贵州齿兰环斑病毒的分子鉴定

为有效地控制贵州兰花的病毒，将经ELISA方法检测为齿兰环斑病毒（ORSV）阳性的蝴蝶兰样品摩擦接种至其枯斑寄主苋色藜进行纯化，RT-PCR 克隆并连接至 pMD18-T 载体后测序，用 DNA-MAN7．0和MEGA5．0软件进行核苷酸序列分析。结果表明：成功克隆该病毒CP基因，其序列长度为477 bp，编码158个氨基酸残基；序列同源性分析显示，该分离物的CP基因与已报道的11种ORSV各地分离物序列同源性高达96％～99％，而与同属其他3种病毒CP基因同源性均低于70％。证明，贵州蝴蝶兰上感染的病毒为 ORSV。

蓝布正提取物对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马NT-3,BDNF蛋白表达的影响

目的:观察蓝布正提取物(GHE)对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力的影响并探讨其作用的机制。方法:采用双侧颈总动脉结扎法制作VD大鼠模型,将大鼠随机分成假手术组,模型组,GHE高、中、低剂量组(7,3.5,1.75 g·kg^(-1))和阳性药组(天保宁银杏叶片,0.007 g·kg^(-1)),各组灌胃相应药物,每日1次,连续35 d,在第30~35天进行Morris水迷宫实验检测大鼠的学习记忆能力,Morris水迷宫实验结束后处死大鼠,收集大脑样本,免疫组化法检测海马CA1区B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2,神经营养因子-3(NT-3),脑源性神经营养因子(BDNF)蛋白表达。结果:与模型组比较,GHE高、中剂量组可明显缩短大鼠的逃避潜伏期,增加穿越平台数(P<0.05);GHE高、中、低剂量组可显著降低海马CA1区Bax表达,升高Bcl-2,NT-3,BDNF表达(P<0.05,P<0.01)。结论:GHE能改善VD大鼠的学习记忆能力,其机制可能与促进海马CA1区NT-3,BDNF的表达,抑制神经细胞凋亡有关。

蓝布正对大鼠梗死灶周围大脑皮质神经元凋亡和蛋白表达的影响

目的:观察蓝布正对局灶脑缺血大鼠梗死灶周围大脑皮质神经元凋亡及蛋白表达的影响,探讨其促脑卒中后神经功能恢复作用及机制。方法:72只SD大鼠采用线栓法建立脑缺血损伤模型(p MCAO),随机分成假手术组,模型组,蓝布正高、中、低剂量组(7.00,3.50,1.75 g·kg-1),银杏叶片组(0.007 g·kg-1),连续ig给药3 d。进行神经功能评分,四氮唑红(TTC)染色观察大鼠的脑梗死范围,苏木素-伊红(HE)染色观察梗死灶周围大脑皮质的病理形态学改变,原位细胞凋亡检测(TUNEL)梗死灶周围大脑皮质神经元凋亡,免疫组化检测梗死灶周围大脑皮质中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达的情况。结果:模型组一侧大脑中动脉永久性栓塞3 d大鼠神经功能评分增加,脑梗死范围增多,梗死灶周围大脑皮质部分神经元变性,Bcl-2蛋白表达下降,Bax蛋白水平升高,与假手术组比较,差异具有统计学意义(P<0.01);与模型组比较,蓝布正高、中、低剂量组均能不同程度减少神经功能评分,缩小脑梗死范围,改善梗死灶周围大脑皮质的病理形态学改变;抑制梗死灶周围大脑皮质神经元凋亡,促进抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,抑制促凋亡蛋白Bax表达(P<0.05)。结论:蓝布正对大鼠脑缺血性损伤具有一定的保护作用,机制可能与其促进梗死灶周围大脑皮质Bcl-2水平增加,抑制Bax活性,提高脑组织抗缺血损伤的能力和抑制神经细胞凋亡有关。

蓝布正对大脑供血供氧及止血耐眩晕作用的影响

目的:实验观察蓝布正促进大脑供血供氧、止血、耐眩晕作用。方法:将小鼠分为空白对照组、蓝布正组(10.0g/kg、5.0g/kg、2.5g/kg)、天保宁组(0.01g/kg)进行断头后张口喘气实验、耐常压缺氧实验;将大鼠分为空白对照组、蓝布正组(7.00g/kg、3.50g/kg、1.75g/kg)、天保宁组(0.007g/kg),双侧颈总动脉结扎后测量大脑含水量;将豚鼠分为空白对照组、蓝布正组(5.00g/kg、2.50g/kg、1.25g/kg)、氟桂利嗪组(0.008g/kg),进行氯仿致眩晕实验;将小鼠分为空白对照组、蓝布正组(10.0g/kg、5.0g/kg、2.5g/kg)、氟桂利嗪组(0.002g/kg),经机械致眩晕后进行水迷宫测试;将小鼠分为空白对照组、蓝布正组(10.0g/kg、5.0g/kg、2.5g/kg)、云南白药组(0.2g/kg),完成止血试验。结果:蓝布正组(10.0g/kg)在断头后张口喘气试验和耐常压缺氧试验中具有显著差异;蓝布正组(7.00g/kg、3.50g/kg、1.75g/kg)及天保宁组(0.007g/kg)在双侧颈总动脉结扎后具有不同程度减轻由缺血引起的脑水肿作用;蓝布正组(5.00g/kg、2.50g/kg、1.25g/kg)和氟桂利嗪组(0.008g/kg)在对氯仿致眩晕实验中都具有程度不同的耐受作用;蓝布正组(5.0g/kg)在机械致眩晕后进行水迷宫测试中有显著差异;蓝布正组(10.0g/kg、5.0g/kg、2.5g/kg)和云南白药组(0.2g/kg)在出血后止血方面有一定的止血作用,止血效果因出血部位的不同而存在差异。结论:蓝布正有改善对大脑供血供氧及止血耐眩晕的作用。

