活率的主要因素研究

目的:筛选并优化适于狐臭柴扦插繁殖的主要条件,探索其扦插繁殖的有效技术。方法:以一年生狐臭柴为试验材料,首先进行单因素试验,研究不同扦插材料来源、扦插时期、不同植物生长调节物质及其浓度对扦插成活率的影响。然后进行正交试验,优化不同生长素和细胞分裂素及浸泡时间组合。结果:单因素试验结果表明,狐臭柴扦插适宜的材料为中度遮光下的枝条,适宜扦插时期为芽休眠期,200和400 mg/L 6-BA及200 mg/L NAA能显著提高扦插成活率。正交试验优化后的插穗处理方法为300 mg/L 6-BA+200 mg/L NAA的溶液中浸泡1 h。结论:在狐臭柴芽休眠期剪取中度遮光条件下的枝条为插条,将修剪好的插穗基部置于300 mg/L 6-BA+200 mg/L NAA的溶液中浸泡1 h后扦插,其成活率高达88.33%,且平均根长最长、平均根数最多,生长情况较好。

花椒几丁质酶基因ZaCHIT1的原核表达及纯化

花椒中含有的几丁质酶基因ZaCHIT1在植物病程中诱导相关蛋白表达,在植物对抗真菌病害过程中起重要作用。本研究将原核表达载体pMCSG19-ZaCHIT1转化到大肠杆菌BL 21(DE 3)菌株中,之后进行IPTG诱导表达并从诱导温度、时长和IPTG浓度3个方面检测对ZaCHIT 1重组蛋白表达的影响,以获得最优体系,最优体系为诱导温度37℃、IPTG浓度为1 mmol·L^(-1)、诱导时长为14 h。进一步离心后分析各组分发现,ZaCHIT 1重组蛋白多以可溶性蛋白形式存在。利用Ni-NTA亲和层析纯化方法对ZaCHIT 1重组蛋白进行纯化,发现在经过300 mmol·L^(-1)咪唑洗脱液洗脱后的洗脱组分中的ZaCHIT 1重组蛋白表达浓度最大。经Western Blot鉴定发现,在77.51 kDa处有符合ZaCHIT 1重组蛋白大小的特异性条带出现。本研究将为后续研究ZaCHIT1基因在植物中的抗菌作用机制及结构提供依据。

杜仲EuABCF1基因克隆及表达分析

ABC转运蛋白参与调节植物体内的多种生理过程,本研究从杜仲(Eucommia ulmoides)中克隆得到EuABCF1基因,并对其表达及功能进行研究。EuABCF1基因ORF序列长1809 bp,编码602个氨基酸,相对分子质量67 kDa,等电点6.38,有2个核苷酸结合域,不具有跨膜域和信号肽,属于稳定亲水性蛋白。进化树分析表明,杜仲EuABCF1蛋白与其他物种ABCF1蛋白有一定的同源性,其中与毛果杨(Populus trichocarpa)的ABCF1蛋白亲缘性较近。基因表达分析发现EuABCF1基因在杜仲雄花、根、茎、叶中等不同组织中均有表达,在雄花中表达量最高。在4°C处理下,EuABCF1基因在杜仲叶中的相对表达量呈现先下降后上升;EuABCF1表达对400μmol·L-1 IAA和100μmol·L-1 MeJA也有响应,本研究结果表明杜仲EuABCF1基因可能直接或间接参与IAA、MeJA信号转导及杜仲冷应答。