基于细胞水平评价白及多糖对黑色素生成的抑制作用

目的研究白及多糖对小鼠黑色素瘤细胞B16-F10中黑色素生成的抑制作用及其机制。方法采用CCK-8法检测白及多糖对B16-F10细胞活性的影响;采用NaOH裂解法测定白及多糖对B16-F10细胞内黑色素含量的影响;采用多巴氧化法和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测B16-F10细胞中酪氨酸酶(TYR)活性和酪氨酸酶相关蛋白1(TRP-1)、酪氨酸酶相关蛋白2(TRP-2)的表达情况,并利用分光光度仪检测白及多糖的抗氧化能力。结果白及多糖在0.1~1.0 mg/mL浓度内对B16-F10细胞活性无影响。用0.5和1.0 mg/mL白及多糖处理B16-F10细胞,可降低B16-F10细胞内黑色素含量。1.0 mg/mL白及多糖可显著抑制α-MSH诱导的B16-F10细胞中TYR活性;0.5和1.0 mg/mL白及多糖可显著抑制α-MSH诱导的B16-F10细胞中TRP-1、TRP-2的蛋白表达。白及多糖在0.1~1.0 mg/mL浓度内,DPPH平均清除率为18.85%、27.10%、47.92%、60.65%,抗超氧阴离子平均活力为20.94、22.41、30.68、38.86 U/gprot,羟基自由基平均抑制能力为7.39、8.07、18.84、34.37 U/mgprot。结论白及多糖对B16-F10细胞中黑色素的生成具有良好的抑制作用,其机制可能与降低细胞内黑色素含量、抑制TYR活性和TRP-1、TRP-2的蛋白表达以及抗氧化作用有关。