小叶苦丁提取物通过上调Nrf2/INS蛋白质水平表达降低小鼠高血糖

近年来,高血糖的患病率不断增加,患者身体损伤严重。与常规西药相比,天然产物不良反应少,可延缓高血糖并发症。小叶苦丁是一种珍贵的天然产品资源,含有多种对人体有益的成分。本研究旨在研究不同剂量的小叶苦丁提取物对高血糖小鼠血糖代谢的调节作用。本研究采用脂多糖加链脲佐菌素诱导小鼠高血糖模型,小叶苦丁提取物以低、中、高(5g·kg^(-1)·d-1,10g·kg^(-1)·d-1,15g·kg^(-1)·d-1)3个剂量灌胃给药,连续7周。每周于固定时间采集小鼠尾静脉血测定小鼠空腹血糖值。给药7周后,按规定取每只小鼠的血清和脏器,测定血清中甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、糖化血清蛋白(GSP)、胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、空腹胰岛素(FINS)和胰高血糖素(GC)含量水平。结果显示,模型组小鼠血糖值、各项血清生化指标与正常组小鼠均具有显著性差异(P<0.01或P<0.05),高血糖症状明显。小叶苦丁提取物低、中、高剂量组HDL-C、FINS含量显著高于模型组(P<0.01),TG、CHO、LDL-C含量减少,血糖值显著降低,与模型组相比具有极显著性差异(P<0.01)。中、高剂量组GSP含量较模型组显著降低(P<0.01或P<0.05)。小鼠胰腺组织的H&E染色结果显示,高血糖小鼠在灌胃小叶苦丁提取物后,胰岛细胞形态有所改善;免疫组织化学法观察胰腺组织胰岛素、核因子E2相关因子2蛋白质水平的表达,并采用免疫印迹实验(WB)和实时荧光定量(RT-qPCR)验证。结果表明,胰岛素(INS)、核因子E2相关因子2(Nrf2)蛋白质表达水平上调,其中高剂量组效果最佳(P<0.01)。以上结果提示,小叶苦丁提取物能够降低高血糖小鼠的血糖值,对其胰岛细胞损伤具有改善作用,能够改善高血糖小鼠症状,为临床治疗高血糖提供了新参考。

小叶苦丁枝条提取物的植物乳杆菌发酵代谢组分析

小叶苦丁枝条是小叶苦丁茶生产过程中的废弃物,数量巨大,一般以焚烧的方式处理,造成了不可忽视的环境污染和资源浪费。为实现小叶苦丁枝条资源化利用,作者以益生菌植物乳杆菌对小叶苦丁枝条水提物进行发酵,用LC-MS非靶向代谢组方法研究了小叶苦丁枝条提取物发酵前后物质的构成、分布与变化。通过PCA、PLS-DA等多元统计方法分析发现,小叶苦丁枝条提取物经植物乳杆菌发酵前后存在显著差异的代谢物共175种,其中发酵后上调的100种,下调的75种。单变量统计排名前25的差异代谢物中包含肽类3种,碳水化合物1种,核酸类4种,脂类1种,有机酸1种,黄酮1种,其他14种,这些差异代谢物涉及11条差异显著的代谢途径,其中6条为氨基酸代谢途径。差异代谢物中,发酵后相对含量提高915倍的川皮苷、提高11倍的鹅肌肽等具有抗氧化、抗炎、抗癌、降血糖等生理活性。同时抗生素庆大霉素C1a、林卡霉素发酵后分别提升22672倍和62倍,表明采用乳酸菌发酵技术资源化利用小叶苦丁枝条具有一定的可行性,但还需进一步的安全评估。