国产静注人免疫球蛋白制品Fc段生物学活性分析

目的研究9家中国血液制品企业共计41批次的静脉注射人免疫球蛋白[human immunoglobulin for intravenous injection,IVIG(p H4.0)]制品中Ig G Fc段生物学活性水平。方法基于《中国药典》和《欧洲药典》推荐的IVIG Fc段生物学活性检测方法,自行建立适合本实验室的IVIG Fc段生物学活性检测方法,并利用已建立的方法测定上述样本中Fc段生物学活性。结果 9个厂家IVIG制品中均能检测到针对白喉类毒素抗原的Ig G Fc段生物学活性,且所有样品Fc段生物学活性均高于60%;但每个厂家样品活性各不相同,与厂家A相比,厂家F*>H*>G*>A>C>I>D*>E*>B*(*表示P<0.01,差异显著)。结论所调查的41个批次IVIG制品Fc段生物学活性较高,符合《欧洲药典》检定和限度要求。本研究对国内IVIG制品的有效性做出了评估,为完善制品质量标准提供了理论依据。

会计内部控制缺陷对企业风险的影响与改进对策

会计内部控制在企业运营中非常重要,有助于防范潜在的风险和错误。一些企业的内部控制制度都是根据经验制定,忽视企业全面风险评估,导致内部控制体系看起来有很多控制要求,却忽视部分重大风险或关键控制点,不能有效防止风险。本文将探讨会计内部控制缺陷对企业风险的影响,并提出相关的改进对策。首先,资金活动管理应建立资金业务的岗位责任制,确保不相容岗位相互分离、制约、监督。其次,公司领导、各部门负责人应参与全面预算并对预算执行情况进行回顾。最后,还需要加强对合同管理的内部控制,确保合同签订、执行和终止的合法性和规范性,避免因合同管理不当而引发的风险。

干热法对人凝血因子Ⅷ制品中指示病毒灭活效果验证

目的研究100℃,30 min加热法对人凝血因子Ⅷ制品中指示病毒的灭活效果。方法采用细胞感染法,并以猪细小病毒(PPV)、脑心肌炎病毒(EMCV)作为指示病毒,对3批人凝血因子Ⅷ半成品样品进行病毒灭活效果验证。同时对干热前后样品的活性进行检测,以考察灭活方法对制品活性的影响。结果 3批人凝血因子Ⅷ样品经100℃,加热处理30 min后,均无可以检测到的PPV和EMCV病毒,可使病毒滴度下降4个Log以上。对病毒滴度阴性的样品,取其最低稀释倍数孔上清,接种敏感细胞,盲传3代均无可观察到细胞病变。3批样品干热前活性分别为:30.1 IU/mL、27.6 IU/mL、29.8 IU/mL,干热后效价分别为:22.6 IU/mL、20.0 IU/mL、21.6 IU/mL。结论100℃,30 min加热法对人凝血因子Ⅷ半成品中指示病毒PPV和EMCV具有良好的灭活效果,干热后活性损失分别为25%、28%、28%。

人凝血酶原复合物中人凝血因子Ⅺ残留量检测方法验证

目的 建立酶联免疫吸附法(ELISA)测定人凝血酶原复合物中人凝血因子Ⅺ残留量的方法,并进行方法验证。方法 人凝血因子Ⅺ将与包被在微滴定板上的捕获抗体结合并发生反应。经过适当的洗涤步骤后,生物素一抗结合到捕获的蛋白质上。过多的一抗被洗掉,结合的抗体与辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素反应,加入TMB底物显色,置于酶标仪450 nm波长处检测。对该检测方法的稀释可靠性、准确度、专属性、重复性、中间精密度、线性、范围、耐用性进行验证。结果 该方法准确度、专属性良好,平均回收率为109.2%, RSD值为6.93%;重复性RSD为6.78%,中间精密度RSD为6.75%,精密度良好;线性相关系数r=0.999 9,线性范围内准确度、精确度良好;耐用性验证了孵育时间和试剂盒开启有效期,结果显示孵育时间变化RSD为6.62%,说明该检测方法孵育时间控制在28~32 min,对结果无显著影响;试剂盒开启后按条件保存7 d,前后检测结果RSD为3.84%,说明试剂盒开启后按条件保存7 d对FⅪ检测结果无影响;上述两者结果表明该方法耐用性良好。稀释可靠性结果显示该检测方法检测PCC中FⅪ残留量时存在“钩状”效应,可以通过稀释100~200倍解决。结论 该方法能够满足实验室人凝血酶原复合物中人凝血因子Ⅺ残留量的测定。

