分子靶标烟草花叶病毒外壳蛋白的结构生物学研究进展

病毒外壳蛋白(CP)是烟草花叶病毒(TMV)基因结构的重要组成部分,其主要功能除保护核酸物质不被降解外,还与TMV的远距离移动及寄主症状有关。目前研究较多的是CP基因介导的抗性、药剂干扰CP的聚合等,而有关靶标CP与药剂的作用机理尚未有系统全面的报道。从结构生物学的角度出发,详细介绍了TMVCP在电镜及单晶衍射技术下的三维结构;比较了国内已报道的CP的基因序列;综述了CP在基因工程领域的应用及其受药剂分子的干扰作用等方面的研究进展。以毒氟磷药剂为例,分析了其可能作用于TMVCP的分子机理,预测了毒氟磷小分子与TMVCP大分子可能的作用位点。有助于进一步研究和发现新型抗TMV药剂。

含酰腙结构的新型吡唑酰胺衍生物对小菜蛾的生物活性

采用浸虫法、夹毒叶片法和叶碟法分别测定了13个含酰腙结构的新型吡唑酰胺衍生物对小菜蛾3龄幼虫的触杀、胃毒和拒食活性。结果表明:该类化合物对小菜蛾3龄幼虫具有较高的胃毒和拒食活性,其中苯环上含有氯原子、且酰腙一端的取代基含有杂原子且体积较小的化合物H7的胃毒和拒食活性最好,明显高于对照药剂毒死蜱。H7 72 h胃毒作用LC50值为0.6 mg/L(毒死蜱的LC50值为7.4 mg/L);有10个化合物的拒食活性高于毒死蜱,其中H7 48 h的拒食中浓度(AFC50)最低,为0.6 mg/L,明显低于毒死蜱(AFC50=6.5 mg/L)。供试化合物对小菜蛾3龄幼虫均无触杀活性。

咪鲜胺及其代谢产物在橙汁中的残留检测方法研究

采用气相色谱电子捕获检测器（GC-ECD）研究了咪鲜胺及其代谢产物在橙汁中的残留检测方法,使用石油醚：丙酮（8∶2,V/V）提取,石油醚萃取净化,将咪鲜胺及其代谢产物在高温下与吡啶盐酸盐反应,待全部转化成其代谢产物2,4,6-三氯苯酚后进行测定。其在橙汁中的最小检出量为10-11 g,最低检测浓度为0.01mg/kg,咪鲜胺在橙汁中的平均添加回收率为72.5-109.1%,变异系数在5.7-9.7%之间,符合农药残留分析的要求。研究结果表明,咪鲜胺在常温和冷冻条件下的消解半衰期分别为：56.3d和105.0d。表明咪鲜胺在冷冻条件下降解缓慢。本实验优化了咪鲜胺衍生化过程与净化方法,具有快速准确、毒性小、灵敏度高、可同时检测多个样品等特点。

细菌分泌系统与茄科雷尔氏菌致病机理的关系研究进展

青枯病(bacterial wilt)的致病菌茄科雷尔氏菌Ralstonia solanacearum主要通过Ⅲ型及Ⅱ型分泌系统等将多种毒性因子输送到细胞外而使寄主植物致病。主要综述了近年来茄科雷尔氏菌Ⅲ型和Ⅱ型分泌系统的Phc、Prh、EPS和Peh 4个调控网络与该病原菌致病性之间的关系,以及2个分泌系统相互之间的关系。可为进一步研究该病害的作用机理及寻找其致病性靶标提供参考。

荧光标记法研究鱼类GABA受体与Ro7-1986/1和Fipronil的相互作用

以苯二氮卓类化合物Ro7-1986/1和氟虫腈(Fipronil)分别与异硫氰酸荧光素(FITC)反应合成了2种γ-氨基丁酸(GABA)受体的配体荧光复合物,即FITC-Ro7-1986/1(简称FITC-Ro7)和FITC-Fipronil;利用傅里叶变换红外光谱(FTIR)和核磁共振氢谱(1H NMR)等手段对其结构进行了表征.以2种荧光配体为探针,采用荧光标记法研究了Ro7-1986/1和Fipronil与鳙鱼(Hypophthalmichthys nobilis)脑内GABA受体的相互作用,得到了亲和常数Kd和最大结合量[RT].同时考察了GABA对Ro7-1986/1与受体相互作用的影响.研究结果表明,Ro7-1986/1和Fipronil与受体的亲和常数Kd分别为(67±5)nmol/L和(346±6)nmol/L;最大结合量[RT]分别为(13.8±1.8)pmol/mg protein和(40.6±3.5)pmol/mg protein;GABA促进了Ro7-1986/1与受体的结合,进一步的研究结果表明,鱼类与哺乳动物脑中GABA受体结构相似;相对于哺乳动物,苯吡唑类杀虫剂Fipronil对鱼类GABA的亲和力较高.

