拮抗菌巨大芽孢杆菌L2发酵条件的响应面优化

为探明拮抗菌巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)L2的发酵条件,提高其抑菌活性,以链格孢菌(Alternaria alternaria)为指示菌,以抑菌圈直径为响应值,优化其发酵条件。在单因素试验的基础上,采用响应面法对发酵条件中各因素进行优化。结果表明:最优发酵条件为牛肉膏4.6 g/L,氯化钠3.0 g/L,初始p H值为7.0,葡萄糖15 g/L,接种量6%,装液量50 m L/250 m L。在此优化条件下,抗菌物质的抑菌圈直径大小从未优化前的(14.55±0.43)mm提高至(34.99±0.14)mm,抑菌圈直径增加了140.48%。

巨大芽孢杆菌L2粗提物的抑菌效果及其抑菌成分分析

对巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)L2粗提物进行初步分离,以青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)为指示菌进行活性追踪,并利用气质联用(GC-MS)法分析其活性成分。结果表明:粗提物洗脱组分LE4-5在质量浓度为1.4mg/mL时对青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)RS-2、根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)T-37及胡萝卜软腐欧文氏菌(Erwinia carotovora)EC-1的抑制率分别为91.04%、59.58%及23.83%;对菌株RS-2和T-37的IC_(50)值分别为(0.512±0.056)mg/mL和(1.215±0.078)mg/mL。GC-MS分析结果发现,粗提物洗脱组分LE4-5的主要成分为亚油酸(23.607%)、亚油酸甲酯(14.444%)、油酸(4.337%)等不饱和脂肪酸。