国内7个厂家静注人免疫球蛋白产品成分分析

目的调查国内7个厂家静注人免疫球蛋白(IVIG)制品中各种免疫球蛋白成分含量,为改进国产IVIG质量提供参考依据。方法采用ELISA法测定市售的国内7家血液制品厂生产的26批次IVIG制品中IgG、IgA、IgD、IgE、IgM等免疫球蛋白的含量以及IgG亚型含量;同时测定进口某品牌6批次IVIG制品做对照。结果免疫球蛋白含量国内与进口制品比较,IgG(g/mL):0.052±0.003 vs 0.048±0.003;IgA(μg/mL):154.1±30.8 vs 120.3±52.5;IgM(μg/mL):7.6±1.5 vs 4.7±5.0;IgD(ng/mL):145.5±29.1 vs 207.8±23.9;IgE(ng/mL):13.9±2.7vs 93.7±17.8;IgG亚型含量IgG1(%):58.4±3.3 vs 60.4±2.1;IgG2(%):32.0±2.9 vs 31.5±1.8;IgG3(%):7.0±1.1 vs 6.4±0.5;IgG4(%):2.6±1.1 vs 1.7±0.9。结论国内外不同厂家的IVIG制品中IgG含量、IgG亚型差异不明显,均接近正常血浆比例,达到药典相关规定。除IgM含量外IgA、IgD、IgE等含量差异较明显(P<0.05)。

国产2种静注人免疫球蛋白大肠杆菌O157∶H7的IgG抗体谱比较研究

目的利用本研究室建立的抗体谱检测方法,考察比较我国2家血液制品企业市售静注人免疫球蛋白p H4(IVIG)的抗体谱情况。方法以大肠杆菌O157:H7总蛋白为抗原,利用蛋白质双向电泳技术结合蛋白免疫印迹法进行检测。结果经本实验获得了较高质量的IVIG制品Ig G抗体谱图,厂家A IVIG制品中含有针对大肠杆菌O157:H7的Ig G抗体202个,厂家B IVIG制品含有针对大肠杆菌O157:H7的Ig G抗体130个,且二者识别的抗原种类不完全相同。结论检测的2个厂家IVIG制品中均具有针对大肠杆菌O157:H7的广谱抗体,但2者抗体谱不一致,反映出2个厂家IVIG制品的独特性。

静脉注射人免疫球蛋白具体成分调查研究

目的IVIG的主要成分是IgG(≥95%),IgG含量高低是衡量IVIG质量优劣的一项重要指标。此外,IVIG中还含有少量的其他免疫球蛋白,这些免疫球蛋白对IVIG临床治疗效果具有重要影响。目前尚无厂家或研究机构对国内血液制品企业生产的IVIG有效蛋白成分进行检测。本项目调查、比较、分析国内不同血液制品厂所生产的IVIG中免疫球蛋白成分含量,以期为血液制品厂选择原料血浆、改进生产工艺以及为医院临床使用剂量提供参考依据。方法采用ELISA法测定不同厂家不同批次的IVIG制品中IgG、IgA、IgD、IgE、IgM等免疫球蛋白的含量以及IgG亚型含量。

交叉免疫电泳法对人抗凝血酶-Ⅲ肝素结合组分的检测

目的建立检测人抗凝血酶-Ⅲ(AT-Ⅲ)中肝素结合组分的方法。方法利用火箭电泳法确定AT-Ⅲ抗原抗体比例,以交叉免疫电泳法检测AT-Ⅲ中的肝素结合组分,加热处理方法制备无肝素结合力的AT-Ⅲ样品。结果免疫电泳检测显示沉淀峰清晰,明确分辨出AT-Ⅲ样品中肝素结合组分及非结合组分并计算比例:混合血浆中结合肝素的AT-Ⅲ组分比例约为85.8%,AT-Ⅲ标准品、商业化制品及本实验室自制样品中结合肝素的AT-Ⅲ组分比例均接近100%。AT-Ⅲ样品经热处理(60℃,10h)后,不含枸橼酸钠的样品全部失去肝素结合力,在枸橼酸钠作保护剂的样品中,肝素结合组分占68.5%。结论建立的交叉免疫电泳法能够有效用于人AT-Ⅲ研发、生产时样品中肝素结合组分的检测。