甲氨基阿维菌素苯甲酸盐在水稻环境中的残留及消解动态

采用高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-UVD)测定了甲氨基阿维菌素苯甲酸盐在水稻植株、稻米、稻田水样及土壤中的消解动态和最终残留。水稻、稻米和土壤样品用丙酮-水(7∶3,体积比)提取,水样用二氯甲烷提取,经液液萃取净化,HPLC-UVD检测,外标法定量。结果表明:甲氨基阿维菌素苯甲酸盐在田水中的添加水平为0.050～1.0mg/kg时,回收率为88.44%～94.10%,相对标准偏差(RSD)为3.09%～10.57%;在植株、稻米和土壤中的添加水平在0.10～1.0mg/kg时,回收率分别为86.29%～101.1%,84.49%～105.5%和88.69%～93.27%,RSD分别为11.28%～13.68%,2.62%～6.73%和6.72%～8.89%;在稻米中的检出限为0.018mg/kg,定量限为0.061mg/kg;在植株、水样和土壤中的半衰期分别为1.52～1.61,1.93～2.04和2.01～2.14d;施药浓度为推荐剂量,最多4次,最后一次施药距采收的间隔期为7d时,稻米中甲氨基阿维菌素苯甲酸盐的残留量均低于最低检出浓度。

烯啶虫胺在水稻和稻田环境中的残留及消解动态

采用高效液相色谱-紫外检测器(HPLC-UVD)测定了烯啶虫胺在稻田水、土壤、水稻植株和糙米样品中的消解动态及最终残留。田水样品用二氯甲烷萃取;土壤样品用水提取后经二氯甲烷萃取;水稻植株和糙米样品依次用水、丙酮提取,提取液经液液萃取及柱层析净化;HPLC-UVD检测。当烯啶虫胺在田水和土壤中的添加水平为0.1～5 mg/L和0.1～5 mg/kg,在植株和糙米中的添加水平为0.2～5 mg/kg时,其平均添加回收率在77.2%～100.3%之间,相对标准偏差(RSD)在1.9%～12.9%之间。烯啶虫胺在稻田水、土壤、植株和糙米中方法的定量限(LOQ)分别为0.1 mg/L和0.1、0.2、0.2 mg/kg,检出限(LOD)分别为0.04 mg/L和0.04、0.08、0.08 mg/kg。温室模拟消解动态试验结果显示,以推荐使用高剂量的20倍(有效成分1 500 g/hm2)施药,烯啶虫胺在稻田水、土壤以及水稻植株中的消解动态规律均符合一级动力学方程,其半衰期分别为0.58、3.31及2.70 d,消解速率较快。最终残留试验表明,于大田分蘖期按推荐使用高剂量的1.5倍(有效成分112.5 g/hm2)分别施药3次和4次,间隔期为7 d,距最后一次施药7 d后采样,糙米中烯啶虫胺的残留量均低于LOD值(0.08 mg/kg)及日本规定的最大残留限量(MRL)值(0.5 mg/kg)。

新型砜类化合物对辣椒枯萎病菌的抑菌作用初探

离体条件下采用生长速率法测得2-(苄基砜)-5-(2,4-二氯)苯基-1,3,4-噁二唑(2008334)对辣椒枯萎病菌Fusarium oxysporum菌丝生长具有较强的抑制作用,其EC50值为27.54μg/mL,与对照药剂霉灵(EC50值为29.13μg/mL)相当;同时该化合物对辣椒枯萎病菌孢子萌发亦有一定的抑制作用,EC50值为41.37μg/mL。以质量浓度为100μg/mL的2008334处理辣椒枯萎病菌菌丝,在短时间内菌丝细胞膜通透性显著增强,菌体内还原糖及可溶性蛋白含量均出现先升高后下降的趋势。

含腙类结构化合物生物活性研究进展

含腙类结构的化合物具有杀虫、杀菌、除草等广泛生物活性,在新农药创制中占有重要地位。根据农药用途进行分类,对其生物活性进行了介绍,并对其发展前景作进一步展望。

异丙草胺在玉米和土壤中的残留及消解动态

采用气相色谱-微池电子俘获检测器（GCμ-ECD）测定了900g/L异丙草胺乳油在土壤、玉米植株和玉米籽粒中的消解动态和最终残留。土壤、玉米植株和籽粒样品用石油醚-丙酮（1∶1,体积比）提取,经液液萃取,弗罗里硅土柱净化,GCμ-ECD检测,外标法定量。结果表明：异丙草胺在各供试样品中的添加水平为0.011-1.1mg/kg时,回收率在78.8%-96.4%之间,相对标准偏差（RSD）为0.54%-10.5%;在土壤、玉米植株和籽粒中的定量限（LOQ）均为0.011mg/kg。异丙草胺在土壤和玉米植株中的半衰期,2009年分别为4.7-5.3d和4.1-4.5d,2010年分别为5.4-5.5d和4.9-5.4d。按推荐高剂量（有效成分）2 400g/hm^2及其1.5倍剂量（3 600g/hm2）施药,于玉米苗后茎叶初期施药1次,在玉米乳熟期和成熟期时,玉米籽粒中异丙草胺的最终残留量均低于定量限。玉米收获时（距施药45d）,土壤和玉米中的异丙草胺残留量均低于参考的MRL值（0.1mg/kg）,说明按规定在玉米田使用900g/L的异丙草胺乳油是安全的。

