转hrap基因马铃薯获得晚疫病抗性研究

马铃薯晚疫病(Phytopthora infestans)是制约马铃薯生产的主要病害之一。为了扩大马铃薯抗病基因源,提高栽培马铃薯的抗病能力,本试验利用根癌农杆菌介导的方法,将由harpinPss引起过敏反应的甜椒中分离出来的一种过敏反应促进蛋白hrap基因导入马铃薯品种"Burbank"中。结果表明,获得的转化植株经PCR检测其阳性率为61.15%;Southern杂交有53.85%的植株表现阳性;对转化材料进行RT-PCR检测结果,表明导入的hrap基因已整合到马铃薯DNA中;从转化植株中分离hrap基因与GenBank中的hrap cDNA(GenBank:AF168415)进行DNA测序结果比较,两者的相似度达99.3%。通过对转基因植株进行活体接种抗病性检测,转hrap基因的马铃薯获得了抗晚疫病(Phytopthora infestans)植株。

^(60)Coγ辐射诱导马铃薯(Solanum tuberosum)基因组变异的SRAP标记分析(英文)

[目的]探讨60Coγ射线对马铃薯(Solanum tuberosum)染色体的诱变效应。[方法]采用不同辐照剂量的γ射线对费乌瑞它微型薯进行辐射处理,利用SRAP分子标记,对不同处理的VM1代及VM2代基因组变异进行分析。[结果]VM1代分析结果表明,88对引物有30对表现多态性,引物多态性比率为34.1%,共获得225条扩增条带,其中64条为多态性条带,条带多态性比率为28.4%。多态性表现形式有条带增加和缺失。选择25对有多态性的引物对VM2代进行扫描,5对显带不良,20对中有9对表现多态性,获得多态性条带9条,其中仅4条在VM1中检测到,其余5条是新增的缺失条带。VM1代的多态性条带在VM2代中的检出率仅为9.8%。选择表现稳定、清晰的9条多态性条带进行回收、克隆、测序,获得6个片段的DNA序列。经比对分析,5个片段序列与马铃薯染色体组部分片段的相似性为77%~89%,其中3个序列位于抗性基因簇中;另1个片段序列与番茄第5染色体的部分序列相似性为93%。[结论]γ辐照可以导致马铃薯基因组DNA发生变异,多态性条带数与辐照剂量之间没有明显的相关性,变异的多态性条带缺失数高于条带增加数。