国产β-淀粉样蛋白聚合寡聚体的方法及效果初探

目的探讨国产人源性β-淀粉样蛋白(Aβ)聚合寡聚体的方法及其聚合效果。方法 Aβ40、Aβ42室温条件分别溶解于纯度≥99.0%的六氟异丙醇中,使Aβ浓度至1 mmol/L、20 min;高纯氮处理使六氟异丙醇完全挥发后,添加纯度≥99.5%的二甲基亚砜,使Aβ浓度至6 mmol/L,30℃水浴超声10 min;添加含0.05%十二烷基硫酸钠的磷酸盐缓冲液(0.02 mol/L,p H7.4),Aβ浓度至120μmol/L;再用上述缓冲液分别稀释Aβ至40、80μmol/L,形成3种浓度梯度。37℃恒温摇床100 r/pmin行聚合反应2、12、24、48、72、96和120 h;SDS-PAGE,银染处理,分别考察上述条件的聚合效果。结果 3种浓度的Aβ40寡聚体聚合效果有很大差异:40μmol/L聚合48、120 h,80μmol/L聚合12 h有较明显的二十二聚体出现,120μmol/L聚合≥12 h,有四聚体至十聚体形成。但3种浓度Aβ40形成寡聚体又有一定相似性:均有大量的单体、二聚体、三聚体存在,随着聚合时间延长,寡聚体总量及高分子量寡聚体形成量并未明显增加。3种浓度的Aβ42聚合效果有明显区别:随着聚合浓度升高,十二聚体、二十一聚体的形成量逐渐下降,相同聚合时间内,随着浓度的升高,四聚体至十聚体形成量逐渐增加;但3种浓度的Aβ42聚合也有相似处:均存在大量的单体、二聚体、三聚体,随着聚合时间的延长,四聚体至十聚体形成量有增加趋势,此与Aβ40聚合效果有明显差异。结论采用常用的方法均能使国产Aβ40、Aβ42形成寡聚体;总体来讲,相对于聚合时间,聚合浓度对形成高分子量的Aβ寡聚体种类影响较大。

资产生命周期管理在血液制品企业的实践与探索

血液制品企业主要是以健康人血浆为原料,采用生物学工艺或分离纯化技术制备的生物活性制剂,包括白蛋白、免疫球蛋白、各种凝血因子等。在医疗急救及某些特定疾病的预防和治疗上,血液制品有着其他药品不可替代的重要作用。然而,随着竞争的加剧和技术的不断进步,企业面临着越来越多的挑战。资产生命周期管理作为一种系统化的管理方法,被广泛应用于各个行业。它以资产申请到资产处置的全生命周期为视角,通过优化资源配置、降低成本、提高效率等手段,实现企业资产价值最大化。

冻干人纤维蛋白原质量提高的研究

目的通过调整生产工艺和工艺参数来提高产品的质量。方法健康人血浆化浆后采用离心方法去除冷沉淀,然后进行8%低温乙醇反应获得FI沉淀。FI沉淀进行抽提溶解,过滤后上清进行S/D病毒灭活(0.3%磷酸三丁酯和1%的吐温80);灭活后制品再进行2次8%乙醇反应以去除S/D试剂同时对制品进一步纯化,最终获得F1-2沉淀;对F1-2沉淀进行抽提溶解,过滤后超滤透析浓缩,再进行配制、除菌过滤,分装、冻干;冻干结束进行100℃30 min干热病毒灭活。结果最终的制品的纯度提高了15%左右,外观和可见异物合格,同时收率提高了30%左右。结论用改进工艺后的工艺制备的冻干人纤维蛋白原的质量和收率都得到了提高。

“营改增”实施对企业的具体影响及其应对策略

近些年来,我国逐渐在各地开展营业税改增值税的政策,这是我国税收制度一次非常重要的减税措施。国家希望通过这次"营改增"的试点,解决对企业重复征收增值税和营业税的问题,并通过优化税收结构,减轻我国企业的税负,不仅有利于我国企业的健康发展,也有利于我国调整经济结构,提高经济发展的质量。