蓝布正提取物对血管性痴呆小鼠海马NF-κB、IL-6表达的影响

目的:观察蓝布正提取物对血管性痴呆小鼠学习记忆能力及海马核因子κB(NF-κB)、白介素-6(IL-6)表达的影响。方法:采用脑缺血再灌注合并尾静脉放血的方法制备小鼠血管性痴呆模型,将小鼠随机分成假手术组,模型组,天保宁0.01g/kg剂量组,蓝布正10g/kg、5g/kg、2.5g/kg剂量组,每组12只,各组灌胃相应药物20ml/kg,连续35d。给药35d后利用跳台仪、Morris水迷宫检测小鼠的学习记忆能力;采用苏木素-伊红(HE)染色考察海马区病理形态;采用免疫组织化学染色法检测海马区NF-κB、IL-6表达。结果:与模型组相比,蓝布正10g/kg、5g/kg剂量组小鼠的逃避潜伏期明显缩短,穿越平台数显著增加;与模型组比较,蓝布正10g/kg、5g/kg、2.5g/kg剂量组小鼠海马组织病变情况改善,海马区NF-κB、IL-6表达显著下降。结论:炎症反应在血管性痴呆的发生中起到重要作用,蓝布正可能是通过降低NF-κB表达,抑制炎性因子(如IL-6)的释放,保护脑神经元,改善血管性痴呆小鼠的学习记忆能力。

蓝布正提取物对老年痴呆小鼠学习记忆能力及海马CA1区NF-κB p65/IKK-α/IκB-α通路表达的影响

目的:观察蓝布正提取物对老年痴呆(AD)小鼠学习记忆能力的影响并探讨其作用机制。方法:除空白组皮下联合腹腔注射等体积生理盐水,其余各组采用皮下注射D-半乳糖联合腹腔注射亚硝酸钠复制AD模型小鼠,随机分为6组,即空白组、模型对照组、吡拉西坦阳性对照0. 8g/kg组、蓝布正提取物2. 5、5、10g/kg组,除空白组和模型对照组灌胃等体积蒸馏水,其余各组灌胃相应药物。Morris水迷宫试验检测小鼠学习记忆能力,免疫组织化学法检测小鼠海马CA1区NF-κB p65、IKK-α、IκB-α、PI3K蛋白表达量。结果:与模型对照组比较,蓝布正提取物10g/kg组能明显改善AD小鼠的学习记忆能力,显著缩短逃避潜伏期;蓝布正各组明显改善CA1区病理形态;蓝布正提取物2. 5、5、10g/kg组能显著降低海马CA1区NF-κBp 65、IκB-α、PI3K、IKK-α蛋白的表达。当蓝布正提取物在2. 5g/kg以上剂量时可在一定程度上减轻炎症反应。结论:蓝布正提取物能改善AD小鼠的学习记忆能力,其机制可能与其抑制海马CA1区NF-κB p65、IKK-α、IκB-α、PI3K蛋白的表达有关。

金乌骨通胶囊治疗骨性关节炎的成本-效果分析

目的探讨金乌骨通胶囊治疗骨性关节炎的成本-效果分析。方法以"金乌骨通胶囊"为主题词,在国内相关数据库进行检索以及企业提供的临床文献资料,检索期限自数据库建库至2013年2月15日。筛选合格研究的6篇文献进行结果梳理,以临床治愈率和总有效率为产出指标进行成本-效果分析。结果以临床治疗总有效率作为效果指标,金乌骨通胶囊治疗风湿和类风湿骨性关节炎、腰椎骨关节炎、膝骨性关节炎、手部骨性关节炎、寒湿痹阻型强直型脊柱炎优于对照组,但其使用成本也略高于对照药品吡罗昔康片、西乐葆胶囊、布洛芬片、柳氮磺吡啶片、杜仲颗粒,存在成本略高、疗效较好的情况。以临床治愈率作为效果指标,金乌骨通胶囊治疗风湿和类风湿骨性关节炎、腰椎骨关节炎、手部骨性关节炎、寒湿痹阻型强直型脊柱炎优于对照药品,但其使用成本也略高于对照药品吡罗昔康片、布洛芬片、柳氮磺吡啶片、杜仲颗粒,也存在成本略高、疗效较好的情况。在敏感性分析中,发现在治疗膝骨关节炎时即使金乌骨通胶囊价格上升20%,以总有效率作为指标进行分析时,金乌骨通胶囊仍然优于西乐葆胶囊。结论金乌骨通胶囊临床应用安全、有效,且经济合理。