巢蕨基因组DNA提取与RAPD反应体系优化

以新鲜幼嫩的巢蕨叶片为材料,优化了巢蕨叶片基因组DNA的提取方法与RAPD反应体系。结果表明,利用改进的CTAB方法,能够提取出高质量的巢蕨基因组DNA;优化的巢蕨RAPD的最终反应体系(25μL)为:模板DNA(50mg.L-1)1.5μL,引物(1mmol.L-1)1.5μL,2×EasyTaqPCRSuperMiX12.5μL。

2-氰基-3-甲硫基-3-(4-甲基或6-甲基苯并[d]噻唑-2-氨基)丙烯酸酯类化合物的合成和抗病毒活性研究

以氰基乙酸和氰基乙酸乙酯为起始原料,采用活性基团拼接的方法,将苯并噻唑基团引入氰基丙烯酸酯中,设计合成了14个含有苯并噻唑基团的氰基丙烯酸酯(酰胺)类化合物3.所有化合物结构经过1H NMR,13C NMR,红外光谱和元素分析确证,并对所合成的目标化合物3进行了室内抗烟草花叶病毒(TMV)和抗黄瓜花叶病毒(CMV)活性测试.结果表明该类化合物具有一定的抗TMV和抗CMV活性.在0.5 mg/mL时,化合物3b,3c,3d对CMV表现出较好的活体治疗活性,抑制率分别为46.3%,45.1%,43.7%.

具有除草活性的杂环酰胺衍生物

杂环酰胺衍生物因具有良好的生物活性而受到人们的关注,在近代农田化学除草剂中,杂环酰胺类衍生物占有重要地位。按照杂环酰胺类衍生物的结构特征进行分类,介绍了该类化合物在除草活性方面的研究进展。

候选农药病氰硝水解和光解的特性

[方法]采用室内模拟方法研究了病氰硝在水环境中的动力学规律,考察病氰硝的光降解受pH值的影响以及水化学降解受pH值和温度的影响。[结果]在光解条件下的半衰期t1/2分别为5 h[pH值5,(25±1)℃]、1.6 h[pH值7,(25±1)℃]、1.4 h[pH值9,(25±1)℃];该农药的水解半衰期t1/2分别为3.9 d[pH值7,(25±1)℃]、31.4 d[pH值9,(25±1)℃]、6.9 d[pH值7,(37±1)℃]、17.3 d[pH值9,(37±1)℃]、8.7 d[pH值7,(50±1)℃]、4.6 d[pH值9,(50±1)℃],在pH值5的缓冲溶液中较稳定。[结论]按《化学农药环境安全评价试验准则》规定,病氰硝属于易光解,在中性和碱性条件下易水解类农药。

斐济病毒属植物病毒的基因组结构研究进展

近年来,斐济病毒属病毒病的流行发生给我国水稻生产造成了严重损失。对该病毒属病毒的基因组结构的结构基因组学和功能基因组学的研究与分析对农业生产中该类病害的防控研究具有重大的指导意义。

2-氰基-3-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-氨基)-3-苯基丙烯酸酯类化合物的合成及抗病毒活性

以氰乙酸乙酯(氰乙酸)为起始原料,经酯化、缩合、氯化,然后与2-氨基-4-甲基苯并[d]噻唑反应,合成了20个新化合物4.所有化合物结构经过IR,1H NMR,13C NMR和元素分析确证.初步生物活性测试表明:在500μg·mL-1浓度下,该类化合物4具有一定的抗黄瓜花叶病毒(CMV)及抗烟草花叶病毒(TMV)室内活体治疗活性,其中化合物4b,4o,4q对CMV具有较好的活体治疗活性(抑制率分别为45.81%,43.20%,43.09%),化合物4d,4f,4h,4l对TMV具有较好的活体治疗活性(抑制率分别为45.68%,45.19%,45.86%,44.32%),对照药宁南霉素的活体治疗活性分别为56.31%,54.63%.

病毒星表观油水分配系数的测定

[目的]在建立水中病毒星的残留分析方法的基础上,测定病毒星在正辛醇-水中的表观油水分配系数。[方法]采用HPLC法测定病毒星的质量浓度,用摇瓶法测定病毒星在正辛醇-水中的表观油水分配系数。[结果]病毒星在0.05、0.11、1.13 mg/kg质量分数下的平均添加回收率为98.3%、98.4%、91.5%,变异系数为2.2%~3.9%。[结论]摇瓶法测得病毒星在二次蒸馏水中的平均lgKow为3.08。