关于提升除菌过滤工艺药液灌装率的探讨

目的基于本公司除菌过滤工艺,建立1套提升药液灌装率的优化方案。方法通过阐释国内外法规对除菌过滤的定义和要求,并结合公司现行除菌过滤程序,制定了1套硬件和操作程序的优化方案,并对该方案进行药液回收率评估和潜在失效模式与后果分析风险评估(FMEA)。结果对现行除菌过滤工艺优化后进行估算,每吨血浆可增加人凝血酶原复合物灌装量88瓶;人血白蛋白(10 g,20%)灌装量12瓶;静注人免疫球蛋白(2.5 g,5%)灌装量12瓶;每吨血浆增收3.72万元。该优化方案的FMEA风险评估结果为低风险。结论通过药液回收评估结果和FMEA风险评估结果能够证明该优化方案具有现实可行性,值得借鉴和推广。

技术创新促发展 树立品牌稳增长

2012年岁末，贵州省人民政府新闻办公室、贵州省工商行政管理局等八家单位在省内各大媒体、官方网站发布了“贵州自主创新品牌100强”认定结果，贵211泰邦生物制品有限公司（以下简称泰邦生物）榜上有名。这是该公司继获得“贵州省100强企业”、“贵州省认定企业技术中心”、“贵阳市非公经济十强纳税大户”、“贵阳市提速增效单位”、“贵阳市知识产权试点企业”、“名牌产品”“2012年度中国优秀创新企业”称号后，

基于供应链视角下企业纳税管理的思考

随着我国税收环境的不断完善,纳税筹划已成为企业有效降低税收负担的一种主要方式。企业在选择纳税筹划方案之前,不仅要充分考虑自身实际经营状况,还要充分考虑企业与其他企业、企业与税务机关、企业与税务代理机构之间的关系,主要是由于这些关系将直接对企业能否正确选择纳税筹划方案、所选择的纳税筹划策略能否帮助企业实现企业价值最大化产生。任何企业在经营管理过程中都不可能在所有方面具备优势,因此部分现代企业管理的核心思想是:企业进行的任何经济活动、经营活动、业务流程不能够为企业创造价值,而对于不能为企业创造价值的部分要被剔除。这些环境的变化对现代企业纳税管理的活动提出了更高的要求。而供应链的结构安排与纳税管理之间的共通性、相互支持的基本特性,正好充分满足了新环境变化提出的要求。本文将以A企业为例,通过对相关概念的分析和阐述,站在企业内、外部供应链的角度,对纳税管理活动进行安排,然后为企业纳税管理的优化,提出内部供应链安排的有效建议。

国产静脉注射人免疫球蛋白制品中凝血激活物水平分析

目的分析11家中国血液制品企业共计64批次上市后的静脉注射人免疫球蛋白（immunoglobulin for intravenous injection,IVIG）（p H 4）制品中凝血激活物水平,对国内IVIG制品在促凝血方面的安全性作出评估,为提高制品质量标准提供参考。方法利用非活化的部分凝血活酶时间法（non-activated partial thromboplastin time,NAPTT）、凝固法（一期法）及本实验室建立的改良凝血酶生成试验（modified thrombin generation test,M-TGT）,分别测定64批次国产和7批次进口IVIG样品的NAPTT、系列凝血因子活性、活化凝血因子Ⅺ（FⅪa）的含量及凝血酶生成含量达到最高值时所需时间（time to peak,TTP）,分析IVIG的凝血激活物水平。结果除国内厂家F所生产的2批IVIG中FⅪ活性为0.030～0.036 IU/ml外,其余国产62批次产品中FⅪ活性均低于试剂最低检测限未检出;所有产品中TTP均大于40 min,FⅪa含量均小于0.37 nmol/L,NAPTT均大于203 s。结论所调查的11家共计64批次的国产IVIG制品的凝血激活物水平均较低。今后在我国是否推行IVIG制品的凝血激活物检测尚需进一步研究。

胶原包被条件对血管性血友病因子胶原结合法测定FⅧ制品中血管性血友病因子的影响

目的通过考察不同胶原包被条件对血管性血友病因子(von willebrand factor,vWF)与胶原结合的影响,建立vWF胶原结合法(vWF collagen binding assay,vWF:CBA)检测FⅧ制品中vWF活性。方法将胶原Ⅲ分别按以下4组条件包被ELISA板:不同pH(2.8、4.0、5.2、6.4、7.4、8.8、9.8)的缓冲液,不同盐浓度(0、0.05、0.1、0.15、0.2、0.3、0.4、0.6 mol/L NaCl)的缓冲液,不同胶原Ⅲ浓度(5、2.5、1、0.5、0.25、0.125μg/ml),不同包被温度(4、25、37℃)。以5个不同稀释度的vWF标准品为样品,进行vWF:CBA法测定,每种包被条件下绘制1条标准曲线,同时检测每种包被条件下方法的重复性。将标准曲线线性和方法重复性较好的几组条件做为最佳包被条件,验证该包被条件下vWF:CBA法的特异性、重复性,获得标准曲线范围。结果当胶原Ⅲ溶解于含0.15 mol/L NaCl,pH 6.4的磷酸缓冲液中,在4℃条件下以2.5μg/ml包被时,vWF与胶原的结合效率较高。将该包被条件下的vWF:CBA法用于测定冷沉淀上清及FⅧ制品中vWF活性,具有较好的特异性和重复性。结论不同的包被条件对胶原结合法测定vWF活性具有较大的影响,因此,在采用胶原结合法测定FⅧ制品中vWF活性时,应对包被条件进行优化。

客户信用风险管理在应收账款管理过程中的应用探讨

赊销可以扩大销售规模并促进企业利润增长,但同时也带来了收款难度的增加和坏账的风险。为了解决这些问题,企业需要采取一系列管理措施:第一,建立客户档案数据库,全面提升信息管理效率。第二,建立新老客户信用等级评估机制和流程,通过量化指标对客户进行综合评分,以确定信用等级。第三,合理设定信用期和信用额度,以年度再评估和特殊情况再评估相结合的方式,保障信用政策的灵活性和有效性。第四,建立特殊审批流程,当超信用额度或前期应收账款已超信用期时,执行特殊审批以确保业务的正常开展。这些措施可以为企业在激烈的市场竞争中保持良好的财务状况奠定基础。

溶剂/去污剂处理法对人凝血因子Ⅷ中指示病毒灭活效果的验证研究

人凝血因子Ⅷ（humancoagulationfactorⅧ，FⅧ）等血液制品在和平／战争时期的急创伤救治及特定疾病防治中发挥重要作用，但其病毒安全性不容忽视，对血液制品进行有效的病毒灭活可明显降低因输注血液制品而传播病毒性疾病的风险，并保证血液制品的病毒安全性。为尽可能降低血液制品的病毒传播风险，国内、外颁布了相关指导原则，对制品的病毒灭活／去除作出了具体要求。

两种因素对体外聚合β淀粉样蛋白寡聚体的影响

目的探讨β淀粉样蛋白(amyloid-β,Aβ)起始聚合浓度及PBS体系中添加SDS对Aβ寡聚体生成的影响。方法 Aβ_(40)、Aβ_(42)经六氟异丙醇(1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol,HFIP)单体化处理后,分别溶于PBS及添加0.05%SDS的PBS中,Aβ样本250、125、62.5、31.2、15.6及7.8μmol/L梯度聚合,37℃恒温,100 r/min聚合72 h后,进行SDS-PAGE分析。结果 Aβ_(40)、Aβ_(42)聚合的寡聚体生成量随着Aβ起始浓度的升高而增加。Aβ_(40)在无SDS制备条件下能生成大量二聚体、三聚体及少量十二聚体;SDS制备条件下生成二聚体及少量十二聚体。无SDS制备条件250、125及62.5μmol/L浓度的Aβ_(42)能生成三聚体及中、高相对分子质量的寡聚体弥散带;SDS制备条件250、125、62.5μmol/L浓度的Aβ_(42)可生成三聚体及中等相对分子质量的寡聚体,31.2μmol/L浓度的Aβ_(42)可生成低、中、高相对分子质量的寡聚体。结论适合的起始聚合浓度有利于Aβ_(40)、Aβ_(42)寡聚体的生成;PBS中添加0.05%SDS有利于生成稳定的Aβ_(42)寡聚体,但不利于Aβ_(40)寡聚体的生成。